Современные автоматизированные методики исследования состава и свойств крови



Фотогемометрия

Это более точный метод определения содержания гемоглобина. Так цианметгемоглобиновый фотометрический метод основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин (окрашенное стойкое соединение) под влиянием сложного раствора, содержащего NaHCO3 - 1г, K3[Fe(CN)6] - 0,2 г и дистиллированную воду - до объёма 1л (или применяется другой реактив с подобным действием).

Под влиянием железосинеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина, который при действии цианида калия превращается в цианметгемоглобин. Соотношение крови и реактива - 1:250 (0,02 мл крови и 5 мл реактива). Через 20 мин, необходимых для взаимодействия, определяют концентрацию цианметгемоглобина с помощью спектрометра либо фотоэлектроколориметра (ФЭК).

 

Цитофотометрия

Этот метод основан на фотометрическом измерении степени поглощения света определённых длин волн, например, взвесью эритроцитов. Процент задержанного света прямо пропорционален числу эритроцитов.

В качестве разводящей жидкости используют 3,5% раствор NaCl. Готовят разведение крови 1:500 и 1:700 и определяют на фотоэлектрокалориметре с учётом построенной калибровочной кривой число эритроцитов. Этот метод удобен для серийной работы, однако недостатком его является зависимость результата не только от количества эритроцитов, но и от их размера и концентрации гемоглобина. Ошибка при этом методе может достигать 30-40%.

Поэтому в настоящее время внедряются в практику автоматические приборы для подсчёта частиц крови.

Электронно-автоматический метод

Он основан на разных принципах, но наиболее часто применяется импульсный принцип - разница электропроводности частиц крови и разбавляющей их жидкости. Определённое количество разведённой 0,85% раствором NaCl (или другим электролитом) крови пропускают через микроотверстие. Проходящая клетка увеличивает сопротивление между электродами, возникающий импульс передаётся на счётное устройство с цифровой индикацией. Производительность аппаратов этого типа велика: процесс подсчёта длится не более 20 с, ошибка 1-2%.

Автоматические системы по гематологии постоянно совершенствуются. Созданы полностью автоматические линии, позволяющие быстро и точно проводить гематологические исследования сразу по нескольким параметрам. Например, автоанализатор "Техникон" из одной порции венозной крови (2мл) определяет 7 параметров: количество эритроцитов, лейкоцитов, концентрацию гемоглобина, гематокрит, среднее содержание гемоглобина в одном эритроците, средний объём эритроцита, процентную концентрацию гемоглобина в одном эритроците. Первые 4 показателя определяются прямым измерением, а 3 последующих - путём математического вычисления в электронном устройстве из предыдущих величин. Результаты регистрируются с помощью самописца на диаграммной ленте в виде зубцов. Эта запись, выраженная общепринятыми единицами (норма для мужчин и женщин указывается заштрихованными участками), может быть использована немедленно. В этом автоанализаторе исследуется один образец крови за 1 мин по 7 параметрам.

Существуют автоанализаторы для подсчёта лейкоцитарной формулы, а также есть аппараты, определяющие по 7 параметров как венозной, так и капиллярной крови.

 

Тромбоэластография

Это метод записи процесса свёртывания крови и образования сгустка на тромбоэластографе.

Принцип работы. Исследуемая кровь набирается прямо в цилиндрическую кювету и в неё погружается металлический цилиндр, который меньше внутренней полости кюветы, и они не касаются. Электрическим приводом кювета периодически (через 9 с) поворачивается вокруг вертикальной оси на 5 градусов. Угол поворота цилиндра определяется состоянием пробы: пока кровь жидкая, при движении кюветы цилиндр остаётся неподвижным, затем по мере образования нитей фибрина, он начинает следовать за кюветой, причём угол поворота возрастает с увеличением упругости сгустка. Через преобразователь электрические сигналы, регистрирующие угол поворота поршня, усиливаются и записываются на бумажной ленте. Полученная запись - это тромбоэластограмма (ТЭГ). Запись проводят до тех пор, пока расходящиеся ветви тромбоэластограммы станут параллельными.

Схема тромбоэластограммы

Основными показателями ТЭГ являются следующие.

R - время реакции - от момента наполнения кюветы кровью до установления её в аппарат и от начала записи ТЭГ до того места, где её кривые расширяются на 1 мм. R отражает скорость образования протромбиназы и тромбина, а также превращение фибриногена в фибрин. Оно почти соответствует времени рекальцификации и времени спонтанного свёртывания крови. R для венозной крови 7 мин.

К - время образования сгустка - от конца времени реакции (R) до расширения ветвей ТЭГ на 20 мм, пока тромбин превращает фибриноген в фибрин и образуется фибриновый сгусток. Чем больше тромбина, тем короче К. Удлиняется К при недостатке тромбина или замедленном его образовании, а также при дефиците фибриногена и тромбоцитов, а укорачивается при их избытке. При гиперкоагулемии К значительно укорочен или вообще не определяется. К венозной цельной крови - 3,9 0,1 мин.

МА - максимальная амплитуда - измеряется от поперечной оси в месте наибольшего расхождения ТЭГ, когда объём, плотность и эластичность сгустка становятся максимальными. МА венозной цельной крови - 52 1,2.

Е - эластичность образовавшегося сгустка вычисляется по формуле:

Е венозной цельной крови - 108 0,13.

МА и Е - максимальные динамические, или тромбоцитарные, константы. Они зависят от числа и особенно качества тромбоцитов. Они прямо пропорциональны гемостатическим свойствам тромба. Увеличение МА - свидетельство гиперкоагуляции, а уменьшение - гипокоагуляции и, косвенно, повышения фибринолитической активности.

 


Дата добавления: 2018-10-26; просмотров: 1764; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!