Механизм получения скрытого изображения.
Микрокристаллы галоидного серебра обладают некоторыми дефектами в структуре ионной решетки (различные атомные и молекулярные нарушения). В процессе приготовления эмульсий эти дефекты стараются создать искусственно. Подобные нарушения в структуре кристаллов получили название центров чувствительности. Центры чувствительности способны захватить любой электрон, выбитый со своего постоянного места в кристаллической решетке и перемещающийся в зоне проводимости кристалла. При взаимодействии α- и β-частиц с микрокристаллами галоидного серебра, так же как и при любом физическом и химическом процессе, дающем достаточное количество энергии, происходит высвобождение электронов из кристаллической решетки в зону проводимости. Эти электроны собираются около центров чувствительности и образуют отрицательно заряженную электростатическую оболочку, в которой медленно перемещаются ионы серебра, превращающиеся, в конце концов, в атомы серебра. Таким образом создаются центры скрытого изображения.
Получение радиоавтографа.
Образовавшееся скрытое изображение может быть проявлено с помощью специальной процедуры – химического проявления, в результате которого активированные кристаллы галоидного серебра превращаются в зерна металлического серебра. Проявленное изображение следов радиоактивных распадов называют радиоавтографом или просто автографом.
|
|
|
В качестве проявителя может быть использован любой агент с достаточной восстанавливающей активностью. Обычно в качестве проявляющих агентов используют амидол, метол и гидрохинон. Отложение атомов серебра идет таким образом, что образуется рыхлый клубок, состоящий из тонких нитей и имеющий при небольшом увеличении в световом микроскопе вид отдельного черного зерна.
После проявления экспонированных микрокристаллов остальные микрокристаллы галоидного серебра и атомы брома удаляют из эмульсии в процессе фиксации; обычно для этой цели используют гипосульфит. В целях сохранения автографов зафиксированные эмульсии тщательно промывают для удаления гипосульфита и продуктов его взаимодействия с галоидным серебром.
Разрешающая способность метода.
Разрешающая способность – одна из существенных характеристик метода радиоавтографии. Как было уже описано выше, изображение на автографе создается за счет испускания β-частиц и состоит из зерен серебра, распределяющихся с разной плотностью вокруг источника излучения. Если длина пробега β-частиц не слишком велика, Как например, при использовании трития, то практически все наблюдаемые зерна серебра будут соответствовать трекам β-частиц. Треки β-частиц криволинейны. Поэтому на радиоавтографах наблюдаются не отдельные треки, а зерна серебра, расположенные вокруг изучаемого источника с разной плотностью.
|
|
|
Максимальная плотность зерен наблюдается непосредственно над источником излучения и постепенно уменьшается по мере удаления от него. В конце концов плотность зерен снижается до уровня фона, однако точно установить этот момент практически не возможно. Поэтому разрешение обычно определяется как расстояние, на котором плотность зерен серебра уменьшается в 2 раза по сравнению с максимальной плотностью зерен непосредственно над источником излучения. Соответственно, разрешающая способность тем выше, чем меньше указанное состояние.
На разрешающую способность влияют:
1) энергия испускаемых β-частиц (то есть природа изотопа);
2) расстояние между источником излучения и слоем эмульсии;
3) толщина источника излучения;
4) толщина эмульсионного слоя;
5) величина зерна фотоэмульсии;
6) время экспозиции препаратов с фотоэмульсией.
Метод электронно-микроскопической радиоавтографии.
Этот метод является модификацией метода радиоавтографии, направлен на получение максимального разрешения, которое бы позволило подвергнуть радиоавтографическому анализу структуры, наблюдаемые в электронном микроскопе. Если наивысшее разрешение светомикроскопической радиоавтографии при использовании трития составляет 1 мкм, то разрешение электронно-микроскопической может достигать 0,1-0,2 мкм. Второе преимущество этого метода – возможность получить радиоавтограф над срезом, представляющим более детальную картину клетки.
|
|
|
Методы радиоавтографии, применяемые в электронной микроскопии, более сложны и требуют значительно больше времени, чем методы радиоавтографии для световой микроскопии. Единственный изотопом, который широко используется в электронной микроскопии, служит тритий; в некоторый случаях используют изотоп серы. Ткань для метода электронно-микроскопической радиоавтографии также фиксируют в глутаральдегиде, формальдегиде или четырехокиси осмия. У каждого фиксатора есть свои недостатки. Четырехокись осмия может ускорить исчезновение скрытого изображения. Формальдегид и глутаральдегид могут снизить чувствительность фотоэмульсии.
Дата добавления: 2018-09-22; просмотров: 310; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!