Требования к продуцентам, используемым в биотехнологическом производстве
Требования к штаммам-продуцентам ферментов:
1) желательно образование внеклеточных ферментов, так как их легче выделить;
2) высокий выход фермента за короткое время;
3) очистка фермента от культуральной жидкости должна быть легкой;
4) штаммы не должны продуцировать антибиотики, токсичные вещества и не должны быть родственны штаммам, образующим токсины.
Критерии при выборе биотехнологического объекта:
1) Способен синтезировать целевой продукт.
2) Имеет высокую скорость роста;
3) Растет на доступных и недорогих питательных субстратах;
4) Устойчивость к заражению посторонней микрофлорой.
5) Непатогенный и не токсигенный для человека и животных, безопасный для окружающей среды.
Требования к продуцентам в биотехнологии
Штамм-продуцент должен характеризоваться следующими свойствами:
1) способностью расти в чистой культуре и генетической стабильностью;
2) отсутствием патогенности и токсичности;
3) высокой скоростью роста при промышленном культивировании и способностью синтезировать продукт в большом количестве и за короткий промежуток времени;
4) устойчивостью к контаминации (например, за счет изменения физико-химических условий среды, способности к росту при повышенных температурах или к синтезу антибиотиков);
5) способности расти на недорогих и доступных питательных средах
13. Выделение и селекция микроорганизмов – продуцентов биологически активных веществ..Селекция биотехнологических объектов.
|
|
|
Получ-е ген рекомбинантов; у м.о. они получ путем слияния протопластов ( разрушкл стенки, соед-е 2х кл путем электрослияния, образ 2 генома в 1кл); дост-во этого метода сост в возм-тисовмещ в 1м геноме различн мутаций из разных родит штаммов,не прибегая к дополнит мутаген обраб и поиску нужной мутации у исходного штамма. Прим-е горизонт переноса генетического материала (коньюгация); Генетич инжененрия – введ-е чужер гена д/производ-тим.о. и оптимизации экспрессии гена (исп-е гормонов и Б-иммуномодуляторов)
А) Ген рекомбинация перераспред гены/их части и позвобъед в одном геноме признаки 2х организмов и более. В рез-те образ гибридн/рекомбикл, сочетающие св-ва родит форм. В опыты по гибридизации берут генетически маркированные штаммы м.о. - чаще всего ауксотрофн мутанты и мутанты, уст к ингибиторам роста. Это позв выявлять колонии, совмещ признаки 2х родителей. Гибрид-я промышл штаммов дрожжей осложняется тем, что они часто полиплоидны:соднеск наборов хр-м, и у них редко набл слияние кл. Б) Важным комп-том бактерклявлкольц мол ДНК – плазмида,кот м находиться в автономном и в интегрированном сост по отн к хр-ме клетки- хозяина. Конъюгативнплазмидыспос к мобилизации хромосомных генов, что я исп д/получгенетичрекомбичантов у бактВпервыеконъюг перенос хромосомных генов был обнаружен у Е. соli.Для конъюгационногоскрещ-я культуры донора и реципиента смеш и инкубируют совместно в пит бульоне/ на пов-титвагаризованных сред. В этих услклсоед м-ду собой при помконъюгац мостика, ч/з кот в рецип клетку начиная с сайта ori Т плазмиды поступает хромосома донора. Почти кажд вид бактявл хозяином 1/ несквирулент/уме фагов, кот явлважн инструментом ген анализа и конструир-я штаммов бактерий с пом трансдукции и методов генетической инженерии. Трансдукция— перенос ген инф от клетки донора к клетке-реципиенту, кот осущ фагом. Оно основано на том, что в процразмн-я фагов в бакт иногда обр-ся частицы, кот наряду с фаговой ДНК или вместо нее сод фрагменты бактер ДНК. Такие ч-цыназтрансдуцирующими. Отбор рекомбинантов, кот назтрансдуктантами, проводят на селективных средах, где не могут расти исходные реципиентныеклетки.Гл этапом обр-я трансдуиирующих ч-ц явлпроцупак ДНК.У разн фагов специф-тьупакки меняется в широких пределах по виду пакуемой ДНК (фаговая/бактер) и по степени взаимод-я с различн участками на бактерДНК.Приобрспецифичтрансдуиирующих фагов в головку упак только фаговая ДНК и только с опредучастка.Если к ней присоед отрезок бактерДНК, прилеж к профагу, то они м быть упакованы вместе. При неспецифичтрансдукции фаговые оболочки могут начать упаковываться не только с фаговой, но и с бактерДНК в различных участках, специфичность кот м быть неодинак. Если упаковка началась с бактериальной ДНК, то головка фага полностью заполняется только ею, а избыток ДНК удаляется.
|
|
|
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 2993; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!