Определение резус-фактора крови экспресс-методом
Резус-агглютиноген (Rh-фактор) крови не имеет в плазме врожденных агглютининов, однако может являться причиной несовместимости крови при повторном ее переливании.
Для работы необходимо: то же, что и для предыдущей работы и стандартная антирезус сыворотка и контрольная сыворотка (не содержащая антирезус антител).
Ход работы:На тарелку наносят по одной капле контрольной сыворотки (справа –К) и стандартной антирезус сыворотки (слева – Rh). Рядом с каждой сывороткой помещают по одной капле исследуемой крови.
Последующие манипуляции должны начинаться с контрольной сыворотки, но не наоборот (в противном случае пользоваться одним концом палочки нельзя). Стеклянной палочкой перемешивают каплю крови с каплей сыворотки (контрольной), образуя общую каплю диаметром около 1-1,5 см. Затем таким же образом перемешивают кровь с антирезус сывороткой. Покачивая тарелку, наблюдают за реакцией. Для лучшего выявления наличия или отсутствия агглютинации можно добавить в обе пробы по капле физиологического раствора.
Если исследуемая кровь резус-положительная, то в пробе со стандартной антирезус сывороткой будет агглютинация эритроцитов (в контроле ее быть не должно). Если кровь резус-отрицательная, агглютинация отсутствует в обеих пробах.
При возникновении агглютинации в пробе с контрольной сывороткой определение следует повторить, либо проводить другими методами.
|
|
|
Рекомендации к оформлению работы:Определить и записать резус принадлежность испытуемой крови. Объяснить значение резус-фактора при переливании крови.
РАБОТА 7. Наблюдение гемолиза эритроцитов. Осмотическая резистентность эритроцитов.
Гемолизом называется выход гемоглобина в раствор, обусловленный повреждением оболочек эритроцитов. При этом кровь становится прозрачной, «лаковой». Различают несколько видов гемолиза: осмотический, механический, химический, термический, биологический.
Осмотический гемолиз, происходящий в гипотоническом растворе, объясняется тем, что вода, проникая в эритроциты, в конечном итоге приводит к разрыву их оболочек. Механический гемолиз наблюдается при длительных механических воздействиях на кровь (встряхивание, сдавливание). Химический гемолиз наступает в результате растворения белковой или липоидной части оболочки эритроцитов щелочами, спиртом, бензином, эфиром и т. д. Термический гемолиз, наступающий при промораживании крови, в сущности сводится к механическому повреждению эритроцитов образующимися в них кристалликами льда. Биологический гемолиз наступает под влиянием специфических гемолизинов растительного (сапонины) или животного происхождения (яды пчел, змей, бактерийные токсины, а также гемолизины крови, вызывающие гемолиз при переливании несовместимой по групповой принадлежности крови и др.).
|
|
|
Цель:наблюдение осмотического, химического гемолиза эритроцитов. Определение осмотической резистентности (стойкости) эритроцитов.
Воспроизведение гемолиза
Для работы необходимо: пробирки, пипетки вместимостью 1 мл, раствор хлорида натрия, капиллярная пипетка от гемометра, дефибринированная кровь, дистиллированная вода, нашатырный спирт, 2 % раствор сапонина.
Ход работы: Четыре пробирки ставят в штатив и в первую наливают 2 мл физиологического раствора, во вторую – 2 мл физиологического раствора и 5 капель нашатырного спирта, в третью – 2 мл дистиллированной воды, в четвертую – 2 мл 2 % раствора сапонина. Затем в каждую пробирку добавляют по 2 капли крови и встряхивают пробирки, перемешивая содержимое. Через 30 минут наблюдают результаты. При наличии гемолиза раствор в пробирке становится прозрачным.
Рекомендации к оформлению работы: Сделать вывод, дав оценку полученным результатам. В каких пробирках произошел гемолиз, каков механизм?
|
|
|
Определение осмотической резистентности эритроцитов
Для работы необходимо: пробирки, пипетки вместимостью 1 мл, 1 % раствор хлорида натрия, капиллярная пипетка от гемометра, дефибринированная кровь, дистиллированная вода.
Ход работы:Разлить в 10 пробирок, помещенных в штатив. Раствор хлорида натрия в постепенно убывающем количестве – с 0,6 до 0,15 мл. Затем в каждую из пробирок добавить до 1 мл дистиллированной воды и таким образом получить растворы хлорида натрия в убывающей концентрации, начиная с 0,6 % до 0,15 %. Затем в каждую пробирку добавить по капле крови (кровь выпускать на стенку пробирки). Пробирки встряхнуть и оставить стоять при комнатной температуре. Через 1 час обнаруживают, что в ряде пробирок эритроциты постепенно осели, а над ними – обесцвеченный слой жидкости. Отметить концентрацию хлорида натрия в той пробирке, в которой хотя и есть осадок эритроцитов, но слой жидкости над ними чуть-чуть окрашен, что указывает на частичный гемолиз. Эта концентрация хлорида натрия и будет границей минимальной резистентности эритроцитов. Границу максимальной резистентности определяют по концентрации раствора хлорида натрия в той пробирке, в которой уже нет осадка, и жидкость интенсивно окрашена. Через некоторое время в пробирках с гемолизированной кровью может образоваться небольшой неокрашенный осадок, состоящий из стромы эритроцитов, не содержащих Hb.
|
|
|
Примечание: У здорового человека максимальная резистентность эритроцитов колеблется в пределах от 0,28 до 0,32, а минимальная – от 0,52 до 0,48 (числа обозначают процент содержания хлорида натрия в растворе).
Рекомендации к оформлению работы:Результаты опыта запишите в тетрадь. Каково клиническое значение ОРЭ.
Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 697; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!