Периодическое культивирование



Понятие о микроорг-х. Осн. напр. совр. микроб-и… Наука, изучающая морфол., цитол., физиол., биохимию, генетику и экологию м/о. Объект исслед.– м/о (микробы), т. е. мельчайшие орг., различимые только под микроскопом + Н/Ц Доядерные - Ц Дробянки П/Ц Цианоб/к П/Ц Настоящие водоросли П/Ц Археб/к + Н/Ц Ядерные - Ц Грибы: микро-скоп. грибы (дрожжи, плесневые грибы) -Ц Растения: микроск. водоросли (диатомовые, коньюгаты, улотриксовые, желтые) -Ц Животные: простейшие (жгутиконосцы, инфузории, саркодовые, споровики). Современная микроб-я: общая микроб.; медицинская фармакологич. м.; ветеринар. м.; с/х м.; промышл. м. (разраб. методов получения пищ. белка из непищ. сырья, разраб. вакцин, получ. газообр. биол. топлива, способов разлож. полиэтилен. пленок);пищевая; водная (исследование м/о водоемов, очистка вод); геологич.; генетич.; космич.;военная. Выдел. 3 периода в ист.: 1) морфологич. (накопл. знаний). Левенгук изобр. Микроскоп. 2) физиологич. Становление М. как науки. Л. Пастер1857 установил бакт. брожение, в 1860 доказал невозможность самопроизв. зарождения жизни в наст. вр., 1865 вывел бакт. причину порчи пива и вина, предложил пастеризацию, 1881 основопол-к вакцинации и иммунологии. Р.Кох:1872 начал изуч. заразн. болезни,1876-обнаруж.возбудит. сибир. язвы и доказал его патогенность,1882 - устоновил воз-ля туберку-лёза, и выявил туберкулин. Пастер и Кох разраб методы для лаб. М: стерильные мет. культивирования, мет. чистых куль-тур, использов. чашек Петри, иглы для посевов, плотные пит. среды, окраска по Грамму, иммерсионное микроскопи-рование, микрофотографир-ие. 3) период: сер.20 в., откр. в биохимии и генетике м.о. В1953 Д Уорсон и Ф Крипт расшифр. структурные мол-лы ДНК, механизм репликации.   2.Чистые и накопительные культуры микроорг-в. Рост… Культура микроорганизмов - популяция м-ов на питательной среде, нах-ся в состоянии размножения или закончившая его. Для исследований м-ов конкретного вида необходимо из смешанной популяции м-ов, полученной в природе, выделить м-мы одного вида в чистую культуру. Выделение чистой культуры включает 3 этапа:  1.Получение накопительной культуры (элективной) – культура, в к-рой преобладают представители одной физиологической группы или одного вида м-ов. Элективность условий создаётся путём подбора соответствующих питательных сред, поскольку различные м-мы предъявляют неодинаковые требования к различным средам.  2.Выделение чистой культуры – масса клеток, состоящая из м-ов одного вида, полученных как потомство одной клетки. Чистую культуру получают из отд-ой колонии или клетки при многократном пересеве на плотную питательную среду.  3.Определение чистоты выделенной культуры. Способы: •Визуально; •Микроскопический контроль (фиксированный окрашенный препарат); •Высев на питательные среды;  Условия для роста м-ов при составлении питательных сред: 1)Питательная среда должна содержать все необходимые компоненты. 2)Учитывать отношение м-ов к ph среде (6.9-7). 3)Учитывать отношение к t. 4)Обеспечить достаточную влажность (20%). 5)Учитывать отношение к кислороду. 6)Обеспечить доступ света. 7)Питательная среда д.б. стерильной.  

Типы пит. сред и усл. роста микроорг-в.

Питательные среды предназначены для накопления, изучения, сохранения , выделения м/о. выделяют несколько принципов классификации питательных сред:

1. по происхождению:

- натуральные, природные среды неопределенного состава, полученные из продуктов животного и растительного происхождения.

- искусственные, синтетические (в состав входят элементы определенного химического состава);

- полусинтетические (содержат компонент известного химического состава и вещества неопределенного состава).

2. по консистенции:

- жидкие (экстракты, отвары);

- плотные (при их приготовлении используют агар (полисахарид) или желатин);

- сыпучие (используются в промышленной микробиологии): отруби, кварцевый песок, разваренное пшено, пропитанное питательной средой.

3. по количеству компонентов:

- малокомпонентные (4 - 5);

- многокомпонентные (до 40).

При составлении питательных сред необходимы определенные условия:

- наличие всех необходимых питательных компонентов и факторов роста;

- необходимо учитывать отношение м/о к рН;

- отношение к t;

- обеспечить достаточную влажность (чаще всего это 20%);

- отношение к кислороду;

- обеспечить доступ света;

- питательная среда должна быть стерильной.

Периодическое культивирование

Периодическим называют культивирование, которое осуществляется в статической культуре, т.е. в условиях среды, к которой не добавляют питательные вещества и из которой не выводят продукты обмена. Рост популяции м/о в статической культуре описывается S-образной кривой роста, которая помогает различать несколько фаз роста.

I фаза – начальная фаза роста: период от посева б/к на свежую питательную среду до достижения ими максимальной скорости роста. М/о приспосабливаются к новым условиям. В клетке идет синтез компонентов, клетки увеличиваются в размерах, но не делятся.

II фаза – фаза логарифмического роста: характеризуется активным делением клеток, их число возрастает в геометрической прогрессии, клетки примерно одинаковых размеров, но меньше, чем в I фазе.

III фаза – стационарная фаза: период, когда число жизнеспособных клеток достигает максимума. Скорость деления равна скорости отмирания. Условия роста популяции ухудшаются.

IV фаза – фаза отмирания: массовая гибель клеток, в сложившихся неблагоприятных условиях выживают лишь единичные особи. Переход в состояние покоя.

 


Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 112;