Проектирование биотехнологического производства. Стадия приготовления посевного материала клеток.

Используют исходную культуру, которую хранят и поддерживают в активном состоянии на производстве. Консервация культуры осущ-ся следующими способами: 1) хранение под слоем масла 2) в различных субстратах при пониженных температурах – криоконсервирование при t º от -165 до – 196. 3) высушивание, в том числе и лиофильная сушка, при этом МО для их сохранности и жизнедеятельности пересевают на свежие пит среды. Индекс роста (отношение конечной концентрации к начальной) для большинства культур невелик, поэтому для загрузки производственного биореактора требуется значительное кол-во посевного матер-ла: 15-20 % от объема для бактерий и грибов, до 30% для клеток и растений. Из-за этого получать требуемое кол-во инокулята из небольшого объема исх. материала приходится в несколько последовательных этапа. ЗОЛОТОЕ ПРАВИЛО: надежность обеспечения асептических условий дожна быть тем выше, чем более данная стадия удалена от культивирования.

Типичными этапами является 1) культивирования на плотной агаризованной среде 2) на жидкой среде в шейкерных колбах 3) в одном или нескольких биореакторов увеличенного масштаба. Первые по ходу проц. наработки материала биореактора наз-ся инокуляторами, последующие – посевные ферментеры.Процесс выращивания инокулята осущ-ся периодическим способом в его ступенчатом варианте. Посевной материал должен быть требуемой концентрации без посторонней микрофлоры. Работа с посевным материалом должна проводится в чистых ЧП, оборудованные ламинарными шкафами для защиты продукта от ОС. Посевные биореакторы должны быть защищены от контаминации посторонней микрофлоры, так же как и производственные, т.е данные биореакторы должны предусматривать стерелизацию на месте SIP, а не в автоклавах. В целях обеспечения отсутствия контаминации посевного материала стремятся использовать более простые конструкции и схемы обвязки посевных ферментеров по сравнению с производством. перемешивание осуществляется аэрирующем воздухом, ап-т должен иметь минимум штуцеров, из обвязки исключаются мерники и пеногасители и некоторые датчики.

Мы поможем в написании ваших работ!