Лабораторная работа
1. Определение общих липидов в сыворотке крови
| Оборудование: | 1. | Штатив с пробирками. |
| 2. | Пипетки на 2 мл и 0,1 мл. | |
| 3. | КФК. | |
| 4. | Кюветы на 0,3 см. | |
| 5. | Водяная баня. |
| Реактивы: | 1. | Серная кислота. |
| 2. | Стандартный раствор (8 г/л). | |
| 3. | Фосфованилиновый реактив. | |
| 4. | Сыворотка крови. |
Принцип метода. Продукты гидролиза ненасыщенных липидов образуют с фосфованилиновым реактивом соединение красного цвета: интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию общих липидов.
Ход работы. Проводят гидролиз липидов. Для этого в 3 сухие пробирки приливают реактивы по схеме:
| Реактивы (мл) | Опытная проба | Стандартная проба | Контроль |
| Сыворотка | 0,02 | ---- | ---- |
| Стандартный раствор (8г/л) | ---- | 0,02 | ---- |
| Серная кислота | 1,5 | 1,5 | 1,5 |
Содержимое пробирок перемешать и нагревать 15 мин в кипящей водяной бане.
Затем охладить их в струе холодной воды и отмерить в другие сухие пробирки:
| Гидролизат | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Фосфованилиновый реактив | 1,5 | 1,5 | 1,5 |
Содержимое пробирок перемешать и оставить на 40 мин. Затем колориметрируют опытную и стандартную пробы против контроля при зеленом светофильтре в кювете толщиной 0,3 см. Расчет содержания общих липидов в сыворотке проводят по обычной формуле: (Еоп/Ест) х 8 г/л, где 8 г/л – концентрация стандартного раствора липидов.
Нормальное содержание липидов – 4-8 г/л
Дата добавления: 2015-12-17; просмотров: 14; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!