Определение групп крови по системе АВО



1. Определение групп крови перекрестным способом – выявление в сыворотке изогемагглютининов α и β стандартными эритроцитами. Основа исследования — взаимодействие естественных агглютининов сыворотки α и β и соответствующих антигенов стандартных эритроцитов AB0.

Стандартные эритроциты являются 5 – 10 % взвесью свежих эритроцитов. Условия хранения – в изотоническом солевом растворе консерванта при + 4 °C. Допускается использование смеси эритроцитов от 2 – 3 лиц одной группы. При использовании перекрестного метода определения группы крови требуется хорошее освещение и температура воздуха в помещении 15 – 25 °C.

Порядок действий:

1.Отобрать 3 – 5 мл исследуемой крови в пробирку без стабилизатора.

2.Отстоять сыворотку 1,5 – 2 часа.

3.Однократно отмыть стандартные эритроциты в 0,9 % растворе NaCl.

4.Промаркировать лунки планшета: 0(I), A(II), B(III).

5.Разместить по две капли (приблизительно 0,1 мл) сыворотки в лунки.

6.Добавить в лунки по 0,03 мл стандартных эритроцитов групп 0, A, B.

7.Чистыми палочками перемешать сыворотку и эритроциты.

8.Покачивать планшет на протяжении 5 минут.

9.Проверить наличие агглютинации в каждой лунке.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами:

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

2. Как определить группу крови, используя цоликлоны?

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти- D по системе AB 0 и системе Резус:

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора:

цоликлоны– цоликлон анти-А; цоликлон анти-В; цоликлон анти-D;

раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови:

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови:

-если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);

-если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);

-если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);

-если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти- D :

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

-если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)

-если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует .

3. В каких случаях происходит агглютинация эритроцитов?

Агглютинация эритроцитов = склеивание эритроцитов. Важно знать о ней при переливании крови. Склеивание эритроцитов может привести к летальному исходу человека (реципиента), которому переливают кровь, так как в результате склеивание эритроцитов образуется тромб, который мешает току крови.

На мембране эритроцитов есть белки А и Б-агглютиногены. Если речь идет о переливании, нужно вспомнить еще два белка.

Находятся они не в эритроцитах, а в плазме крови (жидкость, в которой плавают эритроциты). В эритроцитах были белки А и В, а в плазме – α (альфа) и β (бета) белки- агглютинины. Склеивание эритроцитов реципиента происходит, если донорская кровь содержит агглютиногены, соответствующие агглютининам реципиента. Чтобы агглютинация не произошла, держим в голове только одно правило: А не должно встречаться с α, а В держится подальше от β, потому что эритроциты А склеиваются белком α, и эритроциты Б склеиваются с белком β.

4. К какому классу иммуноглобулинов относятся агглютинины в системе АВО?

Агглютинин — антитело, которое вызывает реакцию агглютинации клеток крови, бактерий и ряда других антигенных частиц. Агглютинины находятся в плазме крови. Наличие их в крови определяет групповую принадлежность, так, наличие α-агглютинина свойственно 0 (I) и B (III) крови, β-агглютинин присутствует в 0 (I) и A (II).
Агглютинины имеют белковую структуру, агглютинируют корпускулярные антигены, а также принадлежат к иммуноглобулинам. Основные агглютинины, определяющие групповую принадлежность крови: α- и β-гемагглютинины — это иммуноглобулины IgM, реже IgG. Их реакция с агглютиногенами как иммунный ответ протекает по принципу «антиген-антитело».

5. Назовите группу крови по системе АВО в примере.

1. 1 группа

2. 4 группа

3. 4 группа

4. 3 группа

Билет 6.


Дата добавления: 2022-01-22; просмотров: 12; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!