Дополнительный материал к занятию
Среда для контроля стерильности (СКС). Рост многих анаэробных микроорганизмов возможен только на средах с низким окислительно-восстановительным потенциалом. Поэтому в среды добавляют восстановители, например, тиогликолевую кислоту или её натриевую соль, цистеин, аскорбиновую кислоту. Функции восстановителей выполняют и другие компоненты среды: глюкоза, пептон. СКС содержит питательный бульон, витаминный препарат ЭКД, NaCl, Na2CO3, глюкозу, тиогликолят натрия, цистеин, агар (0,75%). Среду разливают в пробирки по 6-7 мл.
Определение показателя стабильности основных биологических свойств микроорганизмов
Показатель стабильности основных биологических свойств микроорганизмов - отношение числа атипичных по морфологии, биохимическим, серологическим, фаголизабельным и другим свойствам колоний к общему числу колоний на чашках (%). Определение этого показателя проводят на чашках, где выросло не менее 25 и не более 150 колоний. Изучают свойства культур, выращенных на питательных средах, по культурально-морфологическим, биохимическим, серологическим, фаголизабельным и другим признакам.
Определение показателей чувствительности среды и скорости роста микроорганизмов
Чувствительность среды - максимальное разведение культуры, обеспечивающее визуально обнаруживаемый рост <*> колоний искомого штамма в течение определенного времени и температуры на всех засеянных чашках (пробирках) с питательной средой.
|
|
|
В случае отсутствия визуально обнаруживаемого роста (для подтверждения его наличия) в жидких средах обогащения после соответствующей инкубации посевов, из каждой пробирки производят высев на чашки с питательным агаром, разделенным на 4 - 8 секторов, на каждый из которых засевают по одной петле культуры из каждой пробирки со средой.
Скорость роста (ч) определяют по минимальному времени инкубации посевов, за которое при соответствующем разведении обеспечивается отчетливый (не менее 100 жизнеспособных клеток) видимый невооруженным глазом рост культуры (помутнение, наличие пленки, осадка, роста по уклону и др.) во всех засеянных пробирках с жидкими (полужидкими) питательными средами или формирование типичных, легко дифференцируемых колоний на чашках (пробирках) с плотной средой.
Определение дифференцирующих свойств среды
Дифференцирующие свойства среды – выраженность отличительных признаков патогенных микроорганизмов от непатогенных видов и естественных ассоциантов (по структурным особенностям колоний, их окраске, изменению цвета и другим признакам).
Дифференцирующие свойства сред для выделения микроорганизмов определяют по следующим тестам:
|
|
|
а) выраженность дифференцирующего признака - структура колоний, цвет колоний, изменение цвета среды под колониями, ореол вокруг них, диаметр последнего, появление диффузного изменения цвета среды;
б) четкость дифференциации колоний группы патогенных микроорганизмов от непатогенных, входящих в тот же систематический таксон, и от естественных ассоциантов при посеве смесей.
Определение ингибирующих свойств среды
Ингибирующие свойства среды - степень подавляющего воздействия на рост и (или) проявление типичных свойств сопутствующей микрофлоры.
Показатель ингибирующих свойств выражают как:
- минимальное разведение культуры, при посеве из которого полностью отсутствует рост и (или) проявление типичных свойств посторонней микрофлоры на испытуемой среде при его наличии на среде выращивания (ингибирующие свойства);
- величину отношения среднего числа сформировавшихся колоний тест-штамма на "неингибиторной" среде (среда выращивания) к среднему числу колоний на испытуемой "ингибиторной" среде (показатель ингибиции) с учетом разведения.
Ингибирующее действие жидких (полужидких) селективных (элективных) питательных сред определяют, используя монокультуры и смеси. Оценку действия таких сред проводят в сравнении с "нулевым" посевом, т.е. посевом из контролируемой среды без соответствующей инкубации на среду выращивания.
|
|
|
Показатель ингибиции для жидких (полужидких) селективных сред выражают отношением среднего числа колоний, образовавшихся на плотной среде при "нулевом посеве", к среднему числу колоний на той же среде после инкубирования посевного материала в жидкой (полужидкой) питательной среде.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 103; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!