ПЕРЕЧЕНЬ КАТЕГОРИЙ БОЛЬНЫХ, ПОДЛЕЖАЩИХ ОБСЛЕДОВАНИЮ
НА НАЛИЧИЕ АНТИТЕЛ К ВИЧ ПО КЛИНИЧЕСКИМ ПОКАЗАНИЯМ
1. Лица, у которых отмечается:
- лихорадка более 1 месяца;
- увеличение лимфатических узлов 2-х и более групп продолжительностью 1 месяц и более;
- диарея, которая продолжается более 1 месяца;
- немотивированная потеря массы тела 10% и более;
- повторные пневмонии (2 случая и больше) в течение последних 12 месяцев;
- рецидивирующие или затяжные гнойно-бактериальные, паразитарные заболевания, сепсис;
- ворсистая лейкоплакия языка;
- рецидивирующая пиодермия.
2. Лица с подозрением или подтвержденным диагнозом:
- бактериальные инфекции у детей младше 13 лет, множественные и рецидивирующие;
- кандидоза пищевода, трахеи, бронхов или легких, цервикального инвазивного рака;
- диссеминированного или внелегочного кокцидиомикоза;
- криптококкоза внелегочного;
- криптоспоридиоза с диареей в течение 1 мес и более;
- цитомегаловирусные поражения других органов, кроме печени, селезенки, лимфатических узлов у больных старше 1 месяца;
- цитомегаловирусного ретинита с потерей зрения;
- герпетической инфекции, вызывающей многоочаговые язвы, которые не излечиваются на протяжении 1 месяца, или бронхит, пневмонию, эзофагит;
- гистоплазмоз диссеминированный или внелегочный;
|
|
|
- изоспороз с диареей свыше 1 месяца;
- инфекции, вызванной micobacteria tuberculosis распространенный или внелегочной;
- туберкулеза легочного у взрослых или подростков старше 13 лет;
- туберкулеза внелегочного;
- другого заболевания, вызванного микобактериями, кроме micobacteria tuberculosis диссеминированного или внелегочного;
- пневмонии, вызванной пневмоцистами;
- прогрессирующей многофокусной лейкоэнцефалопатией;
- сальмонеллезной (кроме Salmonella typhy) септицемией, рецидивирующей;
- токсоплазмоза мозга у детей старше 1 месяца;
- ВИЧ-энцефалопатии (ВИЧ-деменции, СПИД-деменции, подострого энцефалита, вызванного ВИЧ);
- саркома Капоши;
- лимфоидной интерстициальной пневмонии у детей младше 13 лет;
- лимфомы Беркита;
- иммунобластной лимфомы;
- первичной лимфомі мозга;
- синдром истощения, обусловленный ифекцией ВИЧ;
- гепатит "В", носительство HBsAg;
- инфекционного мононуклеоза;
- рецидивирующий опоясывающий лишай у лиц старше 60 лет;
- болезни, передающиеся половым путем.
Л а б о р а т о р н а я д и а г н о с т и к а:
|
|
|
В связи с исключительно высокой медико-социальной значимостью ВИЧ-инфекции особое значение приобретает своевременная и точная лабораторная диагностика этого заболевания, особенно на ранних стадиях инфицирования, при отсутствии или минимальном проявлении клинических признаков заражения. В общем перечне лабораторных исследований, обеспечивающих идентификацию ВИЧ-инфекции (определение циркулирующих в крови антител, антигенов и иммунных комплексов; культивирование вируса, выявление его геномного материала и ферментов; оценка функций клеточного звена иммунной системы и др.), основная роль принадлежит, несомненно, методам серологической диагностики, направленным на определение антител, а также антигенов возбудителя в крови и других биологических жидкостях организма. Особенно велико значение серодиагностики для лабораторного практического звена службы по профилактике и борьбе со СПИДом в связи с чем выделение вируса и идентификация его геномного и (или) ферментного материала требует особых условий, которыми располагают лишь немногие централизованные лаборатории при НИИ.
Материалы для исследования:
Серодиагностика подавляющего большинства вирусных инфекций осуществляется, как известно, посредством регистрации нарастания титра антител к возбудителю в крови, респираторных секретах и других биологических жидкостях, собранных в начале и в конце заболевания.
|
|
|
Отличительной особенностью как скрининговых, так и верификационных серологических исследований при ВИЧ-инфекции является индикация антител в единичной пробе, в основном крови или плазмы, с формированием ответа по принципу "да-нет". Это связано с продолжительностью инфекционного процесса, исчисляемой годами, с невозможностью, как правило, определить его начало и с особенностями формирования иммунного ответа на стадиях заболевания.
Хотя традиционным материалом для определения ВИЧ-антител и антигенов продолжают оставаться сыворотка и(или) плазма крови, спектр биологических материалов для таких исследований в настоящее время значительно расширился. В число биологических материалов для определения ВИЧ-антител и антигенов входят следующие материалы:
Сыворотка (плазма) крови. При необходимости массового скрининга образцов крови рекомендуется тестировать сывороточные смеси (пулы), составленные с таким расчетом, чтобы конечное разведение каждого образца не превышало 1:100. При получении положительного результата повторно исследуют каждую сыворотку положительной смеси. Способ не ведет к потере чувствительности как в ИФА, так и в Иммуноблотте, снижая трудозатраты и стоимость первичного обследования на 60-80%. Для сбора образцов крови пригодны ватные тампоны, сохраняемые при -20°С. Антитела в элюатах из тампонов обнаруживают после 4 месяца их хранения.
|
|
|
Актуальную проблему представляет обследование образцов трупной крови с целью посмертной диагностики ВИЧ-инфекции, подтверждения прижизненного диагноза, скрининга доноров трупной роговицы, решения ряда спорных эпидемиологических и юридических вопросов.
Приобретает широкое распространение метод сбора капиллярной крови из пальцев на диски из специальной фильтровальной бумаги с последующим их высушиванием - метод "сухой капли". Упакованные герметично в полиэтиленовые пакеты с влагопоглотителем, такие образцы могут храниться более 6 месяцев при комнатной температуре и подлежат транспортировке на дальние расстояния в обычных условиях. Ig G в сухой капле стабильны. В дальнейшем растворяются растворами и исследуются в ИФА. В сухой капле возможен поиск не только антител но и антигенов ВИЧ. Следовательно метод пригоден для ранней диагностики ВИЧ-инфекции и слежения за течением заболевания.
Слюна. Поиск антигенов к ВИЧ в слюне с помощью ИФА и ряда агглютинационных тестов оправдан как альтернатива исследованию крови в условиях отсутствия оборудования и квалифицированного персонала. Антитела слюны синтезируются локально и принадлежат к Ig A. У серопозитивных лиц антитела ко всем структурным белкам ВИЧ обнаружены с помощью Иммуноблота в слюне из ротовой полости, однако концентрация а/т достаточной была не высока.
Слезная жидкость. Может служить материалом для ИФА и Иммуноблота. Ig А-антитела слез продуцируются местно, их концентрация увеличивается по мере прогрессирования заболевания. Определение антител в слезах позволяет отличить развивающуюся ВИЧ-инфекцию от пассивной серопозитивности у детей.
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ.
Процесс формирования антител (гуморальный иммунный ответ) у ВИЧ-инфицированных лиц тесно связан с основными стадиями развития заболевания, к которым относятся: первичное инфицирование, латентный период, персистентная генерализорванная лимфаденопатия (ПГЛ), СПИД-ассоцииированный комплекс и собсвенно СПИД. На каждом этапе развития ВИЧ-инфекции, характеризующимся определенными иммунопатологическими особенностями, серодиагностика должна рассматриваться как часть комплексной оценки состояния пациента, включающей, помимо клинического обследования, ряд лабораторных тестов. Составной частью
последних является определение в крови и других биологических жидкостях ВИЧ-антител и антигенов. Наиболее распространенным способом первичной серодиагностики ВИЧ-инфекции являются определение суммарных антител с помощью скринингоавые пробы отборочных тестов - ИФА и агглютинационных реакций. На втором (арбитражном) этапе используют более сложные современные тесты (Иммуноблот (ИБ), РИП), которые позволяют не только подтвердить, (или отклонить) первоначальное заключение, но и сделать это на уровне определения антител к индивидуальным белкам вируса.
Иммуно-ферментный анализ.
ИФА - является основным и наиболее широко применяемым методом определения антител к ВИЧ. В ИФА последовательно взаимодействует иммуносорбент, исследуемая сыворотка, конъюгат и хромоген. Инкубация каждого компонента с предыдущим завершается промывкой планшета для удаления несвязавшихся остатков очередного реагента. Итогом реакции является окрашивание содержимого лунок (обычно желто-оранжевое), интенсивность которого регистрируют на спектрофотометре с вертикальным прохождением луча по показателям оптической плотности. Особенностью применения ИФА в серодиагностике ВИЧ-инфекции являются частые ложноположительные результаты (ЛПР). Именно поэтому результат в ИФА не является основанием для заключения о ВИЧ-серопозитивности пациента. Причины ЛПР многобразны. Наиболее простые технические причины заключаются в нарушении правил постановки ИФА, а именно в несоблюдении режима промывочных процедур, фотозасвечивании при инкубации на свету после внесения хромогена. В этих случаях увеличивается интенсивность окрашивания жидкости в лунках. ЛПР могут провоцироваться после повторного замораживания и оттаивания, а также после прогревания. Однако в основе большей части ЛПР лежат процессы специфического взаимодействия белковых компонентов испытываемой сыворотки, не относящихся к ВИЧ-антителам, и антигена-иммуносорбента. Можно выделить следующие основные причины причины ЛПР при ВИЧ-инфекции:
- недостаточная очистка иммуносорбента от балластных белков;
- спонтанное связывание антител сыворотки с пластиком, если его участки, не занятые иммуносорбентом, недостаточно блокированы или не блокированы совсем специальным нейтральным белком, например бычьим сывороточным альбумином;
- перекрестное взаимодействие с ВИЧ-белками иммуносорбента различных протеинов, присутствующих в крови лиц с определенными, чаще аутоиммунными патологическими процессами (рассеянный склероз, СКВ, лепра, туберкулез). К этой категории можно отнести ЛПР, связанные с частым донорством, инфекционны ми и онкозаболеваниями, ожогами, беременностью, повторными гемотрансфузиямия, пересадкой органов, тканей, а также лиц, находящихся на гемодиализе (6-8%);
- "эндемическое" происхождение ЛПР - образцы из регионов с определенной краевой патологией (малярия, висцеральный лейшманиоз), ведущей к структурной модификации сывороточных иммуноглобулинов, после которой они начинают взаимодействовать с белками ВИЧ;
- присутствие в крови ревматоидного фактора, часто провоцирующего ВИЧ-ЛПР. Ревматоидный фактор является мощным индуктором аутоиммунных процессов, сопровождающихся формированием антител с высокой степени гомологии к антигенным детерминантам некоторых белков ВИЧ, например gp 41. Кроме того, сам ВИЧ индуцирует аутоиммунные процессы. Из этого следует, что сыворотки ВИЧ-инфицированных больных и особенно больных СПИДом пациентов, положительные в ИФА, содержат, как правило, определенную долю ложноположительной активности, связанной с ВИЧ опосредованно;
- наличие в крови обследуемых людей антител к gag-белкам ВИЧ и прежде всего к белку P24. Это - одна из основных и наиболее значимых причин ЛПР в ИФА. Сыворотки, имеющие в ИБ антитела только к P24 (реже в сочетании с антителами к P17 и/или к P55) и не имеющие антител к основным диагностическим (поверхностным) белкам ВИЧ, составляют весьма часто встречающуюся и сложную для оценки категорию ЛПР-образцов. Существует ряд гипотез об их происхождении, в частности с наличием антител к экзо- или эндо- генным не идентифицированными еще ретровирусами. Вместе с тем анти-P24 синтезируются в обязательном порядке на ранних стадиях ВИЧ-сероконвенрсии. Поэтому практически обоснованным является иммунологическое наблюдение за лицами с антителами к gag-белкам ВИЧ, а также отстранение их от донорства.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 109; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!