Учесть и зарисовать демонстрацию опыта определения фаголизабельности методом стекающей капли (метод Отто) - качественный метод определения фагочувствительности бактерий.

⇐ ПредыдущаяСтр 97 из 97

Постановка. Готовят 2 миллиардную взвесь из исследуемой и заведомо фагочувствительной культуры бактерий и наливают по 1 мл в чашки с хорошо подсушенным мясо-пептонным агаром. Осторожно покачиванием чашек взвесь равномерно распределяют по поверхности агара, избыток отсасывают пастеровской пипеткой, посевы подсушивают в термостате и фаг наносят пастеровской пипеткой в виде стекающих капель, затем чашки со слегка приоткрытыми крышками снова помещают в термостат для подсушивания, после чего поворачивают их вверх дном. Инкубация при температуре 37ºC в течение 18-20 часов.

Учет. Результаты учитывают по наличию «стерильных» зон на месте стекания капли фага. Обширная зона лизиса культуры свидетельствует о специфическом действии фага на данную бактериальную культуру.

Учесть и зарисовать демонстрацию опыта определения титра бактериофага по методу Грация (количественный метод)

Постановка. Чашки с 25-30 мл 1,5% МПА тщательно высушивают и оставляют до следующего дня при комнатной температуре. Для выделения фага фильтрат разводят бульоном (1:10, 1:100, 1:1000) и в пробирку, содержащую 2,5 мл расплавленного 0,7% агара, вносят 1 мл фильтрата того или иного разведения и 0,1 мл известной чувствительной к фагу культуры бактерий. Содержимое пробирки быстро смешивают и выливают в чашки на подсушенную поверхность агара. Чашки оставляют на 30 мин. при комнатной температуре, затем помещают в термостат при 37ºC на сутки.

Учет. При наличии даже единичных корпускул фага он обнаруживается в виде отдельных негативных колоний на фоне роста культуры бактерий в виде помутнения среды, при большой концентрации – в виде сплошного лизиса бактерий. Активность (титр фага) выражают максимальным разведением, в котором проявляется литическое действие. Титр фага определяют путем подсчитывания количества негативных колоний и умножают на разведение.

Например, при исследовании по методу Грация в 1 мл фага в разведении 10^-7на чашке было обнаружено 25 колоний, следовательно, титр фага (количество корпускул в 1 мл) равен 25 ·10⁷– 2,5 ·10⁸.

Учесть и зарисовать опыт определения фагогруппы и фаготипа стафилококка.

Цель: установить связь между отдельными случаями заболевания, выявление источника инфекции, а также путей ее распространения.

Постановка. Суточную бульонную культуру стафилококка засевают на поверхность питательного агара методом газона. Избыток культуры удаляют и подсушивают 30-40 мин. при 37ºC. Дно засеянной чашки расчерчивают в соответствии с количеством используемых фагов (одну для определения фагогруппы, вторую – фаготипа) и в каждую часть засеянной среды в определенном порядке наносят каплю соответствующего фага. После подсыхания капель фагов чашку переворачивают и инкубируют 18-20 часов при 37ºC.

Учет. «+» результат оценивают по наличию зон лизиса в определенных квадратах на фоне сплошного роста бактерий.

Например, исследуемая культура стафилококка относится к III фагогруппе, 47 фаготипу.

IV . Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача № 1

Типовые стафилококковые фаги применяют с целью:

1. Создания активного иммунитета

2. Создания пассивного иммунитета

3. Профилактики

4. Диагностики

5. Лечения

Теоретические вопросы для рубежного контроля знаний

1. Классификация и таксономия вирусов

2. Морфология и ультраструктура вирусов

3. Особенность строения генома вирусов

4. Этапы взаимодействия вируса с клеткой

5. Культивирование вирусов

6. Типы тканевых культур

7. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

8. Реакция нейтрализации (РН)

9. Реакция связывания комплемента (РСК)

10. Иммуноферментный анализ (ИФА)

11. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

12. Радиоиммунный анализ (РИА)

13. Молекулярная гибридизация (МГ)

14. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

15. Особенности строения бактериофагов

16. Репродукция бактериофагов и этапы взаимодействия вирулентного бактериофага с бактерией

17. Репродукция бактериофагов и этапы взаимодействия умеренного бактериофага с бактерией

18. Применение бактериофагов в медицине и генной инженерии

ЛИТЕРАТУРА

1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология // М.: Мед. информ. агенство, 2002, 736 с.

2. Борисов Л.В., Кузьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С., Федорова З.В. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии // М.: Медицина, 1994, 252 с.

3. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник / Под ред. А.А. Воробьева. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. – 691 с.: ил.

4. Медицинская микробиология // Под ред. В.И. Покровского, О.К. Поздеева. – Москва: ГЭОТАР-МЕД, 2001, 768 с.

5. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии // Под ред. В.В.Теца.-М.: Медицина, 2002, 352 с.

6. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии: Учебное пособие для студентов медицинских вузов / Под ред. А.А.Воробьева, А.С.Быкова – М.: Медицинское информационное агентство, 2003. – 236 с.; ил.

7. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология // Санкт-Петербург: Спец. Литература, 2000, 591 с.

8. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология // М.: Медицина, 1994, 528 с.

9. Микробиология : учеб. пособие / В. В. Лысак. – Минск : БГУ, 2007. – 430 с.

10. Гурина С.В., Соколова И.П., «Микробиология», СПб, 2000 г.

11. Прозоркина Н.В., Рубашкина Л.А., «Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии», Ростов-на-Дону, 2002 г.

12. А.Н.Маянский Микробиология для врачей.- Нижний Новгород : изд - во НГМА, 1999.

13. Проблемы инфектологии / Под ред. С.В.Прозоровского.- М., 1991.

14. Глик, Б. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение / Б. Глик, Дж. Пастернак. М.: Мир, 2002.

15. Гусев, М. В. Микробиология / М. В. Гусев, Л. А. Минеева. М.: Издательский центр

16. «Академия», 2003.

17. Емцев, В. Т. Микробиология / В. Т. Емцев, Е. Н. Мишустин. М.: Дрофа, 2005.

18. Нетрусов, А.И. Практикум по микробиологии / А. И. Нетрусов [и др.]. М.: Издательский центр «Академия», 2005. – 415 с.

19. Определитель бактерий Берджи: в 2 т. / под ред. Дж. Хоулта [и др.]. М.: Мир, 1997. Т. 1–2.

20. Levinson, W. Medical Microbiology and Immunology [Text] : Examination and Board Review; the 5^th Edition / W. Levinson, E. Jawetz. – Prentice-Hall International Inc., 2000. – 546p.

21. Medical Microbiology [Text] / Edited by D. Greenwod, R. Slack, J.F. Peutherer; the 16^th Edition. – Churchill Livingstone, 2002. – 710 p.

22. Microbiology and infectious diseases (The National (USA) medical series for independent study) [Text] / Edited by Gabriel T. Virella; the 3^rd Edition. – Williams and Wilkins, 1999. – 576 p.

23. Nester, E.W. Microbiology: A Human Perspective [Text] / E.W. Nester, C.E. Roberts, M.T. Nester. – Wm. C. Brown Publishers (WCB), 2001. – 568 p.

24. Rabson, A. Really Essential Medical Immunology [Text] / A. Rabson, I.M. Roitt, P.J. Delves; the 2^nd Edition. – Blackwell Publishing, 2006. – 320 p.

25. Textbook of Microbiology [Text] / Edited by C.K.J. Paniker; the 17^th Edition. – Orient Longman, 2005. – 658 p.

Интернет

26. http://www.cme.msu.edu/Bergeys/ – Bergey’s Manual Trust. Headquarters at Michigan State University.

Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 689; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 88 89 90 91 92 93 94 95 9697

Мы поможем в написании ваших работ!