Схема посева на дисбактериоз по Gold:



A I II III Кол-во в 1 гр.
30-60 - - - 10000
70-80 - - - 50000
100-150 5-10 - - 100000
Не сосч. 20-30 - - 500000
Не сосч. 40-60 - - 1 млн.
Не сосч. 100-150 10-20 - 5 млн.

Рассев петлей (посев штрихами). Берут одну чашку Петри с питательным агаром и делят ее на 4 сектора, проводя разграничительные линии на внешней стороне дна чашки. Исследуемый ма­териал петлей вносят в первый сектор и проводят ею па­раллельные линии по всему сектору на расстоянии одна от другой около 5 мм. Этой же петлей, не изменяя ее положения по отношению к агару, проводят такие же линии на других секторах чашки. В том месте, где на агар попало большое количество микробных клеток, рост микроорганизмов будет в виде сплошного штриха. На секторах с небольшим количеством клеток вырастают отдельные колонии. Кроме того, можно наливать разведен­ные растворы смешанной культуры на поверхность твер­дых сред в чашках.

Рис. (Схема?) № …

Схема посева на дисбактериоз по Н.М.Грачевой, И.Н.Щетининой, 1991:


Схема посева на дисбактериоз по Дригальскому:

Рис.(Схема) № …

Схема посева на дисбактериоз по Дригальскому:

1. посев                                                                  

 шпателем

                                                           

2. инкубация

         
   


3. учёт

 

 

                        трёхчашечный метод (по Дригальскому)

Рассев шпателем по Дригальскому. Берут 3 чашки Петри с питательной средой. На 1-ю чашку петлей или пипеткой наносят кап­лю исследуемого материала и растирают шпателем по всей поверхности питательного агара. Затем шпатель пе­реносят во 2-ю чашку и втирают оставшуюся на шпателе культуру в поверхность питательной среды. Далее шпа­тель переносят в 3-ю чашку и аналогичным образом про­изводят посев. На 1-й чашке вырастает максимальное количество колоний, на 3-й — минимальное. В зависимо­сти от содержания микробных клеток в исследуемом ма­териале на одной из чашек вырастают отдельные коло­нии, пригодные для выделения чистой культуры микро­организма.

Принципы лечения дисбактериоза

Обязательным и важнейшим при дисбиозе кишечника является устранение причин его возникновения и эффективная терапия основного заболевания. Основными современными приемами сохранения и коррекции микробной экологии является назначение: пробиотиков, пребиотиков, метаболитов бактерий-симбионтов, комплексных пробиотиков, продуктов функционального питания на основе молочнокислых бактерий, пребиотиков, аутопробиотиков, микроэкологическая инженерия.

В рамках микробиологической терапии используются преимущественно микроорганизмы, являющиеся симбионтами человека. Применение именно этих микроорганизмов оправданно, поскольку они адаптированы к внутренней среде человека. Также в схемах лечения могут применяться и несимбионты, например Saccharomyces boulardii. Лакто-, бифидобактерии, энтерококки и Escherichia coli чаще всего являются компонентами микробиологических препаратов и в наибольшей степени изучены.

На сегодняшний день наиболее широко используемыми препаратами являются 3 основные группы: пробиотики, пребиотики и синбиотики.

Пробиотики – это живые микроорганизмы и вещества микробного происхождения, оказывающие при естественном способе введения позитивные эффекты на физиологические, биохимические и иммунные реакции организма хозяина через стабилизацию и оптимизацию функции его нормальной микрофлоры (табл. 20).

Таблица 20. Препараты-пробиотики

Группы препаратов   Монокомпонентные   Поликомпонентные Комбинированные, сорбированные и метаболитные
Бифидо-содержащие Бифидумбактерин в порошке (B. bifidum). Бифидумбактерин сухой (B.bifidum).   Бификол сухой (B. bifidum и E. coli M-17). Линекс (B.infantis, L.acidophilus, E. faecium). Бифиформ (В. longum и Enterococcus faecium). Бифилиз сухой (B.bifidum и лизоцим). Бифидумбактерин форте, пробифор (B. bifidum, адсорбированные на активированном угле в дозах 5,0 x107 и 5,0 x108 м.к. соответственно).
Лакто-содержащие Лактобактерин сухой (L.plantarum 8RA-3). Биобактон сухой (L.acidophilus 12). Гастрофарм (L.bulgaricus LB-51). Ацилакт сухой (L.acidophilus - 3 разных штамма).   Кипацид (ацилакт + лизоцим). Аципол (L.acidophilus и полисахарид кефирных грибков).
Коли-содержащие Колибактерин сухой (E.coli М-17). Бификол сухой (B.bifidum и E. coli M-17). Биофлор (E.coli М-17 с экстрактами из сои, овощей и прополиса).
Из других видов бактерий   Споробактерин (B.subtilis). Бактиспорин (B.subtilis). Бактисубтил (B.sereus).   Биоспорин (B. subtilis и B.licheniformis). Хилак-форте содержит комплекс метаболитов E. coli , L.acidophilus, L.helveticus, E.faecalis, молочную, фосфорную и лимонную кислоты.

Для коррекции дисбиоза необходимы адекватные дозировки пробиотических препаратов с соответствующей длительностью курса. Наиболее распространенным подходом в терапии дисбактериоза является "метод вытеснения", основанный на применении больших доз лечебных бактериальных препаратов. Выявлена прямая зависимость между применяемой дозой и позитивной клинической динамикой.

Пребиотики – это препараты немикробного происхождения, способные оказывать позитивный эффект на организм хозяина через селективную стимуляцию роста или усиления метаболической активности нормальной микрофлоры кишечника. Основные препараты-пребиотики: лактулоза (дюфалак, лактусан), памба (пара-амино-метил-бензойная кислота), лизоцим, патотенат кальция.

Синбиотики - это препараты, полученные в результате рациональной комбинации пробиотиков и пребиотиков. Часто это биологически активные добавки, входящие в состав функционального питания, обогащенные одним или несколькими штаммами представителей родов Lactobacillus и Bifidobacterium. В РФ известны несколько препаратов: Биовестин-лакто, содержащий бифидогенные факторы и биомассу B.bifidum, B.adolescentis, L.plantarum; Мальтидофилюс, содержащий мальтодекстрин и биомассу B.bifidum, L.acidоphilus, L.bulgaricus; Бифидо-бак, включающий фруктоолигосахариды из топинамбура и комплекс из бифидобактерий и лактобацилл, Бифидумбактерин-мульти 1, 2 и 3 содержащие набор различных видов бифидобактерий (B.bifidum, B.longum, B.adolescentis), характерных определенному возрасту пациента, а также набор витаминов, микроэлементов и антиоксидантов; ламинолакт, содержащий энтерококки, аминокислоты, пектины и морскую капусту

Табл. № …

Пребиотики Синбиотики
Лактулоза (дюфалак, лактусан) Биовестин-лакто (B.bifidum, B.adolescentis, L.plantarum и бифидогенные факторы)
ПАМБА Мальтодофилюс (B.bifidum, L.acidophilus, L.bulgaricus и мальтодекстрин)
Лизоцим Бифидо-бак (комплекс лакто- и бифидобактерий и комплекс фруктоолигосахаридов из топинамбура)
Пантотенат кальция Ламинолакт (Enterococcus facium L-3, аминокислоты, пектины, морская капуста)

Приложения: № …

Приказ от 9 июня 2003 г. об утверждении отраслевого стандарта "Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника" (ОСТ 91500.11.0004-2003)

Виды микроорганизмов

Возраст, годы

< 1 1-60 > 60
Бифидобактерии    1010-1011 109-1010 108-109
Лактобактерии 106-107 107-108 106-107
Бактероиды 107-108 109-1010 1010-1011
Фузобактерии < 106- 106 108-109 108-109
Эубактерии 106-107 109-1010 109-1010
Пептострептококки < 105 109-1010 1010
Клостридии £ 103 £ 105 £ 106
E.coli типичные                   107-108 107-108 107-108
E.coli лактозонегативные £ 105 £ 105 £ 105
E.coli гемолитические             0 0 0
Другие условнопатогенные энтеробактерии <*> < 104 < 104 < 104
Энтерококки 105-107 105-108 106-107
Стафилококк золотистый            0 0 0
Стафилококки (сапрофитный    эпидермальный)                    < 104 < 104 < 104
Дрожжеподобные грибы рода    Candida £ 103 £ 104 £ 104
Неферментирующие бактерии £ 103 £ 104 £ 104

Приложение № …

ОСТ 91500.11.0004-2003: «Степени микробиологических нарушений при дисбактериозе кишечника у детей»:

  1 степень 2 степень 3 степень
младше 1 года · Бифидобактерии 109 -108 · лактобактерии до 105 -104    · типичные E.coli 106 -105 · возможно повышение содержания типичных E.coli до 109-1010 · Бифидобактерии 108 и ниже · лактобактерии до 104 и ниже · Гемолитические м/о · УПМ 105 -107 · Ассоциации УПМ 104 -105  · Бифидобактерии 108 и ниже · лактобактерии до 104 и ниже · Ассоциации УПМ 106 -107 
старше 1 года · Бифидобактерии 108 -107 · лактобактерии до 106 -105    · типичные E.coli 106 -105 · возможно повышение содержания типичных E.coli до 109-1010 · Бифидобактерии 107 и ниже · лактобактерии до 105 и ниже · Гемолитические м/о · УПМ 105 -107 · Ассоциации УПМ 104 -105  · Бифидобактерии 107 и ниже · лактобактерии до 105 и ниже · Ассоциации УПМ 106 -107 
до 60 лет · Бифидобактерии 107 -106 · лактобактерии до 106 -105    · типичные E.coli 106 -105 · возможно повышение содержания типичных E.coli до 109-1010 · Бифидобактерии 107 и ниже · лактобактерии до 105 и ниже · Гемолитические м/о · УПМ 105 -107 · Ассоциации УПМ 104 -105  · Бифидобактерии 107 и ниже · лактобактерии до 105 и ниже · Ассоциации УПМ 106 -107 
старше 60 лет · Бифидобактерии 108 -107 · лактобактерии до 105 -104    · типичные E.coli 106 -105 · возможно повышение содержания типичных E.coli до 109-1010 · Бифидобактерии 106 и ниже · лактобактерии до 104 и ниже · Гемолитические м/о · УПМ 105 -107 · Ассоциации УПМ 104 -105  · Бифидобактерии 106 и ниже · лактобактерии до 104 и ниже · Ассоциации УПМ 106 -107 

ПЛАН ИЗУЧЕНИЯ ТЕМЫ

I. План лабораторной работы:

1. Заполнить таблицу: «Облигатная микрофлора толстого кишечника» (см.базовый текст)

2. Заполнить таблицу «Основные функции нормальной микрофлоры» (см.базовый текст)

3. Лабораторная диагностика дисбактериоза (уделить внимание)

NB! Микрофлору кишечника на дисбактериоз изучают с помощью прямых и косвенных методов

NB! Носит комплексный характер - т.е. параллельно проводится исследование направленное на выделение многих видов микроорганизмов, входящих в состав нормальной микрофлоры

NB! Исследование обязательно является количественным, т.е. направлено не только на установление факта присутствия, но и количества искомых микроорганизмов в исследуемом материале

4. Заполнить таблицу: «Косвенные методы экспресс-диагностики дисбактериоза кишечника» (см.базовый текст)

5. Заполнить таблицу: «Среды для культивирования микроорганизмов для диагностики дисбактериоза» (см.базовый текст)

6. Разобрать схему посева на дисбактериоз по Н.М.Грачевой, И.Н.Щетининой, 1991 (см.базовый текст)

7. Разобрать схему посева на дисбактериоз по Дригальскому (см.базовый текст)

8. Разобрать схему посева на дисбактериоз по Gold (см.базовый текст)

9. Ознакомиться с приказом от 9 июня 2003 г. об утверждении отраслевого стандарта "Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника" (ОСТ 91500.11.0004-2003)

10. Ознакомиться с приложением ОСТ 91500.11.0004-2003: «Степени микробиологических нарушений при дисбактериозе кишечника у детей»

11. Заполнить таблицу: «Основные группы препаратов, используемые для коррекции дисбиоза» (см.базовый текст)

12. Решение ситуационных задач


Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 627; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!