Опыт № 5 Фагоцитоз птичьих эритроцитов в перитонеальном экссудате морской свинки (опыт И.И. Мечникова)
За сутки до занятия морской свинке вводят внутрибрюшинно 8‑10 мл стерильного мясо-пептонного бульона. При этом возникает асептическое воспаление, в перитонеальном экссудате скапливается большое количество макрофагов. Во время занятия морской свинке внутрибрюшинно вводят 5-8 мл 5% птичьих эритроцитов, подогретых до +38°С. Птичьи эритроциты являются объектом фагоцитоза.
Через 30-40 минут после введения птичьих эритроцитов у подопытного животного ножницами делают небольшой (3-5 мм) разрез кожи живота по средней линии. В месте разреза стерильной пастеровской пипеткой прокалывают брюшную стенку. В силу капиллярности перитонеальный экссудат заполняет пипетку. Из этого экссудата готовят 2 препарата: 1 – висячую каплю; 2 – фиксированный мазок.
Приготовление висячей капли
3-5 капель экссудата помещают на часовое стекло и смешивают с 1 каплей краски «нейтральрот» (нейтральный красный). На покровном стекле делают ободок из вазелина, а в центре его помещают каплю экссудата, смешанного с краской. Покровное стекло накрывают предметным стеклом с лункой. Затем весь препарат переворачивают покровным стеклом вверх, при этом капля экссудата повисает над лункой. Рассматривая препарат под малым увеличением, среди массы желтоватых эритроцитов находят красноватые комочки – макрофаги морской свинки, в которых уже идут процессы фагоцитоза. Поставив такой комочек в центр поля зрения, подробно рассмотреть его под большим увеличением, при этом можно наблюдать все стадии фагоцитоза птичьих эритроцитов макрофагами морской свинки.
|
|
|
«Нейтральрот» – индикатор, принимающий в кислой среде красный цвет. Следовательно, красноватый цвет приобретает протоплазма тех макрофагов, где уже идут процессы переваривания фагоцитированных клеток под воздействием ферментов макрофага.
Приготовление мазка
Каплю экссудата наносят на предметное стекло и с помощью стекла со шлифом делают мазок. Высохший мазок фиксируют в смеси Никифорова 15-20 минут или в метиловом спирте 3 минуты. Затем мазок заливают краской Романовского на 20-25 минут, смывают водой и, высушив, рассматривают под микроскопом с иммерсионной системой. Зарисовывают все стадии фагоцитоза.
Дополнительная литература:
ЗАНЯТИЕ 10. ЛИХОРАДКА
Цель занятия
Уметь проводить патофизиологический анализ клинических состояний и модельных ситуаций, связанных с развитием лихорадки. Изучить некоторые механизмы развития лихорадки (зависимость от функционального состояния организма и температуры окружающей среды)
Содержание занятия
Контроль и коррекция исходного уровня подготовки студентов.
|
|
|
Собеседование и дискуссия по вопросам:
1. Типовые нарушения теплового баланса организма: общая характеристика.
2. Лихорадка: этиология, пирогенные вещества, их природа и классификация; механизмы действия пирогенов. Биологическое значение лихорадки.
3. Механизмы развития лихорадки. Изменения теплопродукции и теплоотдачи на различных стадиях лихорадки. Принципы фармакокоррекции лихорадки.
4. Изменения физиологических систем организма при лихорадке. 1Особенности течения лихорадки и гипертермии у детей грудного возраста.
5. 2Отличие лихорадки от экзогенного перегревания как фактора профессиональной вредности и других видов гипертермии.
Выполнение обучающих заданий.
Опыт № 1 Влияние функционального состояния центральной нервной системы на развитие лихорадочной реакции
В опыт берутся три белые мыши. Животные фиксируются на станке спинкой книзу. Производится измерение ректальной температуры. Затем одной мыши внутрибрюшинно вводится 1% раствор гексенала (1 мл на 100 г веса), второй мыши – 0,05% раствор кофеина (1 мл на 100 г веса), третья мышь контрольная (также и для опыта №3). Через 10 минут после введения препаратов у подопытных животных вновь измеряют ректальную температуру, затем всем под кожу вводят по 0,2 мл пирогенала. Через 10 минут в течение 1,5 часов у животных измеряют ректальную температуру. Результаты сравнивают и анализируют.
Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 189; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!