Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции
Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции проводится на основании комплексного обследования больного: клинического, выявления специфических антител в крови, выделения вируса из исследуемого материала путем заражения культур клеток (Т-хелперов), идентификации вирусных антигенов или антител с помощью иммуноблоттинга, по обратнотранскриптазной активности, выявлению провируса в инфицированных клетках, по состоянию иммунной системы организма. Среди существующих методов лабораторной диагностики наиболее распространены серологические - выявление антител к антигенам вируса. Для выявления специфических антител в сыворотке обследуемого применяют – иммуноферментный анализ (ИФА). Исследование сыворотки на наличие антител в ИФА относят к тестам первого уровня. Положительный результат ИФА считают предварительным (ориентировочным) и он должен быть подтвержден на 2-3 ИФА тест-системах.
К тестам второго уровня – подтверждающим относят исследование с помощью иммуноблоттинга (ИБ), молекулярная гибридизация, ПЦР. Для постановки окончательного диагноза в ИБ определяют наличие антител к каждому из структурных белков ВИЧ.
При использовании тест-систем ведущих фирм мира у больных ВИЧ-инфекцией в иммунном блоттинге во всех случаях выявляются антитела к gp160 и лишь у трети (38,8%) к р15.
Выявляемость антител к белкам ВИЧ в иммунном блоте
| Антитела к белкам ВИЧ | % выявления | Антитела к белкам ВИЧ | % выявления |
| gp 160 | 100 | gp 41 | 84,4 |
| gp 120 | 91,1 | p 31-34 | 84,4 |
| p 65-68 | 93,3 | p 24-25 | 100 |
| p 55-52 | 93,0 | p 17-18 | 80,0 |
| p 15 | 38,8 |
|
|
|
ВОЗ (1991) предлагает следующий принцип оценки результатов иммунного блота: а) положительный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к двум вирусным белкам из группы env (gp 120, gp 41) с наличием или отсутствием белков - продуцентов gag (p 17, 25, 15) и pol;
б) отрицательный результат - отсутствие каких-либо антител;
в) неопределенный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к белкам из группы gag (p 17, 25, 15) и pol. Чаще всего неопределенный результат связан с белками- продуцентами экспрессии гена gag ВИЧ-1 р15/17, р24 и р55, т.к. в этих случаях возможны или инфицирование или ложноположительный результат. В подобных случаях, если обследуемый не относится к группе риска, а повторный анализ не дает нарастания титра антител, скорее всего человек не инфицирован.
Отрицательный результат иммуноблоттинга при наличии клинических и эпидемиологических подозрений на ВИЧ-инфекцию не отвергает возможность данного заболевания и требует повторения лабораторного исследования. Это объясняется тем, что в инкубационном периоде заболевания АТ еще нет, а в терминальной стадии, вследствие истощения иммунной системы, они уже перестают вырабатываться. В этих случаях наиболее перспективна полимеразная цепная реакция (ПЦР), позволяющая обнаружить частицы РНК вируса.
|
|
|
Способность вируса поражать клетки, имеющие СД-4 рецептор, позволяет проводить косвенную диагностику СПИДа на основании иммунного статуса организма. В здоровом организме имеется постоянное соотношение между рецепторами клеток СД 4 и СД 8. Этот показатель у здорового человека составляет 2,0 и более. Диагностическое, и особенно, прогностическое значение имеет показатель количество Th в 1 мл крови больного СПИДом и соотношение Th/Ts.
Если отношение Th/Ts равно 2 и более, то человек здоров. При снижении этого показателя до 0,5-легкое течение болезни и возможны оппортунистические инфекции, то есть заболевание, указывающее на наличие ВИЧ-инфекции. При значении Th/Ts от 0,2 до 0,5- регистрируется средней степени тяжести заболевание. Снижение этого показателя до 0,2 и ниже наблюдается при тяжелом течении болезни.
|
|
|
Зависимость между количеством Тh в 1 мл крови больного и процентом выживаемости больных СПИДом:
| Процент выживаемости больных со СПИДом | Количество Т-хелперов в 1 мл |
| Здоровый человек | 800 |
| 90% | Более 300 |
| 50-60% | 100-300 |
| 20% | Менее 100 |
Клинические стадии болезни
• Общая продолжительность составляет в среднем 10 лет. В течение всего этого времени наблюдается постоянное снижение количества Тх в крови пациента, что в конечном итоге становится причиной смерти.
• Инкубационный период (период от момента заражения до появления реакции организма в виде клинических проявлений «острой инфекции» и/или выработки антител к ВИЧ) - от 3-х недель до 3 мес., иногда до 1 года. Активное размножение ВИЧ. Диагноз ВИЧ-инфекции на данной стадии ставится на основании эпидемиологических данных и лабораторно должен подтверждаться обнаружением в крови пациента ВИЧ, его антигенов, нуклеиновых кислот ВИЧ.
• Продромальный период - (около 1 мес.) активная репликация ВИЧ в организме продолжается. Клинические проявления: субфебрильная температура, крапивница, стоматит, воспаление лимфатических узлов - они становятся увеличенными, мягкими и болезненными (проходит под маской инфекционного мононуклеоза). Максимальная концентрация вируса, антител появляется только в самом конце продромального периода.
|
|
|
• Латентный период - 5-10 лет и более, единственное проявление - стойкое увеличение лимфатических узлов (плотные, безболезненные) - лимфоаденопатия. Характеризуется медленным прогрессированием иммунодефицита, компенсируемого за счет избыточного воспроизводства CD4-клеток. В крови обнаруживаются антитела к ВИЧ.
• ПреСПИД - 1-2 года. Продолжающаяся репликация ВИЧ гибель CD4-клеток развитие на фоне иммунодефицита вторичных (оппортунистических) заболеваний, инфекционных и/или онкологических: часто рецидивирующий герпес - долго не заживающие изъязвления слизистой рта, половых органов, стоматит. Лейкоплакия языка (разрастание сосочкового слоя — «волокнистый язык»). Кандидоз слизистой рта, половых органов.
• Терминальная стадия - СПИД: имеющиеся у больных вторичные заболевания приобретают необратимое течение, и больной погибает в течение нескольких месяцев. Регистрируется существенное снижение антител в крови.
Профилактика:
Специфической профилактики нет.
Перспектива создания вакцины – неопределенная из-за высокой скорости антигенной изменчивости ВИЧ (AIDSVAX, ALVAX, ДНК – вакцины, векторные вакцины, синтетические пептидные вакцины – созданы, но не показали ожидаемой эффективности).
Основное значение имеет неспецифическая профилактика:
1. Контроль донорской крови и ее препаратов.
2. Контроль используемых в медицине биологических жидкостей (грудное молоко, сперма, костный мозг и др.)
3. Тщательная стерилизация медицинского оборудования.
4. Применение одноразовых шприцев, игл.
5. Борьба с наркоманией, проституцией, гомосексуализмом
6. Санитарное просвещение.
7. Отказ от «опасных» видов половых контактов, использование презервативов, наличие постоянного полового партнера.
Дата добавления: 2018-10-27; просмотров: 182; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!