Работа № 6. Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции

Цель: изучить методы диагностики ВИЧ инфекции.

Самостоятельная работа:

А) Учесть результат реакция ИФА, поставленной с целью выявления специфических антител к gр 120 и gр 41. Какой материал был взят на исследование? Сделать вывод о наличии инфицирования. Какие методы необходимо применить для постановки окончательного диагноза?

 

Направление:___________________________________________________________________

 

Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

 

Постановка:

                                Опыт                  Негативный контроль     Позитивный контроль

 

 

gр 120

 

 

gр 41

 

Результат:______________________________________________________________________

 

Вывод:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Б) У пациента в результате скринингового исследования для обнаружения антител к ВИЧ в ИФА была выявлена положительная реакция. Повторное исследование в реакции ИФА также дало положительные результаты. Для окончательной постановки диагноза ВИЧ-инфицирования было проведено исследование методом иммунного блоттинга. Оценить результат. Сделать вывод.

Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции. Антиген возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антигена. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от не связавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс (Аг+Ат больного + Ат против Ig человека) выявляют добавлением субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.

 

промыли                                    промыли

 

                                                                                        *

                       +                         +                                     +субстрат 

                                      Ат                        АГС

 

 

                                                

 

Вывод: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 7. Иммунологическая лабораторная диагностика СПИДа

Цель: изучить методы иммунологическая лабораторной диагностики СПИДа

Самостоятельная работа: решить задачи

1) определить процент выживаемости больных СПИДом если количество Т-хелперов в 1 мл крови составляет 150.

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

2) определить тяжесть течения заболевания СПИДом у двух больных, если соотношение Th/Ts у одного больного равно 0,7, а у другого 0,3.

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

3)  определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. При обследовании группы риска выявлен здоровый пациент, у которого в крови

определились антитела к ВИЧ, а вирус выявить не удалось. Соотношение Th/Ts равно 2,0,

содержание Т-хелперов в одном мл крови составляет 800.

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

4)  определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. Больной обратился с жалобами на длительную субфебрильную температуру,

упорный кашель, потерю в весе тела, понос. При вирусологическом обследовании из

крови больного выделен ВИЧ и антитела к ВИЧ. Соотношение Th/Ts равно 0,8,

количество Th в 1мл крови составило 400.

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

 5) определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. Больной с заболеванием саркомой Капоши обследовали на наличие СПИДа. В крови выявлен и вирус и антитела к ВИЧ. Количество Т-хелперов составило 80 на 1 мл крови, а соотношение Th/Ts равно 0.15.

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Подпись преподавателя__________________________________________________________

Самостоятельная работа студента во внеурочное время:

1. Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).

 

Вакцина «Энджерикс»

2.____________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________

5.____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________

 

Ig человека против гепатита В

2. __________________________________________________________________________

3. __________________________________________________________________________

4. __________________________________________________________________________

5. __________________________________________________________________________

6. __________________________________________________________________________

 

Интерферон лейкоцитарный человеческий

2.____________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________

5.____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________

Эритроцитарный HBs -диагностикум

2.____________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________

5.____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________

1. Диагностикум gр 120

2.____________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________

5.____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________

Антиглобулиновая сыворотка, меченная пероксидазой

2.____________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________

5.____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________

 

1. Заполнить контрольные карты по предложенным нозоформам:

ВИЧ

Таксономия возбудителя:

Семейство____________________________________________________________________

Подсемейство_________________________________________________________________

Тип__________________________________________________________________________

Структура вириона____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и репродукция

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

 

Назовите биологические жидкости больного ВИЧ-инфекцией, содержащие высокие концентрации вируса: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Перечислите возможные пути передачи возбудителя_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Какими методами лабораторной диагностики устанавливают наличие ВИЧ-инфекции: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Какие патологии в полости рта возникают у ВИЧ-инфицированных?

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия)__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты)__________________________________________________________________

Лечение (препараты)__________________________________________________________________

Подпись преподавателя__________________________________________________________

СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ

1. В инфекционную больницу поступил мужчина 20 лет с температурой 38°С, жалобами на боли в правом под­реберье, иктеричностью склер. Больной является наркоманом. Возникло подозрение на гепатит В. Для подтверждения диагно­за был проведен ИФА в целях обнаружения HBsAg и антител к HBcAg. Учесть результат реакции, оформить протокол, сде­лать вывод.

Для учета результатов исследования выделяются планшеты с ИФА для серологической (обнаружение AT) и экспрессной (обнаружение АГ) диагностики гепатита В.

Вопросы. Подтвержда­ется ли диагноз гепатита В у обследуемого? Почему?

 

2. В инфекционную больницу поступил пациент с жалобами на тошноту, рвоту, головную боль. При обследовании выявлены гепато- и спленомегалия, желтушность склер. В анамнезе – переливание крови. РПГА поставлена с эритроцитарным HBs диагностикумом и парными сыворотками больного. Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод.

 

3. В родильный дом поступила беременная женщина, которая в прошлом переболела гепатитом «В». При серологическом исследовании антигены вирусов гепатитов не были выявлены. Ответить на вопросы: Передается ли гепатит «В» ребенку во время беременности, если да, то каким путем, если нет, то в каких случаях? Какой механизм является основным при передаче гепатита «В»? Что служит исследуемым материалом и какова микробиологическая диагностика гепатита «В»? Каков патогенез гепатита «В», возможен ли благоприятный исход после перенесенного заболевания? Проводится ли специфическая профилактика гепатита «В», если да, то чем? Поясните ответ.

 

4. У пациента-наркомана длительная субфебрильная температура, потеря в весе, упорный кашель. Какой материал должен быть взят у пациента для серологического исследования? Какая тестовая реакция применяется с целью серодиагностики? Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод. При иммунологическом исследовании выявлено соотношение Тh/Тs равно 0.8, количество Тh в 1 мл крови составило 400.

 

5. В инфекционную больницу поступил мужчина с жалобами на сильные боли в горле, увеличение лимфатических узлов, повышение температуры. Возникло подозрение на ВИЧ-инфекцию. При обследовании у пациента соотношение Тh/Тs равно 2.0, количество Тh в 1 мл крови составило 800.

ИФА поставлена с гликопротеинами 120 и 41 вируса иммунодефицита человека и сывороткой пациента. Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод. Какое дополнительное исследование должно быть проведено для подтверждения диагноза?

 

6. Женщина поставлена на учет по беременности. Кровь отправлена на выявление ВИЧ-инфекции. Реакция ИФА поставлена с иммуноглобулинами против гликопротеинов 120 и 41 вируса иммунодефицита человека. Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод.

7. В иммунологическую лабораторию Центра по профилактике СПИДа обратились два человека с просьбой об­следовать их на ВИЧ-инфекцию. Было проведено серологиче­ское исследование путем постановки ИФА. Оценить результат исследования, оформить протокол и сделать вывод.

Для учета результатов исследования выделяется планшет с ИФА для серологической диагностики ВИЧ-инфекции.

 

Диагностикум	Сыворотки
	обследуемого 1	обследуемого 2	положительная контрольная	отрицательная контрольная
ВИЧ-1	-	+	+	-
I вариант (gp 120)	(отсутствие окрашивания)	(окрашивание)
ВИЧ-2
I вариант (gp 125)	-	-	+	-
ВИЧ-1
II вариант (gp 41)	-	+	+	-
ВИЧ-2 II вариант(gp 36)	-	-	+	-

Вопросы 1. У кого из обследуемых возникло подозрение на ВИЧ-инфекцию? По­чему?

2. Какие дополнительные исследования нужно провести для подтверждения либо исключения ВИЧ-инфекции?

 

8. Больной К. 32 года поступил в терапевтическое отделение больницы по поводу пневмонии. В последние полгода часто болеет: повторяется стоматит, обостряется фурункулез, опоясывающий герпес. Больной сильно похудел, отмечает нарастающую слабость. Имел гомосексуальные связи в течение 10 лет. Результаты лабораторного исследования: предварительный анализ на ВИЧ-инфекцию положительный (ИФА), выявлена пневмоцистная природа пневмонии. Предварительный диагноз: ВИЧ-инфекция. Какая стадия ВИЧ-инфекции у больного, что для нее характерно? Каков прогноз для данного больного? Какой материал необходимо взять у пациента, и какой метод лабораторной диагностики использовать для подтверждения диагноза?

Решение ситуационной задачи:

 

 

.

Теоретическая справка

---

Дата добавления: 2018-10-27; просмотров: 456; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!