Стафилококки относятся к семейству Staphylococcaceae, роду Staphylococcus.



Стафилококки - кокки правильной круглой формы, в мазках обычно располагаются в виде несимметричных скоплений (“гроздья винограда”) или беспорядочно; аспорогенные неподвижные грамположительные факультативно-анаэробные бактерии. У некоторых штаммов стафилококков можно обнаружить капсулу.Стафилококки не требовательны к питательным средам, поэтому хорошо растут на большинстве используемых в бактериологии. На жидких средах при росте дают равномерное помутнение. На плотных средах за счет продукции нерастворимых в воде пигментов колонии окрашены, и их цвет варьирует от белого до темно-желтого.

Стафилококки являются метаболически активными микроорганизмами, обладая протеолитической активностью и ферментируя многие углеводы с образованием молочной кислоты, но не образуя при этом газ. У различных штаммов сахаролитическая и протеолитическая активность варьирует в довольно значительных пределах. Наиболее часто вызывают заболевания у человека следующие виды стафилококков - S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus. Стафилококки имеют сложное антигенное строение и содержат свыше 50 различных как по строению (полисахаридных и белковых), так и по локализации антигенов.

По локализации различают:целлюлярные и экстрацеллюлярные. По специфичности антигены стафилококков подразделяют на родовые, видовые, типоспецифические и перекрестно-реагирующие.Стафилококки – условно-патогенные микроорганизмы.

Исходя из этого, при снижении уровня иммунологической защиты или нарушении целостности кожно-слизистых барьеров как эндогенная инфекция (аутоинфекция) могут возникнуть гнойно-воспалительные заболевания стафилококковой этиологии.пути передачи могут быть различными – воздушно-капельный, контактно-бытовой, артифициальный. Основной метод микробиологической диагностики стафилококковых инфекций – бактериологическое исследование. Материал для него определяется их клиническими проявлениями

Осложнения со стороны макроорганизма:1)аллергические реакции.2)прямое токсическое (органотоксическое) действие химиопрепаратов.3)побочные токсические (органотропные) эффекты.4)реакции обострения.5)развитие дисбиоза (дисбактериоза) Осложнение химиотерапии со стороны микроорганизмов проявляется 1)развитием лекарственной устойчивости.2)Плазмидная устойчивость 3)Энзиматическая инактивация антибиотиков. 4)Изменение проницаемости клеточной стенки для антибиотика или подавление его транспорта в бактериальные клетки. 5)Изменение структуры компонентов микробной клетки. У бактерий одного и того же вида могут реализовываться несколько механизмов резистентности.

4)Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений. Определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингиб рост исслед культ бакт. Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика вспецраств или буфер р-ре. Из него готовят все послед развед в бульоне, после чего к каждому развед доб 0,1 мл исследуемой бакт суспенз, сод 106—107 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозр пит средой указ на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержащейся в ней минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика.

Билет

Функции клеточной стенки состоят в том, что она является осмотическим барьером, определяет форму бактериальной клетки, защищает клетку от воздействий окружающей среды, несет разнообразные рецепторы, способствующие прикреплению фагов, колицинов, а также различных химических соединений. Кроме того, через клеточную стенку в клетку поступают питательные вещества и выделяются продукты обмена. В клеточной стенке локализован О-антиген и с ней связан эндотоксин бактерий.

Имеется 2 типа строения клеточной стенки у бактерий. В обоих случаях ее основу составляет пептидогликан муреин. У одних бактерий (1-й тип) он составляет до 90% массы клеточной стенки и образует многослойный (до 10 слоев) каркас. Такие бактерии при окраске по методу Грама прочно удерживают комплекс генцианового фиолетового и йода; они окрашиваются в сине-фиолетовый цвет и называются грамположительными.У бактерий со 2-м типом строения клеточной стенки поверх 2-3 слоев пептидогликана муреина располагается слой липополисахаридов. Эти бактерии при окраске по методу Грама обесцвечиваются спиртом, прокрашиваясь дополнительным красителем фуксином в розово-красный цвет. Они называются грамотрицательными.

В связи с различиями в строении клеточной стенки все бактерии делятся на 4 отдела:-грациликуты (Gracilicutes) – бактерии с тонкой клеточной стенкой, грамотрицательные; -фирмикуты (Firmicutes)- бактерии с толстой клеточной стенкой, грамположительные; -тенерикуты (Tenericutes) - бактерии без ригидной клеточной стенки (микоплазмы);-мендозикуты (Mendosicutes) – архебактерии, отличающиеся дефектной клеточной стенкой, Из любой бактериальной клетки можно получить формы, полностью или частично лишенные клеточной стенки. Они называются, соответственно, протопласты и сферопласты. Кроме того, существуют L-формы бактерий, которые, в отличие от протопластов и сферопластов, способны к размножению, являясь вполне полноценными микробными клетками данного вида бактерий.

Haemophilus influenzaeкак и все бактерии этого семейства, представляют собой мелкие и средних размеров прямые палочки, неспорообразующие, неподвижные, грамотрицательные, аэробы, образуют капсулу. Для культивирования гемофилов требуются богатые питательными веществами среды, содержащие кровь (кровяной агар) или ее препараты- X-фактор (гемин), и V-фактор (НАД). Примером такой среды может служить так называемый “шоколадный” агар (МПА с добавлением прогретой крови.Биохимическая активность гемофильных бактерий выражена достаточно слабо – расщепляют в основном углеводы только до кислоты, без газообразования. В их антигенной структуре выделяют соматический белковый антиген (О-антиген) и капсульный полисахаридный антиген (К-антиген). H.influenzae может входить в состав нормальной микрофлоры слизистой ротоглотки и верхних дыхательных путей, поэтому инфекция может возникать как эндогенная. При экзогенном инфицировании H.influenzae вызывает инфекции органов дыхания, менингит. Путь передачи этой инфекции - воздушно-капельный.

Основным методом микробиологической диагностики является бактериологическое исследование.Материалом для исследования служит мокрота или спинно-мозговая жидкость, реже кровь.При диагностике менингитов используют экспресс-метод –иммуноиндикацию с помощью реакции иммунофлюоресценции со специфической сывороткой типа b.

Основу серологического исследования составляет иммунологическая реакция — специфическое взаимодействие АТ с АГ. Эту реакцию называют серологической, так как для ее постановки используют сыворотку ,содержащую антитела.Серологические реакции применяются в двух направлениях:-для идентификации неизвестной антигенной структуры, -для серологической диагностики. Под аббревиатурой РПГА подразумевается особая реакция, выявляющая в организме пассивную гемагглютинацию. С помощью такой реакции можно обнаружить процесс агглютинации эритроцитов в организме.

4) Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в чашке Петри.Среда АГВ: сухой питательный рыбный бульон, агар-агар, натрий фосфат двузамещенный. На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста исследуемой культуры бактерий судят о ее чувствительности к антибиотикам.

Билет

1)Цитоплазматическая мембрана (ЦПМ) — обязательный структурный элемент любой клетки. Она примыкает с внутренней стороны к клеточной стенке. Мембрана чаще трехслойная. По химическому составу ЦПМ является белково-липидным комплексом. Липиды представлены фосфолипидами и нейтральными жирами. Белки ЦПМ разделяются на структурные и ферментативные. Функции мембран:•Структурная •Барьерная •Интегрирующая •Транспортная •Энергетическая •Участвует в биосинтезеряда компонентов •Участвует в репликации ДНКи ее последующем расхождении по дочерним клеткам. •Участвует вклеточном делении •Участвует в спорообразовании.Выявление мембран:1. Электронная микроскопия.

МЕЗОСОМЫПри избыточном росте, по сравнению с ростом КС, ЦПМ образует инвагинаты (впячивания) — мезосомы. Мезосомы — центр энергетического метаболизма прокариотической клетки. Мезосомы являются аналогами митохондрий эукариот, но устроены проще. Хорошо развитые и сложно организованные мезосомы характерны для Грам+ бактерий. У Грам- бактерий мезосомы встречаются реже и просто организованы. По форме различают мезосомы:- ламеллярные (пластинчатые),- везикулярные (имеющие форму пузырьков),- тубулярные (трубчатые),- смешанные. Функции:•Усиливают энергетический метаболизм клеток,так как увеличивают общую «рабочую» поверхность мембран.•Участвуют в секреторных процессах(у некоторых Грам+ бактерий).•Участвуют вклеточном делении.При размножении нуклеоид движется к мезосоме, получает энергию, удваивается и делится амитозом. •Участвуют в спорообразовании.

РИБОСОМЫ Строение. В отличие от клеток эукариотов рибосомы бактерий не объединены в эндоплазматическую сеть и имеют меньшую молекулярную массу. Бактериальные рибосомы — рибонуклеопротеиновые частицы размером 20 нм, состоящие из двух субъединиц 30Sи 50S. Перед началом синтеза белка происходит объединение этих субъединиц в одну — 70S .количество рибосомальной РНК (рРНК) — 80–85% всей бактериальной РНК. Функции рибосом: Синтез белка. Существует два основных типа рибосом — 70S(у прокариот) и 80S(у эукариот). Бактериальные рибосомы, отличные от белоксинтезирующих систем эукариотических клеток, являются «мишенью» для действия многих антибиотиков.

К семейству Bacteroidaceae относятся грамотрицательные, обычно неподвижные, плеоморфные палочки, иногда веретенообразчной формы. Не образуют спор. Облигатные анаэробы. Чувствительность к кислороду неодинакова у разных видов, но многие достаточно аэротолерантны и выживают в обычной атмосфере до 72 часов. Растут на обогащенных питательных средах, например, на кровяном агаре. Вместе с тем они являются едва ли не главным компонентом нормальной микрофлоры, количественно доминируя в ротовой полости, толстом кишечнике и влагалище.Ротовая полость. Главным биотопом являются десневые карманы и субдесневые бляшки. У детей до смены молочных зубов бактероиды обнаруживаются непостоянно, но затем их количество возрастает, а присутствие становится обязательным. Кроме собственно бактероидов, здесь обнаруживаются представители родов Previtella, Porphyromonas, Selenomonas, Wolinella, фузобактерии и лептотрихии. Бактероиды fragilis-группы в ротовой полости отсутствуют. Количество фузиформных бактерий, регистрируемое в десневой микрофлоре путем прямой микроскопии, в тысячи раз превосходит число культивируемых клеток. Многие из изолятов по своим свойствам не укладываются в современные классификационные схемы и условно объединяются в довольно расплывчатый вид Fusobacterium nucleatum (polymorphum).

Реакции иммунитета применяются для диагностики инфекционных болезней, анализа антигенной структуры микроорганизмов, суждения об эволюционных и генетических связях различных видов организмов. В основу практического применения этих реакций положен принцип тесной физико-химической связи между антигенами и антителами, специфичности их взаимодействия. Реакции иммунитета дают возможность судить о динамике защитных свойств организма в процессе инфекционного заболевания, степени иммунитета, возникающего в случае применения предохранительных прививок. Реакция агглютинации протекает в две фазы. В первой фазе происходит адсорбция агглютининов на поверхности клетки, во второй образование агрегатов (агглютината) и выделение их в осадок, причем этот процесс происходит только в присутствии электролитов.процесс агглютинации происходит в соответствии с теорией решетки, согласно которой агглютинат образуется вследствие того, что двухвалентные антитела, одним активным центром соединяющиеся с одной клеткой, другим с другой, образуют плотное их соединение и выпадение в осадок. В пользу этой точки зрения говорят данные, что при образовании агглютината существенное значение имеют определенные количественные соотношения антигена и антител (феномен оптимума) и задержка агглютинации при избытке или недостатке антител. Эти реакции применяются для диагностики инфекционных заболеваний, определения природы возбудителей.

АЛГОРИТМ ПРИГОТОВЛЕНИЯ МАЗКА из культуры, выращенной на скошенном агаре («косяке»)1.Предметное стекло аккуратно берут за ребро и наносят номер или наименование бактериальной культуры.2.Зажигают спиртовку.3.Фламбируют поверхность стекла, где будет располагаться мазок.4.Стекло помещают вблизи спиртовки на чашку Петри5.На предметное стекло наносят каплю дистиллированной воды.6.В левую руку берут пробирку с культурой ипомещают между 1 и 2 пальцами таким образом, что ладонь находится под пробиркой и горлышко пробирки направлено в зону спиртовки.7.В правую берут бактериальную петлю, как карандаш.8.Петлю фламбируют до покраснения сначала горизонтально, затем вертикально (рис. №1).9.Не выпуская петли, мизинцем правой руки прижимают пробку пробирки к ладони и осторожно вынимают ее из пробирки.Движения должны быть плавными.10.Горло пробирки обжигают.11.Вводят в пробирку петлю, охлаждая ее о стенки пробирки.12.Осторожно закрывают и захватывают петлей культуру, не повреждая агара, и вынимают петлю, не касаясь ею стенок пробирки.13.Петлю с культурой вносят в каплю дистиллированной воды и осторожно эмульгируют, не заходя за границы мазка.14.Бактериальную петлю с остатками культуры прожигают до покраснения в пламени спиртовки.15.Прожигают горло пробирки пробку в пламени, одновременно. Закрывают пробирку.16.Пробирку с культурой и петлю ставят в штатив.17.Приготовленный мазок высушивают либо на воздухе либо высоко над пламенем спиртовки.

Билет

Споры бактерий представляют собой бактериальные клетки в состоянии анабиоза и образуются при неблагоприятных условиях внешней среды. В процессе спорообразования клетка почти полностью теряет воду, сморщивается, клеточная стенка уплотняется, появляется новое вещество -дипиколинат кальция, которое образует комплексы с биополимерами клетки, устойчивые к действию температуры и ультрафиолетовых лучей. В окружающей среде споры бактерий могут сохраняться годами, но при попадании в благоприятные условия спора впитывает влагу, комплексы распадаются, дипиколинат разрушается, и спора превращается в вегетативную клетку. Таким образом, спору следует рассматривать не как способ размножения (как это имеет место у грибов), а только как форму существования бактериальной клетки в неблагоприятных условиях. Спорообразование характерно в основном для грамположительных бактерий. У грамотрицательных бактерий эквивалентом спорообразования является переход в так называемое некультивируемое состояние. В такой форме они также длительно сохраняются в окружающей среде.При использовании окраски по Граму споры красители не воспринимают, поэтому на окрашенном фоне они бесцветны. Окрашиваются споры с помощью специальных методов окраски, например, по Ожешко или Клейну.

Капсула бактерий - это утолщенный наружный слой клеточной стенки. Капсулы могут быть построены из полисахаридов или белков. Большинство бактерий, особенно патогенных, образует капсулу только в организме человека или животных. Однако существует род истинно капсульных бактерий (Klebsiella), представители которого образуют капсулу и при культивировании на искусственных питательных средах. Некоторые бактерии могут иметь микрокапсулу или неявно выраженную способность к капсулообразованию. Основное предназначение капсул - защита бактерий от фагоцитоза.При окраске мазков по Граму истинно капсульные бактерии имеют характерное взаиморасположение. При световой микроскопии капсулы четко не видны, наличие капсул у бактерий выявляется с помощью специальных методов окраски, например, по методу Гинса.

Инфекция – сложный комплекс взаимодействия возбудителя и макроорганизма в определенных условиях внешней и социальной среды, включающий динамически развивающиеся патологические, защитно-приспособительные, компенсаторные реакции (объединяющиеся под названием «инфекционный процесс»). Инфекционные болезни – обширная группа заболеваний человека, вызванных патогенными вирусами, бактериями (в том числе риккетсиями и хламидиями) и простейшими.

Сущность инфекционных болезней состоит в том, что они развиваются вследствие взаимодействия двух самостоятельных биосистем – макроорганизма и микроорганизма, каждый из которых обладает собственной биологической активностью.носительство инфекции (паразите-, бактерио-, вирусоносительство). Современное представление о носительстве состоит в том, что оно рассматривается как инфекционный процесс, протекающий бессимптомно, на субклиническом уровне либо в острой, либо в хронической форме. Установлены значительная склонность к формированию носительства возбудителей при одних инфекциях и отсутствие этой формы инфекционного процесса при других.

Иммуноферментный анализ или метод — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.ИФА применяютдля диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В, а также определения гормонов, ферментов, лек преп и других БАВ.

Колонии-видимые невооруженным глазом скопления клеток или мицелия, образуемые в процессе роста иразмножениямикроорганизмов на (или в) плотном питательном субстрате. Различаются у разных организмов по величине, характеру поверхности, консистенции, окраске, что, в свою очередь, зависит от размеров клеток, наличия жгутиков, спор, капсулы.В естественных условиях К. возникают на поверхности пищевых продуктов, на почве, гниющих остатках растений и т. п. В лаб. условиях К. получают при посеве микроорганизмов на агаризованные и др. твердые питательные среды.Характеристика К. учитывается при определении вида микроорганиз.

Билет

Многие бактерии имеют жгутики. Их количество и расположение у разных бактерий неодинаково. Монотрихи имеют только один жгутик, лофотрихи - пучок жгутиков на одном полюсе клетки, у амфитрихов жгутики (один или пучок) расположены на обоих полюсах клетки, а у перитрихов - по всей поверхности.По своему строению жгутики представляют собой спирально закрученные нити, состоящие из специфического белка флагеллина, который по своей структуре относится к сократительным белкам типа миозина. При окраске по Граму жгутики не видны. Изучать подвижность бактерий можно как с помощью микроскопических методов, так и посевом уколом в полужидкий агар, или специальную среду – среду Пешкова. На поверхности ряда бактерий обнаружены белковые образования - ворсинки (фимбрии, пили). Различают более 60 типов ворсинок, из которых наиболее изучены F-pili и common pili.

2)Это микроорганизм-возбудитель, восприимчивый макроорганизм, внешняя среда, в которой они взаимодействуют.Для возникновения и развития инфекционного заболевания большое значение имеют: инфицирующая доза и входные ворота инфекции Патогенность — видовой признак, передающийся по наследству, закрепленный в геноме микроорганизма, в процессе эволюции паразита. Фенотипическим признаком патогенного микроорганизма является его вирулентность. Вирулентность можно повышать, понижать, измерять, т.е. она является мерой патогенности. Количественные показатели вирулентности могут быть выражены в DLM (минимальная летальная доза), DL50 (доза, вызывающая гибель 50 % экспериментальных животных) Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей колонизацией Инвазия. Под инвазивностью понимают способность микробов проникать через слизистые, кожу, соединительно-тканные барьеры во внутреннюю среду организма и распространятся по его тканям и органам. Агрессия. Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным факторам макроорганизма. К факторам агрессии относятся: протеазы, коагулаза, фибринолизин,лецитиназа. По признаку патогенности все виды- микробов можно разделить на 3 группы:1) безусловнопатогенные (патогенные), которые всегда вызывают инфекцию;2) потенциально-патогенные, вызывающие инфекцию при определенных условиях: ослаблении организма, массивном заражении и др.;3) непатогенные (безвредные).

3)ИММУНОИНДИКАЦИЯ - использование реакций иммунитета для обнаружения антигенов вируса в исследуемом материале. Иммуноферментный анализ (ИФА) – современное лабораторное исследование, в ходе которого ведется поиск специфических антител в крови либо антигенов к конкретным заболеваниям с целью выявления не только этиологии, но и стадии болезни. Результаты ИФА могут выдаваться качественно и количественно. В настоящее время ИФА применяется в следующих ситуациях: 1) Поиск специфических антител к любому инфекционному заболеванию; 2) поиск антигенов каких-либо заболеваний (инфекционных, венерологических); 3) исследование гормонального статуса пациента; 4) обследование на онкомаркеры; 5) обследование на предмет наличия аутоиммунных заболеваний. Преимущества метода ИФА 1) Высокая специфичность и чувствительность метода ИФА (более 90%). 2) Возможность определения заболевания и отслеживания динамики процесса, то есть сравнивание количества антител в разных временных промежутках. 3) Доступность ИФА-диагностики в любом медицинском учреждении.

Правила работы с иммерсионной системой:1. установить микроскоп на малое увеличение;2. навести максимальную освещенность (зеркало, конденсор, диафрагма);3. установить препарат на столик;4.нанести каплю масла на препарат;5.установить иммерсионный объектив;6.опустить объектив в каплю масла при помощи макровинта;7.наблюдая в окуляр вращать макровинт до появления изображения;8.микровинтом установить более четкое изображение;9. провести микроскопию мазка с описанием морфологических свойств;10. поднять тубус вверх, снять препарат и очистить объектив от масла;11.установить микроскоп в нейтральное положение (малое увеличение, тубус вниз)

Билет

Питательной средой -называют среды, содержащие различные соединения сложного или простого состава, которые применяются для размножения бактерий или других микроорганизмов в лабораторных или промышленных условиях. Питательные среды готовят из продуктов животного или растительного происхождения. Большое значение имеет наличие в питательной среде ростовых факторов, которые катализируют метаболические процессы микробной клетки. Искусственные среды готовят по определенным рецептам из различных настоев или отваров животного или растительного происхождения с добавлением неорганических солей, углеводов и азотистых веществ. В бактериологической практике чаще всего используют сухие питательные среды, которые получают на основе достижений современной биотехнологии. Для их приготовления используют экономически рентабельное непищевое сырье: утратившие срок годности кровезаменители (гидролизин); продукты биотехнологии (кормовые дрожжи, и др).

По консистенции питательные среды могут быть жидкими, полужидкими, плотными. Плотные среды готовят путем добавления к жидкой среде 1,5—2% агара, полужидкие — 0,3— 0,7 % агара. Агар представляет собой продукт переработки особого вида морских водорослей. В некоторых случаях для получения плотных питательных сред используют желатин. Ряд естественных питательных сред (свернутая сыворотка крови, свернутый яичный белок) сами по себе являются плотными. По целевому назначению среды подразделяют на основные, элективные и дифференциально-диагностические. К основным относятся среды, применяемые для выращивания многих бактерий. Это триптические гидролизаты мясных, рыбных продуктов, крови животных или казеина, из которых готовят жидкую среду — питательный бульон и плотную — питательный агар. Такие среды служат основой для приготовления сложных питательных сред — сахарных, кровяных и др., удовлетворяющих пищевые потребности патогенных бактерий. Элективные питательные среды предназначены для избирательного выделения и накопления микроорганизмов определенного вида из материалов, содержащих разнообразную постороннюю микрофлору. При создании элективных питательных сред исходят из биологических особенностей, которые отличают данные микроорганизмы от большинства других.Дифференциально-диагностические питательные среды применяются для разграничения отдельных видов микроорганизмов. Требования, предъявляемые к питательным средам. Любая питательная среда должна отвечать следующим требованиям: содержать все необходимые для размножения микроорганизмов вещества в легкоусвояемой форме; иметь оптимальные влажность, вязкость, рН, быть изотоничной и по возможности прозрачной. Каждую питательную среду стерилизуют определенным способом в зависимости от ее состава.

2)Неспецифическая микробная резистентность — это врожденное свойство макриорганизма, обеспечивается передаваемыми по наследству достаточно многочисленными механизмами, которые делятся на следующие типы:тканевые;гуморальные;выделительные. Первым барьером на пути проникновения микробов во внутреннюю среду организма являются кожа и слизистые оболочки.Здоровая неповрежденная кожа и слизистые для большинства микроорганизмов непроницаемы. Помимо чисто механической функции, кожа и слизистые оболочки обладают антимикробным действием — нанесенные на кожу бактерии довольно быстро погибают. Бактерииидность кожи и слизистых оболочек обеспечивают:ее нормальная микрофлора;секреты желез;лизоцим слюны, слезной жидкости Если возбудитель преодолевает кожно-слизистый барьер, то он попадает в подкожную клетчатку/подслизистый слой, где реализуется один из основных неспецифических тканевых механизмов защиты — воспаление. Инфекционный иммунитет– это способ защиты организма от микроорганизмов и их токсинов. По своей направленности инфекционный иммунитет может быть:а) антибактериальным;б) антитоксическим;в) противовирусным;г) противогрибковым;д) антипротозойным. Есть:• врожденный (видовой) иммунитет, он обнаруживается уже при рождении. Этот вид иммунитета генетически детерминирован у человека, передается по наследству.-приобретенный иммунитет – это иммунитет, приобретаемый в течение жизни данного индивидуума. Различают естественный и искусственный приобретенный иммунитет. И тот, и другой могут быть активным или пассивным:

естественный активный иммунитет возникает после перенесенной инфекции, а естественный пассивный - это иммунитет, который обеспечивается за счет антител, передаваемых от матери к плоду или ребенку через плаценту или с грудным молоком;

Искусственный активный иммунитет возникает после введения вакцин или анатоксинов, на которые организм вырабатывает иммунитет. Искусственный пассивный иммунитет возникает после введения извне готовых антител или клеток-эффекторов.

Иммунитет может быть стерильным, когда организм свободен от соответствующего возбудителя, и нестерильным, при котором возбудитель соответствующего заболевания сохраняется в организме, и только при этом условии поддерживается иммунитет.

3)Вирус — неклеточный инфекционный агент, который может воспроизводиться только внутри живых клеток.Отличие вирусов от других клеток:1.Не клеточная организация. 2.Содержит 1 тип нуклеиновой кислоты- ДНК или РНК. 3.Вирусы не обладают белковой и энергосинтезирующей системами. 4. Вирусы обладают способностью к репродукции 5.Внутриклеточный паразитизм 6. Способны проходить через бактериальное сито 7.Не способны накапливаться на искусственных питательных средахВирусы существуют в двух формах : внутриклеточной и внеклеточной (вирион).Принцип строения всех вирионов одинаков: в центре располагается нуклеиновая кислота, покрытая белковым чехлом – капсидом, который состоит из простых белков – капсомеров, которыне обладают способностью к самосборке. Наиболее просто устроенные вирусы представлены только нуклеокапсидом – нуклеиновая кислота + капсид. У некоторых вирусов есть суперкапсидная оболочка. Функции:-содержит на поверхности структуры, которые обеспечивают контакт вириона с клеткой.-защитная.Тип симметрии нуклеокапсида – это пространственная организация белков суперкапсидной оболочки:- спиральный тип, - кубический - смешанный, характерен для фагов.

Сахаролитические свойства микроорганизмов. Свойство расщеплять углеводы и высокоатомные спирты, которые принято объединять в одну группу, именуемую сахарами, присуще многим патогенным микробам. Под действием сахаролитических ферментов бактерий сахара расщепляются на альдегиды и кислоты. Конечными продуктами их расщепления являются газообразные вещества: СO2и Н2.Среды Гиса представляют собой среды (МПА или МПБ) с углеводами или многоатомными спиртами. В качестве индикатора используют предварительно обесцвеченный фуксин. При разложении углеводов индикатор становится красным, и среда приобретает красный цвет. Некоторые микроорг. разлогают углеводы не только с образованием кислоты, но и с образованием СО2. Тогда в толще МПА появляются следы разрывов. При использовании жидких сред Гиса, в них помещают стеклянный поплавок, который при заполнении газом всплывёт на поверхность среды. При отсутствии ферментации цвет среды не меняется.

Билет

1)Стерилиза́ция — освобождение какого-либо предмета или материала от всех видов микроорганизмов (включая бактерии и их споры, грибы, вирусы и прионы), либо их уничтожение. Осуществляется термическим, химическим, радиационным, фильтрационным методами. Методы стерилизации: •Термическая: паровая и воздушная (сухожаровая) •Химическая: газовая или химическими растворами (стерилянтами)•Плазменная (плазмой перекиси водорода) •Радиационная стерилизация — применяется в промышленном варианте •Метод мембранных фильтров — применяется для получения небольшого количества стерильных растворов, качество которых может резко ухудшиться при действии других методов стерилизации(бактериофаг, селективные питательные среды, антибиотики)

Термические методы стерилизации. Преимущества термических методов стерилизации:•Надёжность •Отсутствие необходимости удаления стерилянтов с предметов медицинского назначения •Удобство работы персонала •Стерилизация проводится в упаковках, что позволяет сохранить стерильность некоторый период времени. Паровая стерилизация-Осуществляется подачей насыщенного водяного пара под давлением в паровых стерилизаторах (автоклавах). Химические методы стерилизацииИспользуются при обработке приборов, аппаратов, сложных оптических систем, крупногабаритных изделий или изделий из титана, полимерных смол, резин.Стерилизация ионизирующим излучением- радиационный метод или лучевую стерилизацию γ-лучами применяют в специальных установках при промышленной стерилизации однократного применения — полимерных шприцев, систем переливания крови, чашек Петри, пипеток и других хрупких и термолабильных изделий. Тиндализация - метод дробной стерилизации при температуре ниже 100С. Она используются для стерилизации объектов,которые не выдерживают 100С:сыворотка, асцитическая жидкость, витамины. Пастеризация-частичная стерилизация (споры не погибают), которая проводится при относительно низкой температуреоднократно.

Иммунитет - это комплексная реакция организма, направленная на его защиту от внедрения чужеродного материала. Есть специфический и неспецифический (врожденный) иммунитет. Неспецифический (врожденный) иммунитет обуславливает однотипные реакции на любые чужеродные антигены. Главным клеточным компонентом системы неспецифического иммунитета служат фагоциты. Для возникновения подобной реакции чужеродный агент должен быть частицей. Если же вещество молекулярно-дисперсное, и при этом не токсичное и не обладает физиологической активностьюВ этом случае реакцию обеспечивает специфический иммунитет. Он приобретается в результате контакта организма с антигеном; имеет приспособительное значение и характеризуется формированием иммунологической памяти. Его клеточными носителями служат лимфоциты, а растворимыми – иммуноглобулины. Первичный и вторичный иммунный ответ. Специфические антитела продуцируются специальными клетками - лимфоцитами. Первое взаимодействие антигена с лимфоцитом вызывает реакцию, названную первичным иммунным ответом, в ходе которого лимфоциты начинают развиваться в виде клонов, претерпевая затем дифференцировку. Главные особенности первичного иммунного ответа - существование латентного периода до появления антител, затем выработка их лишь в небольшом количестве.

Вторичный иммунный ответ развивается при последующем контакте с тем же самым антигеном. Основная особенность - быстрая пролиферация лимфоцитов с дифференцировкой их в зрелые клетки и быстрая выработка большого количества антител. Естественный и искусственный иммунитет. К факторам естественного иммунитета относят иммунные и неиммунные механизмы. К первым относятся гуморальные. Ко вторым относятся барьеры, секрет желез, нормальная микрофлора. Искусственный иммунитет вырабатывает при введении в организм вакцины или иммуноглобулина.Активный и пассивный иммунитет. Активная иммунизация стимулирует собственный иммунитет человека, вызывая выработку собственных антител. Вырабатывается у человека в ответ на возбудитель. Активный иммунитет может быть естественным и искусственным. Естественный - приобретается в результате перенесенного заболевания. Искусственный - вырабатывается при введении вакцин. Пассивный иммунитет: в организм вводятся уже готовые антитела (гамма-глобулин). Стерильный и нестерильный иммунитет.

После заболевания в некоторых случаях иммунитет сохраняется пожизненно. Это стерильный иммунитет. А в некоторых случаях иммунитет сохраняется только до тех пор, пока в организме есть возбудитель - нестерильный иммунитет.

Взаимодействие вируса с клеткой - это сложный процесс, результаты которого могут быть различны.По этому признаку можно выделить 4 типа взаимодействия вирусов и клеток. 1.Продуктивная вирусная инфекция. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором происходит репродукция вирусов, а клетка погибает.Продуктивная инфекция лежит в основе острых вирусных заболеваний, а также в основе условных латентных инфекций2.Абортивная вирусная инфекция. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором репродукции вирусов не происходит, а клетка, избавляется от вируса, функции ее при этом не нарушаются. 3.Латентная вирусная инфекция. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором происходит репродукция вирусов, но клетка не погибает, а сохраняет свою жизнеспособность. 4.Вирус-индуцированные трансформации. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором клетки, пораженные вирусом, приобретают новые, ранее не присущие им свойства. Продуктивная вирусная инфекция осуществляется в три периода: начальный, средний и заключительный. Начальный период включает стадии адсорбции вируса на клетке, проникновения в клетку, дезинтеграции (депротеинизации) или “раздевания” вируса.Вирусная нуклеиновая кислота была доставлена в соответствующие клеточные структуры и под действием лизосомальных ферментов клетки освобождается от защитных белковых оболочек.

В итоге формируется уникальная биологическая структура. Инфицированная клетка содержит два генома и один синтетический аппарат. После этого начинается вторая группа процессов репродукции вируса, включающая средний и заключительный период, во время которых происходят репрессия клеточного и экспрессия вирусного генома.Репрессию клеточного генома обеспечивают низкомолекулярные регуляторные белки типа гистонов, синтезируемые в любой клетке.

Приготовление фиксированных препаратов-мазков. Для приготовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую петлей вносят исследуемый материал и распределяют его таким образом, чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром около 1—1,5 см, только при таком распределении материала в мазке можно увидеть изолированные бактериальные клетки. Если исследуемый материал содержится в жидкой среде, то петлей его непосредственно наносят на предметное стекло и готовят мазок. Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки. Для фиксации мазка предметное стекло (мазком вверх) медленно проводят 3 раза (в течение 3 с) через пламя горелки. Микроорганизмы при фиксации погибают, плотно прикрепляясь к поверхности стекла, и не смываются при дальнейшей обработке. Более длительное нагревание может вызвать деформацию клеточных структур.

Билет

Вид — это совокупность особей, объединенных по близким свойствам, но отличающихся от других представителей рода. Чистая культура микроорганизмов, выделенных из определенного источника и отличающихся от других представителей вида, называется штаммом. Совокупность однородных микроорганизмов, выделенных на питательной среде, характеризующихся сходными морфологическими, тинкториальными, культуральными, биохимическими и антигенными свойствами, называется чистой культурой. Для выделения чистых культур микробов из материалов, содержащих обильную смешанную микрофлору, предложено много различных методов. Наибольшее распространение получил метод механического разъединения микроорганизмов, находящихся в исследуемом материале, с целью получения изолированных колоний на поверхности или в глубине питательной среды. Очень широко применяются элективные питательные среды, стимулирующие развитие тех микроорганизмов, чистую культуру которых предполагается выделить. Некоторые виды микробов обладают высокой чувствительностью к воздействию определенных факторов внешней среды. Индивидуальная устойчивость микробов к тому или иному фактору - была использована для разработки методов выделения чистых культур путем умерщвления сопутствующей микрофлоры.  Прибегают иногда к заражению лабораторных животных, восприимчивых к тому виду микроба, который предполагается выделить из исследуемого материала. Биологический метод выделения чистой культуры применяется при исследовании мокроты на содержание в ней пневмококков, микобактерий туберкулеза. Получение чистой культуры методом рассева в глубине среды (по Коху). Выделение чистой культуры по способу Дригальского. Метод рассева по поверхности, предложенный Дригальским, является наиболее употребительным для получения чистой культуры микробов.

2)Антигенами называются вещества или тела, несущие на себе отпечаток чужеродной генетической информации. Антигены обладают 2 свойствами:• антигенностью, или антигенным действием • специфичностью, или антигенной функцией. Химическая природа антигенов различна. Это могут быть белки:• полипептиды;• нуклеопротеиды;• липопротеиды;• гликопротеиды; и т.д.. 2. Антигены делят на следующие:• сильные, которые вызывают выраженный иммунный ответ;• слабые, при введении которых интенсивность иммунного ответа невелика. Сильные антигены, как правило, имеют белковую структуру.Некоторые (обычно небелковые) антигены не способны индуцировать развитие иммунного ответа, но могут вступать во взаимодействие с продуктами иммунного ответа. Их называют неполноценными антигенами, или гаптенами. Для того чтобы какое-либо вещество проявляло свойства антигена, кроме главного — чужеродное, оно должно обладать еще целым рядом признаков:• макромолекулярностью (молекулярная масса более 10 тыс. дальтон);• сложностью строения;• жесткостью структуры;• растворимостью;• способностью переходить в коллоидное состояние.Молекула любого антигена состоит из 2 функиионально различных частей: • 1-я часть — детерминантная группа, на долю которой приходится 2—3% поверхности молекулы антигена. Она определяет чужеродность антигена • 2-я часть молекулы антигена называется проводниковой, при ее отделении от детерминантной группы она не проявляет антигенного действия, но сохраняет способность реагировать с гомологичными антителами.

Антитела – это белки, которые синтезируются под влиянием антигена и специфически с ним реагируют. В молекуле иммуноглобулина четыре структуры:1) первичную – это последовательность определенных аминокислот;2) вторичную (определяетсяконформацией полипептидных цепей);3) третичную (определяет характер расположения отдельных участков цепи, создающих пространственную картину);4) четвертичную. Из четырех полипептидных цепей возникает биологически активный комплекс.Большинство молекул иммуноглобулинов составлено из двух тяжелых (H) цепей и двух легких (L) цепей, соединенных дисульфидными связями.  Тяжелые цепи могут быть одного из пяти классов (IgA, IgG, IgM, IgD и IgE).Каждая цепь имеет два участка:1) постоянный;2) вариабельныйПри энзиматическом расщеплении иммуноглобулинов образуются следующие фрагменты: 1) Fc-фрагмент содержит участки обеих постоянных частей; 2) Fab-фрагмент содержит легкую и часть тяжелой цепи с одним антигенсвязывающим участком; обладает свойством антитела; 3) F(ab)Т2-фрагмент состоит из двух связанных между собой Fab-фрагментов. Существует пять классов иммуноглобулинов у человека.1. Иммуноглобулины G. Свойства иммуноглобулинов G:1) Главная роль в гуморальном иммунитете;2) формируют антиинфекционный иммунитет у новорожденных;3) способны нейтрализовать бактериальные экзотоксины.2. Иммуноглобулины М3. Иммуноглобулины А – это секреторные иммуноглобулины4. Иммуноглобулины Е. К этому классу относится основная масса аллергических антител – реагинов5. Иммуноглобулины D – это мономеры.

У ДНК-содержащих вирусов, как в прокариотических, так и в эукариотических клетках, репликация вирусной ДНК происходит при участии клеточной ДНК-зависимой ДНК-полимеразы. При этом у однонитевых ДНК-содержащих вирусов сначала образуется комплементарная нить,  так называемая репликативная форма, которая служит матрицей для дочерних молекул ДНК. При участии ДНК-зависимой РНК-полимеразы синтезируются и-РНК, которые поступают на рибосомы клетки, где и синтезируются вирусспецифические белки. У двунитевых ДНК-содержащих вирусов, геном которых транскрибируется в цитоплазме клетки хозяин. Вирусы, геномы которых транскрибируются в ядре клетки, используют содержащуюся там клеточную ДНК-зависимую РНК-полимеразу. Репликация вирусных РНК, как минус, так и плюс-нитей, осуществляется через репликативную форму РНК (комплементарную исходной), синтез которой обеспечивает РНК-зависимая РНК-полимераза. Репликативная форма РНК минус-нитевых вирусов (плюс нить) служит не только матрицей для синтеза дочерних молекул вирусной РНК (минус нитей), но и выполняет функции и-РНК. У плюс-нитевых РНК-содержащих вирусов функцию трансляции выполняют ее копии, синтез которых осуществляется через репликативную форму (минус нить) при участии вирусных РНК-зависимых РНК-полимераз. У некоторых РНК-содержащих вирусов имеется совершенно уникальный механизм транскрипции. Он обеспечивается специфическим вирусным ферментом - ревертазой (обратной транскриптазой), и называется обратной транскрипцией. Суть ее состоит в том, что в начале на матрице вирусной РНК при участии обратной транскриптазы образуется транскрипт, представляющий собой одну нить ДНК. На нем с помощью клеточной ДНК-зависимой ДНК-полимеразы синтезируется вторая нить и формируется двунитевой ДНК-транскрипт. С него обычным путем через образование и-РНК происходит реализация информации вирусного генома. Результатом описанных процессов репликации, транскрипции и трансляции является образование дочерних молекул вирусной нуклеиновой кислоты и вирусных белков, закодированных в геноме вируса. После этого наступает третий, заключительный период взаимодействия вируса и клетки. Из структурных компонентов на мембранах цитоплазматического ретикулюма клетки собираются новые вирионы. Вновь сформировавшиеся вирионы пассивно или активно покидают клетку и оказываются в окружающей ее среде. Таким образом, синтез вирусных нуклеиновых кислот и белков и сборка новых вирионов происходят в определенной последовательности и в разных структурах клетки в связи с чем способ репродукции вирусов и был назван дисъюнктивным.

Дисбиозы – это микроэкологические нарушения, которые выражаются в нарушениях состава и функций нормальной микрофлоры. Состояние здоровья человека во многом определяется его микрофлорой. Именно поэтому современные стоматологи уделяют такое внимание проблеме дисбиоза и дисбактериоза полости рта. В полости рта и глотке человека встречается более 300 видов микробов. Микрофлора полости рта подразделяется на облигатную и факультативную (транзиторную). К облигатной флоре относятся стрептококки, сапрофитные нейссерии, непатогенные стафилококки, лептотрихии, вейлонеллы, бактероиды, коринебактерии, лактобациллы, фузиформные бактерии, дрожжеподобные грибы рода ? Candida, актиномицеты, микоплазмы, простейшие. Среди транзиторных микроорганизмов чаще всего встречаются энтеробактерии, синегнойная палочка, спорообразующие бактерии, микроорганизмы рода Campylobacter. 

Билет

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ - совокупность методов, применяемых для обнаружения и установления природы бактерий, выделенных от больных, бактерионосителей или из объектов окружающей среды. Б.и. проводят с диагностической целью при инф. болезнях, а также при обследовании на бактерионосительство и определении сан.-гиг. состояния объектов окружающей среды. Выбор материала для Б.и. определяется целью исследования, биологическими свойствами микробов, условиями обитания их в исследуемом объекте, патогенезом заболевания. У больного материал для исследования рекомендуется брать до начала лечения химиотерапевтическими препаратами. Исследуемый материал собирают в стерильную посуду, соблюдая правила асептики, и в возможно короткие сроки доставляют в бактериологическую лабораторию. Транспортировку инф. материала производят в закрытой посуде. Доставленный в лабораторию материал необходимо как можно быстрее исследовать. Б.и. материала начинаются с его бактериоскопии. Исследование под микроскопом окрашенных мазков позволяет в нек-рых случаях идентифицировать возбудителя заболевания.

Основным методом Б.и. является бактериологический метод, к-рый заключается в выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации. Под идентификацией микроорганизмов подразумевают изучение их свойств с целью установления принадлежности к той или иной систематической группе.

У микроорганизмов различают общие, или групповые, и специфические, или типовые, антигены. Групповые антигены являются общими для двух или более видов микробов, входящих в один род, а иногда относящихся и к разным родам. Специфические антигены имеются только у данного вида микроба или даже только у определенного типа либо подтипа внутри вида. Определение специфических антигенов позволяет дифференцировать микробы внутри рода, вида, подвида и даже типа. По локализации антигенов в микробной клетке различают соматические антигены, связанные с телом микробной клетки, капсульные — поверхностные, или оболочечные антигены и жгутиковые антигены, находящиеся в жгутиках.

•Соматические, О-антигены, связаны с телом микробной клетки. Он высоко токсичен и является эндотоксином этих бактерий. • Жгутиковые, Н-антигены имеют белковую природу и находятся в жгутиках подвижных микробов. •Капсульные, К - антигены, - расположены на поверхности микробной клетки и называются еще поверхностными, или оболочечными. • Протективный или защитный, является частью экзотоксина, выделяемого микробом сибирской язвы, и способен вызывать выработку иммунитета •Полноценные антигены вызывают в организме синтез антител или сенсибилизацию лимфоцитов и вступают с ними в реакцию как in vivo, так и in vitro. Для полноценных антигенов характерна строгая специфичность, т. е. вызывают в организме выработку только специфических антител• Неполноценные антигены (гаптены) представляют собой сложные углеводы, липиды и другие вещества, не способные вызывать образование антител, но вступающие с ними в специфическую реакцию.

Для культивирования вирусов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чувствительных лабораторных животных.-Культуры клеток готовят из тканей животных или человека. Культуры подразделяют на первичные.полуперевиваемые и перевиваемые. Приготовление первичной культуры клеток складывается из нескольких последовательных этапов: измельчения ткани, разъединения клеток путем трипсинизации, отмывания полученной однородной суспензии с последующим суспендированием клеток в питательной среде. Перевиваемые однослойные культуры клеток приготовляют из злокачественных и нормальных линий клеток, обладающих способностью длительно размножаться in vitro в определенных условиях. К полуперевиваемым культурам относятся диплоидные клетки человека. Характер ЦПД вирусов используют как для их обнаружения (индикации), так и для ориентировочной идентификации. Один из методов индикации вирусов основан на способности поверхности клеток, в которых они репродуцируются, адсорбировать эритроциты — реакция гемадсорбции. Другой метод — реакция гемагглютинации (РГ). Применяется для обнаружения вирусов в культуральной жидкости культуры клеток либо хорионаллантоисной или амниотической жидкости куриного эмбриона. Количество вирусных частиц определяют методом титрования по ЦПД в культуре клеток. Более точным количественным методом учета отдельных вирусных частиц является метод бляшек. Некоторые вирусы можно обнаружить и идентифицировать по включениям, которые они образуют в ядре или цитоплазме зараженных клеток.

Куриные эмбрионы. Куриные эмбрионы по сравнению с культурами клеток значительно реже бывают контаминированы вирусами и микоплазмами, а также обладают сравнительно высокой жизнеспособностью и устойчивостью к различным воздействиям. О репродукции некоторых вирусов можно судить по реакции гемагглютинации (РГА) с куриными или другими эритроцитами. Лабораторные животные. Видовая чувствительность животных к определенному вирусу и их возраст определяют репродуктивную способность вирусов. Преимущество данного метода перед другими состоит в возможности выделения тех вирусов, которые плохо репродуцируются в культуре или эмбрионе.

4)–

Билет

Для подтверждения диагноза инфекционных болезней в настоящее время широко пользуются лабораторными методами исследования, которые делятся на две группы: 1) методы прямого обнаружения возбудителя в организме больного — бактериоскопическое и бактериологическое исследование; 2) методы косвенного доказательства наличия возбудителя в организме больного — серологические и аллергические исследования.

Бактериоскопический и бактериологический методы исследования основаны непосредственно на работе с клетками прокариот, когда биологический анализ требуется для изучения влияния таких клеток на живой организм подопытных животных. По степени проявления тех или иных признаков заболевания ученый может сделать вывод о наличии или отсутствии патогенных бактерий в пробе, а также естественно их размножить в организме животного для получения их культуры и использования в других работах.Бактериологический метод исследования отличается от бактериоскопического. В первом для анализа используется специально подготовленная культура живых прокариот, когда во втором проводится работа с мертвыми или живыми клетками на предметном стекле. Серологические исследования — это методы изучения антигенов или антител в биологическом материале больных, основанные на определенных реакциях иммунитета. Обнаружение в биологическом материале антител к возбудителю инфекции или антигенов позволяет установить причину заболевания.

Грамотрицательные бактерии - представители семейства Enterobacteriaceae, в основном родов Proteus, Klebsiella, Escherichia, Enterobacter, но заболевания могут быть вызванными и другими условно-патогенными представителями семейства. Это семейство объединяет короткие грамотрицательные палочки, средней величины, расположенные беспорядочно, неспорообразующие, капсулообразование непостоянно. Одни бактерии подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, другие неподвижны. Факультативные анаэробы. Все энтеробактерии не требовательны к питательным средам, хорошо растут на простых питательных средах. Биохимическими тестами, общими для всего семейства, являются: наличие каталазы, способность к ферментации глюкозы до кислоты или до кислоты и газа, восстановление нитратов в нитриты, отсутствие цитохромоксидазы. Метаболизм у энтеробактерий может быть и окислительного, и ферментативного типа. Все энтеробактерии обладают соматическим, липосахаридным О-антигеном, некоторые еще и фимбриальным fi-антигеном, капсульным, поверхностным, белковым К-антигеном. Подвижные представители семейства -жгутиковым белковым H-антигеном.Основным методом диагностики является бактериологическое исследование.Материалом для исследования служит отделяемое пораженных слизистых оболочек.В последнее время используются методы иммуноиндикации.

3)Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используются различные методы.Вирусоскопическое исследование (световая микроскопия) позволяет обнаружить характерные вирусные включения, а электронная микроскопия - сами вирионы, и по особенностям их строения диагностировать соответствующую инфекцию Вирусологическое исследование направлено на выделение вируса и его идентификацию. Для выделения вирусов используют заражение лабораторных животных, куриных эмбрионов или культуры тканей.Первичную идентификацию выделенного вируса до уровня семейства можно провести с помощью определения типа нуклеиновой кислоты и особенностей ее Результаты оценивают заражая культуру ткани пробой, подвергнутой соответствующей обработке. Существенное значение для идентификации вирусов имеет изучение их антигенного строения, которое проводится в реакции вирусонейтрализации с соответствующими иммунными сыворотками. Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли методы иммунодиагностики (серодиагностики и иммуноиндикации). Они реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета - радиоизотопный иммунный анализ (РИА), иммуноферментный анализ (ИФА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция связывания комплемента (РСК), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), реакция торможения гемагглютинации (РТГА) и др.

При использовании методов серодиагностики обязательным является исследование парных сывороток. При этом четырехкратное нарастание титра антител во второй сыворотке в большинстве случаев служит показателем протекающей или свежеперенесенной инфекции.

Колонии микроорганизмоввидимые невооруженным глазом скопления клеток или разрастания мицелия одного вида микроорганизмов; образуютсяпри их размножении или росте на твердом субстрате; имеют вид плоских или выпуклых образований наповерхности плотной питательной среды. К.м. получают в лабораторных условиях посеве микроорганизмовна мясопептонный агар или другие среды. К.м. бывают крупные или мелкие, гладкие или складчатые,блестящие или матовые, с краями ровными, лопастными или др., сероватые или, при образовании пигментов,окрашенные в различные оттенки желтого, оранжевого, красного или др. цветов; колонии плесневых грибовпокрыты пушистым налетом. Характеристика колонии по форме, цвету и др. обычно входит в описание видамикроорганизма. В естественных условиях К. м. могут возникать на поверхности пищевых продуктов, в почве,грунте водоёмов и т.п.

Билет

Рост и размножение бактерий. Под ростом бактерий понимают увеличение массы клеток без изменения их числа в популяции как результат скоординированного воспроизведения всех клеточных компонентов и структур. Увеличение числа клеток в популяции микроорганизмов обозначают термином «размножение. Размножение большинства прокариотов идет путем бинарного деления, а актиномицетов - почкованием. При этом все прокариоты существуют в гаплоидном состоянии, поскольку молекула ДНК представлена в клетке в единственном числе.

При изучении процесса размножения бактерий необходимо учитывать, что бактерии всегда существуют в виде более или менее многочисленных популяций, и развитие бактериальной популяции в жидкой питательной среде в периодической культуре можно рассматривать как замкнутую систему. В этом процессе выделяют 4 фазы:

Я начальная, или лаг-фаза, или фаза задержки размножения. 2-я логарифмическая, или лог-фаза, или экспоненциальная фаза. 3-я стационарная фаза; она наступает тогда, когда число клеток в популяции перестает увеличиваться. 4-я фаза отмирания, которая характеризуется преобладанием в популяции числа погибших клеток и прогрессивным снижением числа жизнеспособных клеток популяции. Прекращение роста численности (размножения) популяции микроорганизмов наступает в связи с истощением питательной cреды и/или накоплением в ней продуктов метаболизма микробных клеток.

Возбудитель холеры относится к семейству Vibrionaceae, роду Vibrio, виду V.cholerae. Этот вид включает многочисленных представителейВнутри вида они отличаются по своим биохимическим, антигенным и патогенным свойствам. К патогенным представителям вида, вызывающим у человека холеру, относятся холерные вибрионы.Все другие холерные вибрионы являются условно-патогенными.

Холерный вибрион - грамотрицательная небольшая, изогнутая палочка, подвижная за счет полярного жгутика. Спор, капсул не образует. Аэроб или факультативный анаэроб.Холерные вибрионы не требовательны к питательным средам.Биохимическая активность холерного вибриона достаточно высока. Холерные вибрионы имеют О- и Н- антигены. Факторами патогенности холерных вибрионов является способность к колонизации и продукции ряда токсинов, в первую очередь, экзоэнтеротоксина - холерогена.Холера – антропонозная инфекция; ее источником является больной или бактерионоситель, путь передачи - фекально-оральный. Холера - это острая кишечная инфекция, которая характеризуется проявлениями своеобразного гастроэнтерита или энтерита, с ярко выраженной интоксикацией и большей или меньшей степенью обезвоженности организма в результате нарушения водно-солевого обмена. Клиника холеры. В клинике холеры различают 3 фазы :1-я фаза –энтерит 2-я фаза- гастроэнтерит. При нелеченной форме заболевание переходит в 3-ю -терминальную фазу, которая обозначается как холерный алгид.Основным методом микробиологической диагностики холеры является бактериологическое исследование, при этом материалом служат фекалии, рвотные массы или кусочки тонкого кишечника трупа. Особенностью бактериологического исследования является то, что посевы проводятся только на элективные питательные среды: 1%-ную пептонную воду и щелочной агар. Методы экспресс-диагностики холеры  иммуноиндикация - РИФ, ИФА.Для специфической профилактики применяют убитую холерную вакцину и комбинированную вакцину.

3)Семейство ортомиксовирусов – это РНК-содержащие вирусы со спиральным типом симметрии нуклеокапсида, имеющие суперкапсидную оболочку, содержащую липиды, в связи с чем они чувствительны к эфиру. Белки суперкапсидной оболочки имеют сродство к муцину.К этому семейству относится вирус гриппа. У него одноцепочечная фрагментированная РНК, состоящая из 8 фрагментов, что обуславливает дрейф генов и большую антигенную вариабельность вируса. Форма вириона вариабельна. Капсидная оболочка построена из простых белков, способных к самосборке. Антигены вируса гриппа. Глубокий антиген капсидной оболочки связан с белком рибонуклеопротеида и M-белком. По строению этого антигена различают вирус гриппа типа А, В и С. Грипп - это острая респираторная вирусная инфекция, имеющая тенденции к распространению в человеческой популяции в виде эпидемий с характерной сезонностью и даже пандемий.Вирус гриппа А поражает человека и некоторые виды животных Иммунитет переболевших вариантспецифический.Материалом для исследования чаще всего служит носоглоточный и бронхиальный смывы, иногда кровь. Могут быть использованы следующие методы: вирусологический из исследуемого материала вирус выделяют при заражении куриного эмбриона и культуры ткани почек эмбрионов человека с последующей идентификацией в РТГА и в РСК типов вируса гриппа; иммуноиндикация- антигены вируса обнаруживают в исследуемом материале  носоглоточном, бронхиальном смывах с помощью РТГА и ИФА или РИФ в мазках-отпечатках из эпителиальных клеток слизистой оболочки носоглотки;серологический- методом РТГА, РСК, ИФА определяют наличие инфекционных антител в парных сыворотках больного по нарастанию их титра. методы генетического анализа разработаны РНК-зонды, использование которых позволяет обнаружить нуклеотидные последовательности вируса в исследуемом материале. Этиотропная терапия гриппа.В терапии гриппа используют противовирусные средства этиотропной химиотерапии, а также препараты интерферона и иммунотерапии. Антибиотики используют только для профилактики бактериальных осложнений, т.к. сами вирусы не являются мишенями для действия этих химиопрепаратов.Иммунопрофилактика гриппа.Разработаны средства активной и пассивной иммунопрофилактики гриппа.Активная иммунопрофилактика проводится живыми, убитыми и химическими гриппозными вакцинами. Предпочтение отдают живым вакцинам. Пассивная иммунопрофилактика гриппа возможна в очагах инфекции. Для ее целей могут использовать противогриппозный гамма-глобулин, противогриппозную сыворотку.

4)-

Билет

Механизм питания бактерий

Бактериальные клетки не имеют специальных органов питания, т.е. являются голофитными. Поступление питательных веществ в микробную клетку может происходить:1) за счет осмоса и диффузии по градиенту концентрации без затрат энергии;2) за счет пассивного транспорта, который также осуществляется по градиенту концентрации с помощью белков-переносчиков, но без затрат клеткой энергии, и отличается от диффузии большей скоростью;3) за счет активного транспорта, который идет против градиента концентрации с затратой энергии и возможным частичным расщеплением субстрата, осуществляется белками-переносчиками или ферментами- пермеазами. По источникам углерода, необходимого для построения биополимеров, бактерии делятся на следующие группы.Автотрофы – микроорганизмы, которые используют как единственный источник углерода углекислый газ. Гетеротрофы – микроорганизмы, которые используют в качестве источника углерода разнообразные органические углеродсодержащие соединения.В зависимости от источника получения энергии микроорганизмы делятся на фототрофные, способные использовать солнечную энергию, и хемотрофные, получающие энергию за счет окислительно-восстановительных реакций.В дополнение к этой классификации в зависимости от природы доноров электронов микроорганизмы подразделяются на фототрофные литотрофы и, соответственно, хемотрофные литотрофы, т.е. использующие в качестве доноров электронов неорганические соединения, а также, соответственно, фото-, и хемо- органотрофы, использующие только органические соединения.

Возбудители кампилобактериоза относятся к семейству Campylobacteriaceae, роду Campylobacter. наибольшее значение в патологии человека имеют: C.coli, C.jejuni, C.fetus, C.laridis, C.concisus.Кампилобактеры имеют характерную s-образную форму с одним или более витком. Подвижные. Спор, капсул не образуют. Грамотрицательные. Микроаэрофилы.Кампилобактеры очень требовательны к питательным средам. Для их культивирования используют сердечно-мозговой или шоколадный агар. Антигенная структура кампилобактеров представлена соматическим О- и жгутиковым Н- антигеном.Среди факторов вирулентности кампилобактеров можно отметить выраженную инвазивную активность и способность к внутриклеточному размножению, а также эндотоксин и продукцию энтеротоксина.Кампилобактериоз относится к сапронозным инфекциям. Кампилобактеры широко распространены среди животных и птиц; средой их обитания является вода. Основными методами микробиологической диагностики кампилобактериозов являются методы иммуноиндикации и молекулярно-генетические методы.

3)Аденовирусы - это семейство ДНК-содержащих вирусов. ДНК - линейная двунитчатая, тип симметрии нуклеокапсида кубический.С молекулой ДНК связан геномный белок, инициирующий репликацию ДНК вируса, проникшего в чувствительную клетку.Суперкапсидной оболочки нет, они устойчивы к действию эфира. По внешнему виду вирион напоминает тутовые ягоды. У вируса есть гемагглютинин. Аденовирусы размножаются в культурах тканей почек эмбрионов человека. Вирус устойчив к действию физических и химических агентов, длительно сохраняется в окружающей среде при пониженных температурах.Источник инфекции - больные люди и вирусоносители, заражение от которых происходит воздушно-капельным путем при ОРВИ и возможен фекально-оральный путь передачи.Адсорбция аденовируса на мембранах чувствительных клеток происходит с помощью гемагглютинина. В клетку вирус проникает путем эндоцитоза. Вирус может проникать в кровь и поражать эндотелий сосудов.Для клиники аденовирусной инфекции характерно сочетанное поражение слизистых оболочек верхних дыхательных путей и лимфоидной ткани. В диагностике аденовирусных инфекций могут быть использованы вирусологическое, серологическое исследования, методы иммуноиндикации. При вирусологическом исследовании исследуемый материал определяется клинической формой инфекции. Исследуемым материалом заражают культуры тканей с последующей идентификацией вируса в РТГА.Для иммуноиндикации используют тот же исследуемый материал, что и при вирусологическом исследовании, с целью выявления вирусных антигенов в РТГА, РСК.При серологическом исследовании используют те же реакции, но для обнаружения инфекционных антител в парных сыворотках больного по нарастанию титра.

Протеолитические ферменты у бактерий изучают на средах с желатином, молоком, сывороткой, пептоном и на некоторых полиуглеводных средах (например, на среде Клиглера). Показателями глубокого расщепления белка является образование индола, аммиака, сероводорода.

Сероводород обнаруживают с помощью полоски фильтровальной бумаги, пропитанной раствором ацетата свинца, которую закрепляют между стенкой засеянной пробирки и пробкой (при взаимодействии сероводорода и ацетата свинца бумага чернеет в результате образования сульфида свинца), или на средах, в состав которых входят соли железа или свинца, которые при взаимодействии с сероводородом дают чёрное окрашивание самой среды или выросших колоний (среды Вильсона-Блера, Клиглера и т.д.).

Для обнаружения индола по способу Мореля узкие полоски фильтровальной бумаги, смоченные горячим насыщенным раствориром щавелевой кислоты и высушенные, помещают между стенкой пробирки с питательным агаром и пробкой. При выделении индола на 2-3-й день нижняя часть полоски бумаги приобретает розовый цвет. Другой, более чувствительный, метод обнаружения индола позволяет концентрировать индол на поверхности среды ксилолом или эфиром, а добавление раствора Ковача приводит к образованию красного кольца.


Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 359; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!