Дополнительная информация по теме
Цитогенетический метод (Кариотипирование)
Цитогенетический метод используют для изучения нормального кариотипа человека, а также при диагностике наследственных заболеваний, связанных с геномными и хромосомными мутациями.
Кроме того, этот метод применяют при исследовании мутагенного действия различных химических веществ, пестицидов, инсектицидов, лекарственных препаратов и др.
В период деления клеток на стадии метафазы хромосомы имеют более четкую структуру и доступны для изучения. Диплоидный набор человека состоит из 46 хромосом:
22 пар аутосом и одной пары половых хромосом. У женщины это две X хромосомы (кариотип: 46, ХХ), а у мужчин одна Х хромосома, а другая – Y (кариотип: 46, ХY).
Обычно исследуют лейкоциты периферической крови человека, которые помещают в специальную питательную среду, где они делятся. Затем готовят препараты и анализируют число и строение хромосом. Разработка специальных методов окраски значительно упростила распознавание всех хромосом человека, а в совокупности с генеалогическим методом и методами клеточной и генной инженерии дала возможность соотносить гены с конкретными участками хромосом. Комплексное применение этих методов лежит в основе составления карт хромосом человека.
Цитологический контроль необходим для диагностики хромосомных болезней, связанных с анеуплоидией и хромосомными мутациями. Наиболее часто встречаются болезнь Дауна(трисомия по 21-й хромосоме), синдром Клайнфелтера (47 XXY), синдром Шершевского — Тернера (45 ХО) и др. Потеря участка одной из гомологичных хромосом 21-й пары приводит к заболеванию крови — хроническому миелолейкозу.
|
|
|
При цитологических исследованиях интерфазных ядер соматических клеток можно обнаружить так называемое тельце Барри, или половой хроматин. Оказалось, что половой хроматин в норме есть у женщин и отсутствует у мужчин. Он представляет собой результат гетерохроматизации одной из двух Х-хромосом у женщин. Зная эту особенность, можно идентифицировать половую принадлежность и выявлять аномальное количество Х-хромосом.
Существует два основных типа исследования данным методом:
• изучение хромосом клеток крови пациентов и
• пренатальное кариотипирование, то есть исследование хромосом плода.
Известно много заболеваний, причина которых - нарушение количества и/или строения хромосом, например, нарушения менструального цикла, выкидыши, бесплодие, уродства, умственная отсталость, нарушения иммунитета и сердечной деятельности.
Существуют международные стандарты, рекомендующие исследование хромосом в следующих случаях:
1. наличие хромосомной патологии в семье или у родственников,
2. привычное невынашивание беременности,
3. возраст беременной женщины более 35 лет (1 случай из 30 родов - с генетической патологией)
4. оценка мутагенных воздействий (радиационных, химических и др.).
|
|
|
Пренатальная генетическая диагностика позволяет уверенно определять хромосомную патологию плода уже на ранних сроках беременности, а также определить пол будущего ребенка уже на самых ранних сроках беременности (до 12 недель), тогда как стандартное УЗИ такой точности не гарантирует и на поздних сроках.
Проведение кариотипирования, как правило, назначается врачами-генетиками в двух случаях:
1. для изучения кариотипа будущих родителей
2. пренатальное кариотипирование для исследования хромосом плода - один из видов пренатальной (дородовой) диагностики.
Показания для проведения цитогенетических исследований
Показания для цитогенетического исследования достаточно широкие, особенно при акушерско-гинекологической и детской патологии. Ниже приводится перечень (возможно, неполный) состояний, при которых для диагностики надо иметь результаты цитогенетического исследования у пациента (пробанда) и в случае необходимости у его родственников:
|
|
|
- Подозрение на хромосомную болезнь по клинической симптоматике (для подтверждения диагноза).
- Наличие у ребенка множественных врожденных пороков развития, не относящихся к генному синдрому.
- Многократные (более двух) спонтанные аборты, мертворождения или рождения детей с врожденными пороками развития.
- Нарушение репродуктивной функции неясного генеза у женщин и мужчин (первичная аменорея, бесплодный брак и др.).
- Существенная задержка умственного и физического развития у ребенка.
- Пренатальная диагностика (по возрасту, в связи с наличием транслокации у родителей, при рождении предыдущего ребенка с хромосомной болезнью).
- Подозрение на синдромы с хромосомной нестабильностью (учет хромосомных аберраций и сестринских хроматид).
- Лейкозы (для дифференциальной диагностики, оценки эффективности лечения и прогноза).
- Оценка мутагенных воздействий (радиационных, химических).
Медицинских ограничений для применения цитогенетических методов нет. Однако необходимо помнить, что эти методы трудоемкие, дорогие, их назначение наугад не оправдано (по принципу «если неясно, то давайте назначим»). Правильнее назначать цитогенетическое исследование по рекомендации врача-генетика после проведения медико-генетического консультирования.
|
|
|
Для исследования кариотипа человека достаточно получить образец периферической крови в количестве 1-2 мл. Цитогенетический анализ включает три основных этапа: 1) культивирование клеток; 2) окраску препарата; 3) микроскопический анализ препарата. Культивирование клеток проводится следующим образом. После забора образец крови помещают в питательную солевую среду с добавлением цельной сыворотки крупного рогатого скота и белка бобовых растений — фитогемагглютинина, стимулирующего процесс деления клеток.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 380; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!