Тест-система API для определения бх активности
Реакция Райта (серологический диагноз Бруцеллеза) – развернутая реакция агглютинации - дляопределения АТ к АГ и титра АТ. Диагностический титр- 1:200. Компоненты реакции: а).Исследуемая сыворотка 1:25 б).АГ- взвесь убитых бруцелл Берется сыворотка разводится в 1:50, 1:100, 1:200 и т.д. в каждой пробирке соответственно и затем в каждую вносится по 2 капли диагностикума. И в той пробирке, где есть агглютинация, значит там есть АТ и смотрим титр АТ (для того, чтобы определить стадийность заболевания). Реакция проводится как минимум 2 раза. 2.Реакция Видаля – развернутая реакция агглютинации для диагностики брюшного тифа на второй неделе и дизентерии. Говорить то же самое, что и р-я Райта.
Постановка реакции агглютинации на стекле для определения рода возбудителей кишечных инфекций
Компоненты: культура грам- палочковидных бактерий и поливолнетные сыворотки (эшерихиозная, салмонеллезная, шигеллезная). Мы не знаем, что за бактерия. На стекло наносится капля физ. раствора, в нем разводится культура, отдельно в пробирках находятся сыворотки, культура вносится в каждую из сывороток. Наличие осадка хлопьев в какой-либо из пробирок указывает на агглютинацию АТ и АГ и следовательно делается вывод о том, какой это возбудитель
Дифференциальная диагностика между видами стрептококков.
| NaCl 6,5 | Желчь | Инулин | |
| S.pyogenes | - | - | - |
| S.pneumoniae | - | - | + |
| S.fecalis | + | + | - |
Изначально NaCl – желтый, Желчь- желтая, Инулин-белый
|
|
|
Набор для постановки реакции кольцепреципитации (пипетка и белая колбочка) на примере Сибирской язвы.
Берутся 2 пробирки:
-контрольная- сыворотка без АТ
-опытная- сыворотка с АТ к исследуемому возможному АГ
Наклоняя пробирку под углом 45 градусов, наслаиваем по стенке АГ, в сыворотке без АТ- реакции не будет, в сыворотке, в которой есть АТ- образуется белесоватое кольцо преципитации.
Разновидность этой реакции- р-я преципитации в агаре для диагностики токсигенности возбудителя дифтерии. На чашке Петри на поверхность агара кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанной противодифтерийной антитоксической сывороткой-> на расстоянии 0,5 см от края полоски производят посев культуры->если культура токсигенна- токсин проникает в агар, взаимодействует с антитоксином и образует линии преципитации.
Транспортная среда чаще для анаэробов.
Имеет сужение для препятствия проникновения О2. Вскрывается пакет, вытаскивается пробка, берется тампоном исследуемый материал, погружается в шприц в эту среду и в течение суток доставляется в лабораторию.
Анаэростат – для культивирования анаэробов
|
|
|
Из него выкачивается О2, закачивается адаптивная газовая смесь. Это металлический цилиндр с герметичной крышкой, на которой имеется вакуумметр и 2 крана для присоединения к вакуумнасосу.
Метод Фортнера для совместного культивирования аэробов и анаэробов
Высокий столбик агара, среда Китта-Тороцци (3 пробирки)- для культивирования анаэробов (столбняк)
10.Штормовая реакция- (белая пробирка с помутнениями)культивирование возбудителя Газовой гангрены на молоке, микробы размножаются в пробирке с молоком в течение 3 часов с образованием ячеистого сгустка, который при добавлении лакмуса приобретает карсно-оранжевый цвет.
Реакция связывания комплемента (6 пробирок одинаковой, но в одной из них осадок)
-Тест система (известный антиген, сыворотка пациента (АТ-Х), Со (комплемент) лизирует антигены комплекса)
-Гемолитическая система ( АГ-эритроциты барана, гемолитическая сыворотка с АТ к эритроцитам барана, иммунный комплекс 100%)
§ Смешиваем компоненты 1ой системы
§ Примерно за 1 час Со израсходовался (у больного)
§ Добавляем второй иммунный комплекс, которому не с чем взаимодействовать, т.к. Со нет -> осадок эритроциты -> болен
§ Если Со не израсходован, то он видит второй иммунный комплекс -> действует на АГ, т.е. на эритроциты -> гемолиз -> лаковая кровь -> здоров
|
|
|
Короткий пестрый ряд Гисса для идентификации возбудителя по бх активности. (6 пробирок)
*2 пробирки МПБ для определения протеолитической активности, в эти пробирки помещаются индикаторные бумажки, которые помогают определить индол (покраснение бумажки при наличии эшерихии или шигеллы) и H2S (почернение бумажки при салмонелле).
*4 пробирки с глюкозой и лактозой (меняет цвет на синий при эшерихии, т.к. только она ферментирует лактозу) для определения бх активности
Индол- образуют эшерихии и шигеллы
H2S- образует салмонелла
Лактоза- ферментируют только эшерихии
Глюкоза- ферментирует все
Тест-система API для определения бх активности
В каждую луночку помещается субстрат+индикатор (чаще какой-либо углевод, подписано). В каждую лунку добавляется культура и по изменению цвета индикатора в каждой этой тупой лунке, делаем вывод о наличии ферментов.
Могут дать трубку энтеро-тест-состоит из отдельных ячеек, которую можно насквозь проткнуть петлей, которая накручивается на эту трубку. Эта петля раскручивается, вытаскивается, берется исследуемый материал и через все эти ячейки она пропускается, закручивается и также по изменению цвета индикатора делается вывод о наличии фермента.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 552; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!