Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию



Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:

1. Связи, поддерживающие структуры белка: дисульфидные, ионные, водородные, гидрофобные. Взаимосвязь структуры и функции.

2. Денатурация и ренатурация белков

ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В БИОХИМИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

Прежде чем приступить к самостоятельной работе в биохимической лаборатории необходимо знать обязательные правила техники безопасности, чтобы избежать несчастных случаев, возможных при работе с ядовитыми и горючими веществами, концентрированными кислотами и щелочами, биологическим материалом (возбудители инфекций):

1. Все работы в лаборатории проводятся в рабочей одежде (халате)

2. При пользовании реактивами обращать внимание на надписи на этикетке

3. Не пробовать на вкус или на ощупь неизвестные вещества, определять запах

4. Не производить смешивание веществ, результаты реакции между которыми вам неизвестны

5. Работу с сильно пахнущими и потенциально опасными веществами производить только в вытяжном шкафу, соблюдая осторожность

6. Пользоваться нагревательными приборами только с закрытой спиралью.

7. При возникновении пожара в лаборатории тушить его, используя песок и огнетушители (имеются в каждой лаборатории)

8. При работе использовать чистую и целую химическую посуду

9. При работе с пипеткой не насасывать реактивы ртом, а пользоваться резиновым баллоном (грушей) или дозатором

10. Дистиллированную воду добавлять с помощью капельной пипетки, бюретки или цилиндра.

11. После отмеривания реактива не класть использованную пипетку на стол, а опустить ее в штатив или в сосуд для промывания (раствор цитрата натрия)  после взятия крови во избежание тромбирования капилляра.

12. Биологические жидкости (моча, слюна) собираются в специально предназначенные для этого емкости

13. Если реактив попадает в рот или на кожу, промыть пораженное место водой, а затем нейтрализовать 3% раствором соды (в случае кислоты) или 3% раствором уксусной кислоты (в случае щелочи); необходимые для нейтрализации реактивы нужно получить у старшего лаборанта кафедры.

14. Если реактивы прольются на стол, нейтрализовать кислоту содой, а щелочь уксусной кислотой, а затем вымыть стол водой

15. Не принимать пищу во время лабораторной работы

16. При работе с приборами (ФЭК, центрифуга, термостат, рефрактометр и др.) предварительно ознакомьтесь с правилами эксплуатации и убедитесь, что электроприбор заземлен

17. После работы поставить все реактивы на место, вымыть посуду, руки.

18. Любая работа заканчивается протоколированием результатов исследований

 

Требования к оформлению протокола лабораторной работы

При оформлении протокола лабораторной работы в рабочую тетрадь вносятся следующие данные:            

     - название работы

     - принцип метода исследования

     - порядок выполнения работы (алгоритм исследования)

     - результаты проведенного анализа, расчеты

     - выводы

     - КДЗ (клинико-диагностическое значение исследования)

 

Ориентировочная основа деятельности студентов (ООД)                                                         для проведения лабораторной работы:

Работа № 1                      Очистка белковых растворов – диализ

Принцип метода. Диализ – это процесс разделения высокомолекулярных и низкомолекулярных веществ с помощью полупроницаемых мембран (коллодий, целлофан, пергамент, почечные фильтры капсулы Боумена - Шумлянского). Обладая большим диаметром и молекулярной массой, белковые молекулы не способны проникать через мелкие поры, в то время как низкомолекулярные вещества и ионы легко диффундируют через мембраны в окружающую среду.

Порядок выполнения работы: в целлофановый мешочек (диализатор) наливают на 1/3 объема раствор яичного белка, содержащий Nacl (диализируемая жидкость). Диализатор подвешивают на стеклянных палочках и погружают в стакан с дистиллированной водой (диализат). Через 1 час от начала диализа с небольшими порциями диализата и диализируемой жидкости, отобранными с помощью пипетки, проводят пробы на Nacl (хлориды) и белок.

Проба на хлориды: 10 капель исследуемой жидкости + 1 капля 10% раствора HNO3 +  1% раствора AgNO3         →   наблюдается образование белого творожистого осадка 

Проба на белок (биуретовая реакция)                                                                                                                   

10 капель исследуемой жидкости +  5 капель 10% раствора NaOH + 1 капля  1% раствора     CuSO4при наличии белка в растворе проба дает фиолетовое окрашивание, при отсутствии -  голубое

Отметить результаты на белок и хлориды с содержимым диализатора и наружной жидкостью. В выводе указать, почему белки не диффундируют через полупроницаемые мембраны.

Клинико-диагностическое значение. Особый вид диализа (гемодиализ) применяется в клинике для очистки крови с целью удаления из нее низкомолекулярных токсических веществ (аппарат «искусственная почка»)


Дата добавления: 2018-04-05; просмотров: 580; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!