Задание 1. Определение количества гемоглобина
Необходимые животные и оборудование на 1 рабочее место:
1. Кролик с постгеморрагической анемией (постгеморрагическую анемию у кролика вызывают за 4 -- 5 дней до занятия кровопусканием из бедренной артерии) в количестве 2% от массы тела.
2. Кролик с гемолитической анемией (гемолитическую анемию у кролика вызывают подкожным введением за 5-6 дней до занятия 2,5% раствора фенилгидразина солянокислого в количестве 0,6 мл на кг массы в течение 3 дней)
3. Гемометр Сали (с пипеткой и пробирками).
4. Соляная кислота 0,1 н. раствор -- 5,0 мл.
5. Глазная пипетка -- 2 шт.
6. Дистиллированвая вода 5,0 мл.
7. Инъекционная игла.
8. Вата -- 5,0 г.
Ход исследования:
В градуированную пробирку гемометра Сали до метки 1,0 наливают 0,1 н. раствор HCl. Кровь набирают в пипетку от гемометра до метки 0,02 мл (20 мкл), обтирают наружную часть капилляра ватой и осторожно (избегая образования пены) выдувают в соляную кислоту на дно пробирки. Несколько раз ополаскивают капилляр раствором соляной кислоты и затем пробирку встряхивают (для смешения крови с соляной кислотой) и далее оставляют пробирку на 1О - 15 минут. Жидкость в пробирке приобретает коричневый цвет вследствие образования солянокислого гематина. При добавлении дистиллированной воды уравнивают цвет жидкостей в пробирке с цветом стандартного раствора. Цифра на пробирке соответствует количеству гемоглобина в исследуемой крови в условных единицах, а также и в г/л. В том случае, если на пробирке указаны только условные единицы, то для перевода в г/л необходимо полученную цифру условных единиц умножить на 6.
|
|
|
Нормальное содержание гемоглобина у мужчин 12-16г%, у женщин 12-14г%.
Задание 2. Перерасчет содержания гемоглобина в крови в г%, в г/л и в %.
Содержание гемоглобина в крови выражается как абсолютных единицах (г/л, г/100мл ), так и в относительных единицах ( в %). Для всех расчетов принимается показатель содержания гемоглобина в крови, составляющий 166,7г/л (соответственно 166,7г/100 мл или 16,67г%). Эта величина соответствует максимальной концентрации гемоглобина, т.е. при максимальном насыщении гемоглобином одного эритроцита и при содержании в крои эритроцитов 5 ×1012/л. Ее принимают за 100%. Таким образом, 16,67г гемоглобина в 100 мл крови также равно 100%. При необходимости перевода в % любого показателя, выраженного в абсолютных единицах составляется пропрция:
6
16,67 г/дл Hb – 100% A × 100
x = _______________ = A × 6
А г/л Hb – х % 16,67
Таким образом, для перевода абсолютных показателей гемоглобина ( вг/100мл) в относительные (%), абсолютные показатели умножают на 6. Соответственно, при переводе относительных показателей в абсолютные, относительную величину делят на 6.
|
|
|
Рассчитатьотносительные показатели содержания гемоглобина в крови при следующих абсолютных показателях:
12 г%
11 г%
8 г%
70 г/л
Задание 3. Определение количества эритроцитов в 1 л крови
Необходимые животные в оборудование на 1 рабочее место:
1. Кролики те же, что в задании 1.
2 Пробирки.
3. Счетная камера Горяева.
4. 1% раствор NaCl.
5. Инъекционная игла.
6. Вата - 5 г.
7. Микроскоп с ок. 10, об. 8.
Ход исследования:
Кровь от животного (кролика) с экспериментальной анемией набирают из краевой вены уха в капилляр гемометра Сали (0,02мл), затем переносят в пробирку с 4 мл раствора NaCl и тщательно перемешивают. Полученное разведение составляет 1:202 и практически его можно принять 1:200. Небольшую каплю смеси помещают на площадку счетной камеры (Горяева) под предварительно притертое покровное стекло. Через 1- 2 минуты (когда эритроциты осядут на дно камеры) начинают подсчет эритроцитов, пользуясь увеличением микроскопа 20 х 8 при вогнутом зеркале и опущенном конденсоре. Подсчет ведут в 5 больших квадратах, каждый из которых разделен на 16 малых. Таким образом, всего сосчитываются эритроциты в 80 малых квадратах, в разных участках камеры по диагонали. Для исключения возможности подсчета дважды одной и той же клетки (расположенной на границе квадрата) считают в данном квадрате все эритроциты, находящиеся на левой и нижней границах квадрата.
|
|
|
Определяют количество эритроцитов в л крови по формуле:
а · 200 · 4000 = а ·10 000 ,
80
где: а - количество эритроцитов, сосчитанных в 8О малых квадратах;
200 -- разведение крови в смесителе,
4000 -множитель объема жидкости малого квадрата ( объем малого квадрата равен 1/4000 куб.мм),приводящий к объему в куб. мм.
80- количество сосчитанных малых квадратов.
Найденное количество эритроцитов в 1 куб. мм для выражения их содержания в 1 литре умножают на 10 6.
Нормальное количество эритроцитов в крови 4,5-5,0·10 12/л
Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 929; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!