ИНТРАНАЗАЛЬНЫЙ СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ МИКРОБНОЙ ВЗВЕСИ
Поскольку максимальная величина ПДК микроорганизмов-продуцентов в воздухе рабочей зоны ограничивается 5х10 
м.кл./м 
, то при проведении хронического эксперимента испытывается данная концентрация и на порядок ниже. При необходимости исследования продолжаются с концентрациями, снижающимися на порядок.
Взвесь микроорганизмов с помощью пипетки вводят мышам в количестве 0,007-0,05 мл, крысам - 0,05-0,25 мл.
Пересчет концентрации микроорганизмов в воздухе на дозу, введенную животному, осуществляют по формуле:
,
где:
- количество микробных клеток в 1 м воздуха;
- количество микробных клеток, введенных животному;
- объем вдыхаемого воздуха.
Величина объема вдыхаемого воздуха определяется как произведение легочной вентиляции для данного вида животных на массу тела животного и время ингаляции.
Показатели легочной вентиляции (в см /г/мин) составляют для:
крысы - 0,65;
морской свинки - 0,33;
мыши - 1,24;
кролика - 0,29*.
_______________
* Методы определения токсичности и опасности химических веществ (токсикометрия). М.: Медицина, 1970.
Концентрация 5х10 м.кл./м соответствует поглощенной дозе 1560 кл. на крысу массой 200 г, 990 кл. на морскую свинку массой 250 г, 133 кл. на мышь массой 18 г.
Приложение 3
ОЦЕНКА ПОВРЕЖДАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НА СЛИЗИСТЫЕ ОБОЛОЧКИ ГЛАЗА КРОЛИКА ПО MAJDA И CHRUSAIELSKA
А. Гиперемия конъюнктивы и роговицы оценивается по следующим признакам:
|
|
|
сосуды инъецированы - 1 балл;
отдельные сосуды трудно различить - 2 балла;
диффузное глубокое покраснение - 3 балла.
Б. Отек век
слабые отеки - 1 балл;
выраженный отек с частичным выворачиванием век - 2 балла;
в результате отека глаз закрыт наполовину - 3 балла;
в результате отека глаз закрыт полностью - 4 балла.
В. Выделения:
минимальное количество выделений - 1 балл;
количество выделений увлажняет веки - 2 балла;
количество выделений увлажняет веки и окружающие ткани - 3 балла.
При резко выраженных повреждениях глаза суммарное количество баллов равно 10.
Приложение 4
ПЕРЕСЧЕТ МНД ПРИ ЭНТЕРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ НА МНК В ВОДЕ
Так как в токсикологических экспериментах используется доза, выражаемая числом микробных клеток на животное, то в известную формулу пересчета: МНК мг/л = МНД мг/кг х 20, следует внести изменения с учетом средней массы крысы (200 г): МНК м.кл./л = МНД м.кл./жив. х 100.
Приложение 5
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ И ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ
Для определения диссеминации и наличия бактеримии после введения микроорганизма-продуцента производят посев крови и отпечатков внутренних органов (легких, печени, селезенки, почек и др.) на оптимальную для выявления роста среду. Взятие материала для посева производят стерильно. Шкурка животного обрабатывается спиртом и обжигается. При исследовании после внутрибрюшинного или внутрижелудочного введения вскрытие животного начинают с грудной клетки, после ингаляции (интраназального или интрахеального введения) - с брюшиной. При исследовании продуцентов, чувствительных к действию спирта, можно орган или его часть погрузить на несколько секунд в 70-градусный этиловый спирт, затем стерильно осушить фильтровальной бумагой и разрезать лезвием безопасной бритвы, скальпелем или ножницами, простерилизованными (погружение в спирт и обжигание) и охлажденными для каждого органа отдельно*.
|
|
|
_______________
* Следует учитывать, что рост микроорганизмов, относящихся к роду Bacillus, не подавляется спиртом, поэтому при исследовании таких продуцентов обязательно прижигание поверхности органа перед его рассечением. В границах обожженной поверхности срезается часть органа, из глубины вырезается кусок, из которого делают отпечаток.
|
|
|
Делают мазки и отпечатки с 2-3 срезов каждого органа.
Кровь отбирают из полости сердца стерильной пастеровской пипеткой после прижигания места прокола сердечной мышцы. 1-2 капли крови наносят на поверхность питательной среды и растирают стерильным шпателем (газон).
Культивирование посевов проводят при оптимальных для выявления искомого продуцента условиях.
Параллельно с проведением бактериологических посевов кусочки органов помещают в 10-процентный раствор формалина и далее подвергают обычной при патоморфологических исследованиях обработке. При микроскопическом исследовании определяют морфологические изменения в тканях. Применяя специальные (для конкретного микроорганизма) методы окраски, определяют его наличие в органах, стадии развития, массивность обсеменения.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Безопасность работы с рекомбинантными молекулами ДНК: Санитарно-противоэпидемические правила. М., 1989.
2. Гигиеническая оценка микробных средств защиты растений от насекомых и болезней на основе неспорообразующих микроорганизмов. Киев, 1982.
3. Постановка исследований для обоснования санитарных стандартов вредных веществ в воздухе рабочей зоны : Методические указания. М., 1980.
|
|
|
4. Постановка исследований по гигиеническому нормированию промышленных аллергенов в воздухе рабочей зоны: Методические рекомендации. Рига, 1980.
5. Постановка исследований для установления предельно допустимых концентраций антибиотиков в воздухе рабочей зоны: Методические указания. М., 1989.
6. Разработка и научное обоснование предельно допустимых концентраций вредных веществ в воде водоемов: Методические указания. М., 1976.
7. Санитарно-микробиологический анализ воды поверхностных водоемов: Методические указания. М., 1981.
Электронный текст документа
подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:
рассылка
Методические указания по экспериментальному обоснованию ПДК микроорганизмов-продуцентов и содержащих их готовых форм препаратов в объектах производственной и окружающей среды (Источник: ИСС "ТЕХЭКСПЕРТ")
Дата добавления: 2021-04-05; просмотров: 96; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!