Гемопоэтических стволовых клеток (ГСК)
Несмотря на почти три десятилетия обширных исследований в расширении HSC и самообновления , стабильной и надежной системы расширения для человеческого ГСК до сих пор не достигнуто . Это, вероятно, из-за чрезвычайной чувствительности верных ГСК к их немедленного микроокружения . Колебания в минуту в концентрациях цитокинов , напряжения кислорода , температуры и клеток - ECM взаимодействия достаточно, чтобы привести в движение необратимых дифференциации каскадов , которые приводят к истощению ГСК в культуре. Строма - и цитокины без расширения ГСК / кроветворных клеток-предшественников ( HPCS ) с использованием пористого Bio совместимого 3D эшафота был впервые описан Бэгли и др.
Строительные леса , изготовленные из тантала покрытием пористых биоматериалов ( TCPB матричных или сотовых ) представил микроархитектуру напоминающий трабекул костного мозга. Культура HPC костного мозга на TCPB в отсутствие цитокинов увеличения поддерживается фенотип предшественников и мультипотентность до 6 недель ;значительно более длительный период по сравнению их с культур, выращенных на фибронектина покрытием пластиковой посуды , костного мозга стромы совместных культурах и других 3D- устройств. В частности , культура на TCPB матрицы привело к 1,5 -кратному расширению чисел HPC следующее 1 недели в культуре и 6,7 - кратное повышение колониеобразующей способности следующих 6 недель в культуре.
|
|
|
Дополнение с низкой концентрации (нг / мл) фактор стволовых клеток и Flt 3 - лиганда , но не интерлейкин- 3 , заметно повышена эффекты TCPB матрицы в поддержании мультипотентности из HPCS . Использование низких концентраций цитокинов в экс естественных условиях расширения ГСК / HPCS имеет клиническую значимость , как это было показано , что воздействие этих клеток к высоким , нефизиологических уровней цитокинов перед трансплантацией уменьшает их способность привить в костном мозге. Улучшенный результат расширения наблюдался и для пуповинной крови , полученных CD34 клеток, культивированных + на TCPB эшафотах . Культура TCPB эшафот в течение 2 недель дали трехкратное увеличение числа ядерных клеток и в 2,6 раза увеличить в колониеобразующих единиц . Оба CD45 + и CD34 + клеток в три раза увеличилось количество . Кроме того, расширенные клетки были способны к прививке сублетального облучения , без ожирения с диабетом / SCID мышей.
Совсем недавно были исследованы эффекты поверхности с иммобилизованным адгезивных клеток пептиды и полипептиды по пролиферации и дифференцировки мозга очищенного CD34 + клеток крови . Фибронектин-ковалентно привитые на 3D поли ( этилен ) (ПЭТ ) нетканые эшафоты заметно улучшилось содержание CD34 + фенотипа , мультипотентность и без ожирения диабетической / SCID эффективности приживления культурного CD34 пуповинной крови + про- genitor клеток по сравнению с фибронектин -привитой двумерного эшафота или тканевых культур пластиковые элементы управления. Было высказано предположение, что иммобилизованные фибронектин синергисты с 3D топографии модифицированных эшафотов для создания биомиметических микросреду для распространения и обслуживания CD34 + . Очищенный шнур CD34 крови + ГСК , культивированные в восстановленной коллагена I фибриллы в присутствии Flt3 -лиганд , фактор стволовых клеток , и интерлейкин 3 в течение 7 дней в культуре, показало увеличение количества колониеобразующих единиц , хотя общий коэффициент расширения CD34 + клеток слегка ниже по сравнению с контрольными суспензионных культур , предполагая, что коллаген I эшафота выступили лучше на сохранение мультипотентность из CD34 + клеток . Экспрессия генов профилирования из культивируемых клеток показали позитивную регуляцию более чем 50 генов в присутствии коллагена I. Среди них гены нескольких факторов роста, цитокинов и хемокинов , (например, интерлейкин- 8 и макрофагов ингибиторный белок , а) были подтверждены с помощью количественного полимеразная цепная реакция . Кроме того, выше выражение отрицательного клеточного цикла регулятора BTG2/TIS21 и ингибитора митоген-активированной протеинкиназы пути, DUSP2 , подчеркивание регулирующую роль ЕСМ. Итак, эти данные показывают, что расширение CD34 + клеток пуповинной крови в системе культуры , содержащей 3D коллаген I матрицу вызывает качественное изменение в профиле экспрессии генов обрабатываемого ГСК.
|
|
|
Дата добавления: 2020-12-12; просмотров: 65; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!