Методика определения рН рубцового содержимого.
рН определяют в день взятия проб. Доставленные на холоду пробы рубцового содержимого после фильтрации готовы к анализу. Прибор pH-метр включают в сеть и прогревают 20 мин. Прежде чем приступить к установлению рН испытуемых образцов, необходимо проверить работу или настроить рН-метр по имеющимся буферным растворам, приготовленным из фиксанала, приложенным в комплект. Выбирать буферные растворы при работе необходимо близкими к диапазону рН измеряемых растворов.
При определении рН рубцового содержимого настройку и проверку работы
рН-метра проводят по следующим буферным растворам (прилагается в комплекте с прибором): рН 5,00 – (158 мл 0,05 М янтарной кислоты и 92 мл 0,05 М раствора буры); рН 7,0 – 9,0 – (236 мл 0,02 М раствора борной кислоты и 15 мл 0,05 М раствора буры); рН 9,24 – (0,05 М раствора буры).
Измерение рН рубцового содержимого проводят в химических стаканчиках
(50 мл). Электрод промывают дистиллированной водой и обсушивают фильтровальной бумагой перед очередной пробой. В норме рН рубцового содержимого крупного рогатого скота колеблется в пределах 6,0 – 7,3; овец и коз 6,2 – 7,3.
Клиническая оценка.
Непосредственно после кормления кислотно-щелочное равновесие содержимого рубца резко сдвигается в зависимости от вида кopмa. В период голодания среда в рубце характеризуется нейтральной или слабощелочной реакцией (рН 7,0 – 8,0). В течение первых часов после кормления значение рН снижается до 5,0 – 6,0, возвращаясь к исходной величине через 8 – 12 ч. На значение рН влияет вид корма. Так, среднее значение рН при поедании молодой пастбищной травы 6,2; при поедании грубого перестоявшегося корма (клеверо-злаковой смеси) – 6,6; обильное поедание легкопереваримых углеводов вследствие повышенного образования летучих кислот снижает рН рубцовой жидкости; резко снижается рН (до 4,5) при высоко-концентратном кормлении.
|
|
|
Для биосинтеза и ферментативных процессов в рубце очень важна реакция
среды, в которой проявляется оптимум действия микрофлоры и фауны рубца. Так,
оптимальный протеолиз (распад кормового протеина) происходит при значениях
рН 6,0 – 6,8; в этой же среде находится оптимум действия целлюлозолитической
микрофлоры и образуется оптимальное количество уксусной кислоты, и у животных продолжительная жвачка, высокое выделение слюны, длительное всасывание летучих жирных кислот, нормальное функционирование преджелудков. Регуляция кислотно-щелочного равновесия осуществляется за счет
непрерывного разбавления содержимого рубца щелочной слюной, присутствия
фосфатов и карбонатов. При нарушении регуляция кислотно-щелочного равновесия или чрезмерно интенсивном образовании кислот, при избытке концентрированных и мелко измельченных кормов рН опускается ниже 5,0; развивается алиментарный метаболический ацидоз. Накапливаются молочная и пропионовая кислоты, такое закисление содержимого рубца может вызвать продолжительное нарушение моторики рубца.
|
|
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АММИАКА МИКРОДИФФУЗНЫМ МЕТОДОМ В
СОДЕРЖИМОМ РУБЦА ПО КОНВЕЮ
В процессах превращения питательных веществ корма в рубце важную роль
играет аммиак – конечный продукт расщепления белковых и небелковых
соединений корма и начальный продукт синтеза микробиального белка в рубце. Его количество в рубцовом содержимом определяется кормом, а также степенью и скоростью всасывания его из рубца, скоростью его трансформации в белок микрофлоры рубца. На уровень аммиака и динамику его образования влияют вид кормов, кратность кормления. Аммиак, не преобразовавшийся в бактериальный белок, всасываясь, в печени превращается в мочевину. При увеличении концентрации аммиака в рубце увеличивается и уровень мочевины в крови, а также потери азота с мочой.
Принцип метода состоит в вытеснении аммиака из аммонийных солей
концентрированным раствором щелочи и в последующем его поглощении
|
|
|
титрованным раствором кислоты. В замкнутом пространстве чашки Конвея
освобожденный аммиак диффундирует и поглощается в течение определенного
времени точно отмеренным количеством кислоты известного титра.
Реактивы:
1. 0,01 н. раствор серной кислоты (готовит из 0,1 н. раствора перед
работой).
2. Индикатор Ташира: а) 0,1%-ный спиртовой раствор метил-рот. б) 0,1%-
ный водный раствор метил-блау, смешивают 8 мл раствора «а», 2 мл
раствора «б» и 10 мл спирта.
3. 33%-ный раствор едкого натрия или насыщенный раствор поташа.
4. 0,01 н. раствор едкого натрия (готовят из 0,1 н. раствора перед
работой).
Ход анализа.
В наружную камеру чашки Конвея вносят 1 мл исследуемой
жидкости. Во внутреннюю камеру наливают 1 – 3 мл точно отмеренного
титрованного раствора серной кислоты и добавляют 3 – 4 капли индикатора
Ташира, имеющего в кислой среде малиново-розовую окраску. Смазывают края
наружной камеры чашки вазелином и притирают крышку для создания полной
герметизации. Чуть приоткрыв крышку, в наружную камеру вливают 1 – 2 мл
33%-ного раствора едкого натрия или насыщенного раствора поташа. Закрыв чашку крышкой, легким поворачиванием смешивают исследуемую жидкость со
|
|
|
щелочью. Время диффузии при комнатной температуре 12 ч. По истечении этого
срока избыток кислоты в центральной камере, не связавшийся с аммиаком,
оттитровывают 0,01 н. раствором едкого натрия до перехода малиновой окраски
индикатора в зеленую. Параллельно с опытными образцами ставят «слепые»
пробы с дистиллированной водой вместо исследуемой жидкости (для определения аммиака в реактивах).
Расчеты производят по формуле:
X = (А – В) · 0,17 · 100,
где А и В – количество 0,01 н. раствора едкого натрия, пошедшего на титрование
«слепой» и опытной пробы, мл; 0,17 – количество аммиака, эквивалентное 1 мл
0,01 н. раствора щелочи, г; X – количество аммиака в мг%.
Клиническая оценка.
При нормальных условиях кормления у взрослого крупного рогатого скота в рубцовой жидкости содержится 10 – 40 мг% аммиака. В зимний период кормления уровень аммиака более низкий, а в условиях весенне-пастбищного содержания концентрация аммиака может достигать 60 мг%. При скармливании жвачным животным амидных солей (карбамид, сульфат и фосфат аммоний, АКД) концентрация аммиака в рубце резко возр астает в первые же часы после кормления.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 172; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!