Методы культивирования анаэробов.

Стр 1 из 6Следующая ⇒

Некультивируемыми (НФ) называют такие формы микроорганизмов, которые в ответ на действие неблагоприятных факторов прекращают рост на питательных средах, но сохраняют жизнеспособность, а при улучшений условий культивирования возобновляют пролиферацию. Некультивируемое состояние (НС) обнаружено у многих патогенных видов. для выявления НФ в организме или клиническом материале наиболее широко используются молекулярно-генетические методы: полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ее различные модификации, лигазная цепная реакция (ЛЦР), техника гибридизации тотальной клеточной РНК, ПЦР с обратной транскриптазой. Преимущество указанных методов является их высокая чувствительность и специфичность. Белки-шапероны, которые связываются с ДНК в процессе перехода в НС, могут препятствовать выявлению НФ в ПЦР. В водных объектах окружающей среды НФ можно обнаружить с помощью флуоресцирующих моноклональных антител (МКА), что позволяет определить видовую принадлежность бактерий, но неинформативно в отношении жизнеспособности клеток. Применение магнитных сорбентов повышает чувствительность метода, а использование набора специфических моноклональных антител к стабильным и лабильным эпитопам липополисахарида дает возможность судить о потенциальной жизнеспособности НФ. Перечисленные методы позволили выявить присутствие НФ патогенных бактерий в организме человека и животных в продуктах питания, в объектах окружающей среды: в воде в почве. Экспериментальные и гипотетические сведения об обнаружении НФ в

Окружающей среде дополняют работы об индукторах НС и реверсии.

Антиген- это вещ-ва или тела, несущие на себе отпечаток чужеродной генетической информации. Антигены делят на сильные (выраженный иммунный ответ), слабые.

Свойства, иммуногенность, антигенность- взаимодействие с продуктами иммунного ответа. Классификации антигенов.

Антигены классифицируются по происхождению (экзогенные и эндогенные), по природе (белковые и небелковые), по структуре (глобулярные и фибриллярные), по необходимости участия в иммунном ответе Т-хелперов (Т-зависимые и Т-независимые), по иммуногенности (иммуногены и гаптены), по степени чужеродности.

свойств у антигенов два: антигенность и иммуногенность.

А. Под антигенностью понимают способность антигена специфически реагировать с антителами или клетками, которые продуцируются на его введение в организм (человека или животного). Это свойство, как только что было указано, неотъемлемое, т.е. если антиген не обладает свойством антигенности, то он, строго говоря, не может быть рассматриваем как антиген.

Б. Под иммуногенностью понимают способность антигенов индуцировать специфический иммунный ответ, в результате чего продуцируются антитела или активируются иммунные лимфоциты. Это свойство, в отличие от антигенности, не присуще всем без исключения антигенам.

V. cholerae – этот вид включает многочисленных представителей, которые внутри вида подразделяются на биохимические группы и на серогруппы. Морфологические свойства соответствуют характеристике семейства. Культуральные свойства – не требовательны к питательным средам. Отличительной биологической особенностью является галофильность (щелечелюбивость) – основные элективные питательные среды – 1% щелочная пептонная вода и щелочной агар. На этих средах другие микроорганизмы или не растут, или рост появляется значительно позднее. На 1% ПВ рост V. сholerae рост появляется уже через 6 часов – они аэробы, поэтому растут в виде пленки нежно-голубого цвета. На ЩА видимый рост появляется через 12 часов – колонии средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, бесцветные с голубым оттенком. Биохимические свойства – выражена ферментативная активность по отношению к трем углеводам (манноза, сахароза, арабиноза), по отношению к которым все представители вида делятся на 6 групп (триада Хейберга). Возбудитель холеры относится к I группе по Хейбергу (манноза К+, сахароза К+, арабиноза -). К I группе по Хейбергу относится не только возбудитель холеры, но и другие представители вида. Антигенное строение. Имеют Н-антиген, который является общим у всех представителей вида. По О-антигену все представители вида делятся на серогруппы (более 150). Факторы вирулентности. Холерный вибрион обладает тропизмом к эпителиальным клеткам тонкого кишечника. 1. наличие фактора колонизации CF, который кодируется плазмидой 2. продукция энтеротоксина (холероген), который состоит из фракций: LT

(термолабильная), которая стимулирует аденилатциклазу, и ST (термостабильная) – стимулирует гуанилатциклазу, в результате чего нарушается энтеросорбция 3. эндотоксин – обеспечивает общетоксическое действие. Микробиологическая диагностика основана на бактериологическом исследовании, материал- фекалии и рвотные массы. Можно использовать методы иммуноиндикаии и молекулярно- генетические методики.

Назначают антибиотики. Для спец. Профил. Используют убитую холерную вакцину и комбинированную вакцину(холероген-анатоксин м О-антигена холерного вибриона).

Вирусы семейства пикорнавирусов - это РНК-содержащие вирусы. РНК однонитевая, линейная, “плюс-нить”, выполняющая функцию и-РНК. Вирион имеет простое строение и представляет собой нуклеокапсид, т.е. РНК покрыта капсидной оболочкой, в которой капсомеры уложены по кубическому типу симметрии. Суперкапсидной оболочки нет, вирусы устойчивы к эфиру. Вирионы имеют форму многогранника. Размеры 20-30 нм. Вирус полиомиелита (полеовирус) является типичным представителем рода энтеровирусов. Строение его РНК и нуклеокапсида соответствует общей характеристике семейства пикорнавирусов. Капсидная оболочка состоит из 4 белков: 3 на внешней поверхности (VP1, VP2, VP3) и 1 на внутренней (VP4). Вирион имеет сферическую форму. Как и все энтеровирусы, вирус полиомиелита не размножается в курином эмбрионе, хорошо размножается как в первичных, так и перевиваемых культурах тканей (Hela, фибробластов человека). Репродукция вирусов в культурах тканей сопровождается цитопатическим действием и образованием вирусных включений. Вирус полиомиелита инактивируется при температуре 500-550С, чувствителен к УФ, высушиванию, хлорпроизводным дезинфектантам, но устойчив к действию детергентов, эфира и низким рН. Искусственный активный иммунитет создают вакцинацией. В микробиологической диагностике полиомиелита могут быть использованы вирусологическое, серологическое исследование и методы иммуноиндикации. Материалом для вирусологического исследования могут служить фекалии, кровь, спинно-мозговая жидкость. Производят заражение вирусодержащим материалом культур тканей, где индикацию вируса проводят по характерному цитопатическому действию, феномену бляшкообразования под агаром, а окончательную идентификацию в реакции вирусонейтрализации. В том же исследуемом материале антигены полеовируса можно обнаружить методами иммуноиндикации, используя РСК, ИФА, РИФ и другие реакции иммунитета. Серологическое исследование позволяет подтвердить диагноз на основании обнаружения нарастания титра антител в парных сыворотках больного.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 11 1. Антибиотики. Определение. Классификация антибиотиков. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам 2.Антигены бактерий. Классификация по локализации и специфичности. 3.Лептоспирозы. Возбудитель. Лабораторная диагностика. 4.Полимиелит. Возбудитель. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

Билет 11

Антибиотики – это химические вещества биологической природы, обладающие способностью подавлять рост или вызывать гибель микроорганизмов.

Классификация:

I. По происхождению. Продуцентами антибиотиков могут быть:

- плесневые грибы (пенициллин)

-актиномицеты (из них получено большинство антибиотиков)

-типичные бактерии (грамицидин)

-продуценты антибиотиков животного происхождения (экмолин)

-антибиотики растительного происхождения (фитонциды)

II. По химическому строению:

III. По направленности действия:

- противопротозойные;

- противогрибковые;

- антибактериальные;

- противовирусные.

IV. По механизму действия.

Все антибиотики действуют на те или иные стороны метаболизма микроорганизмов; они никогда на нарушают уже готовые структуры бактерий.

1. Антибиотики – ингибиторы синтеза клеточной стенки, в частности ингибиторы синтеза пептидогликана муреина.

а) β – лактамные антибиотики

- пенициллины

- цефалоспорины

- монобактамы

- карбапенемы (имипенем, меропенем, эртапенем, дорипенем).

б) гликопептиды – действуют на другие этапы синтеза пептидогликана, чем β – лактамы:

- ванкомицин

- липогликопептид - телаванцин.

2. Антибиотики, подавляющие синтез белка.

- аминогликозиды, макролиды, линкозамиды, тетрациклины, хлорамфеникол, линезолид, тигециклин.

3. Антибиотики, нарушающие энергетические процессы на ЦПЭ.

- полимиксины, полиены.

4. Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот

V. По характеру действия:

Антибиотики оказывают либо бактериостатическое действие (способность подавлять рост и размножение бактерий), либо бактерицидное действие (способность вызвать гибель бактерий).

VI. По спектру действия:

-с узким спектром действия;

-с широким спектром действия.

Существуют 2

метода определения чувствительности бактерий к антибиотикам:

1. качественный – метод стандартных индикаторных дисков. Он по-

зволяет охарактеризовать культуру бактерий, выделенную от больно-

го, как устойчивую, умеренно устойчивую, умеренно чувствительную,

чувствительную или высоко чувствительную к тому или иному анти-

биотику.

Количественный – метод серийных разведений. Он позволяет коли-

чественно оценить уровень чувствительности изучаемой культуры

бактерий, т.к. определить минимальную ингибирующую концентра-

цию (МИК) данного антибиотика для данного штамма. Если МИК вы-

сока, то бактерии устойчивы к антибиотику, и его нельзя использовать

для лечения.

Антигены бактерий: классификации по специфичности и по природе (происхождению).

Антигены бактерий классифицируются по специфичности (групповые – общие у нескольких видов, видовые – общие для одного вида, типовые – общие для одного серовара) и по природе (продукты распада – принадлежащие клеточным структурам бактериальной клетки, продукты жизнедеятельности бактериальной клетки).

Антигены, входящие в состав органелл бактериальной клетки.

В состав клеточных структур бактериальной клетки входят, например, следующие антигены: O-Ag (антиген клеточной стенки), К-Ag и Vi-Ag (антигены капсулы), Н-Ag (антиген жгутиков).

Антигены, продуцируемые микробной клеткой в процессе своего метаболизма.

К ним относятся белковые токсины, ферменты (в том числе – ферменты вирулентности).

Антигенные свойства грибов.

Антигенный состав грибов крайне гетерогенен, грибная клетка содержит многие десятки и даже сотни антигенов.

Лептоспироз — острая инфекционная болезнь, вызываемая возбудителем из рода лептоспир. Характеризуется поражением капилляров, часто поражением печени, почек, мышц, явлениями интоксикации, сопровождается волнообразной лихорадкой. Диагностика. Эпидемиологический анамнез (контакт с животными, купание в водоемах), выявление антител в парных сыворотках, кровь для посева на культуральные среды, моча (протеинурия, лейкоцитурия, эритроцитурия, цилиндрурия). Дифференцировать надо прежде всего с гепатитом. Основные различия: анамнез — при гепатите В гемотрансфузии, при лептоспирозе контакт с грызунами; преджелтушный период при гепатите есть, при лептоспирозе отсутствует; температура при гепатите до желтухи, а при лептоспирозе одновременно с желтухой; при гепатите нет болей в мышцах, билирубин при гепатите увеличен прямой, а при лептоспирозе оба.

Полиомиелит – острое лихорадочное заболевание, которое иногда сопровождается поражением серого вещества спинного мозга и ствола головного мозга, в результате чего развиваются вялые параличи и парезы мышц ног, туловища, рук.

По структуре полиовирусы – типичные представители рода Enterovirus. Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3.

Для специфической профилактики полиомиелита используется несколько типов вакцин:

- убитые вакцины,

- живая вакцина.

Микробиологическая диагностика

1. Серодиагностика – антитела к HBS-антигену, к НВС-антигену (суммарные), к НВС-антигену IgM, к НВE-антигену IgG.

2. Иммуноиндикация – обнаружение антигенов HBS и НВС .

Специфическая профилактика – рекомбинантная вакцина.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.6 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 12 1. Основные биологические свойства бактерий и методы их изучения. 2.Классы иммунных глобулинов. Их характеристика. Схема строения молекулы иммуноглобулина G. Полные и неполные антитела. 3.Группа риккетсий. Особенности биологии, методы культивирования. Классификация. 4.Рабдовирусы. Возбудитель бешенства. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

Билет 12

Культуральные свойства бактерий - питательные потребности, условия роста и характер роста бактерий на бактериол. средах. В питательные потребности включают источники углерода, азота и ростовых факторов, способность бактерий расти на определенных питательных средах, в условия роста -рН,Eh, концентрацию О₂ плотность, осмотическое давление среды, температуру роста; в характер роста - скорость роста (быстрый, медленный), внешний вид к-ры на жидких, плотных и полужидких средах, изменения, к-рые наступают в среде или отдельных ее компонентах в процессе роста микробов.

2. № 60 Классы иммуноглобулинов, их характеристика. Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобиологическим свойствам разделяются на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Иммуноглобулин класса G. Изотип G составляет основную массу Ig сыворотки крови. На его долю приходится 70—80 % всех сывороточных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости. Среднее содержание IgG в сыворотке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Период полураспада IgG — 21 день. IgG — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (может одновременно связать 2 молекулы антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы Gl, G2, G3 и G4. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном иммунном ответе. Обладает высокой аффинностью. IgGl и IgG3 связывают комплемент, причем G3 активнее, чем Gl. IgG4, подобно IgE, обладает цитофильностью (тропностью, или сродством, к тучным клеткам и базофилам) и участвует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических реакциях IgG может проявлять себя как неполное антитело. Легко проходит через плацентарный барьер и обеспечивает гуморальный иммунитет новорожденного в первые 3—4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко путем диффузии. IgG обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществляет запуск комплемент-опосредованного цитолиза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.

Риккетсии - это бактерии, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. Риккетсии выделены в отдельный порядок Rickettsiales. Клетки риккетсий полиморфные (палочковидные, кокковидные, нитевидные), грамотрицательные. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Риккетсии относятся к медленно растущим организмам. Время генерации не менее 8-9 часов. Размножаются, подобно бактериям, простым поперечным делением или дроблением нитевидных форм. По типу дыхания - аэробы. У риккетсий имеются различные ферменты и им присущи многие обменные процессы. Однако в процессе эволюции они утратили некоторые энзимные системы, необходимые для синтеза отдельных жизненно важных биополимеров, и поэтому перешли к паразитическому образу жизни. Патогенные для человека риккетсии не способны размножаться на бесклеточных средах (исключение R.quintana). Для их культивирования применяют те же методы, что и для культивирования вирусов: заражение культуры тканей, культивирование в развивающихся куриных эмбрионах, организме экспериментальных животных или эктопаразитов. Риккетсии имеют два антигена - растворимый (группоспецифический) и корпускулярный (видоспецифический). Риккетсии образуют отдельный порядок Rickettsiales. Патогенные риккетсии образуют токсические вещества (природа которых окончательно не установлена). Они нестойки, легко разрушаются, обладают гемолитической активностью и вызывают парез кровеносных сосудов. Заболевания, вызываемые риккесиями, носят общее название риккетсиозов. Два из них - эпидемический сыпной тиф (возбудитель R. prowazekii) и волынская лихорадка (возбудитель R. quintana) являются антропонозными инфекциями. Для большинства других риккетсий основным резервуаром являются грызуны и членистоногие. Риккетсиозы – трансмиссивные инфекции. Возбудитель передается человеку при укусе кровососущих членистоногих (вши, блохи, клещи). Лишь Ку-лихорадка (возбудитель C.burneti) передается алиментарным или воздушно-капельным путем, а естественным хозяином ее возбудителя является домашний скот. Большинство риккетсиозов относится к природно-очаговым инфекциям.

Об этом свидетельствуют и их названия - марсельская, волынская лихорадка, североазиатский риккетсиоз и др. Лишь сыпной тиф, один из наиболее тяжелых риккетсиозов, распространен повсеместно. Риккетсии поражают клетки ретикулоэндотелиальной системы и эндотелия сосудов. В основе патогенеза риккетсиозов лежит интоксикация и развитие характерных изменений в эндотелии артериол и капилляров в виде эндоваскулита. Как следствие возникают тромбозы, стазы и кровоизлияния в различных органах и тканях, в том числе ЦНС. Для клинике всех риккетсиозов характерными симптомами является выраженная интоксикация и геморрагии. Смерть наступает в результате развития острой сердечной недостаточности и Поражения ЦНС. Постинфекционный иммунитет - длительный, стойкий. Основным методом микробиологической диагностики риккетсиозов является серологическое исследование (РА, РПГА, РСК с соответствующими риккетсиозными диагностикумами). Выделение риккетсий возможно только в

специальных лабораториях строгого режима. Для этиотропной терапии используют антибиотики группы тетрациклина и хлорамфеникол (левомицетин). Менее эффективны антибиотики - макролиды. Специфическая профилактика разработана в отношении двух риккетсиозов: сыпного тифа и Ку-лихорадки. Она проводится по эпидпоказаниям живой или химической сыпнотифозной вакциной и живой вакциной из риккетсий Бернета.

Семейство Rabdoviridae характеризуется широким кругом естественных хозяев среди позвоночных и беспозвоночных животных, простейших и растений, и только 2 представителя этого семейства патогенны для человека: вирус бешенства и вирус везикулярного стоматита. Но если везикулярный стоматит не представляет серьезной опасности для больного, то бешенство по-

прежнему остается одной из наиболее тяжелых болезней человека. Вирус бешенства является типичным представителем семейства рабдовирусов. Нуклеокапсид содержит одну “минус-нить” нефрагментированной РНК и геномные белки, в том числе и РНК-зависимую РНК-полимеразу. Нуклеопротеин является группоспецифическим антигеном вируса. Нуклеокапсид построен по спиральному типу симметрии и покрыт сверху липидосодержащей суперкапсидной оболочкой, что делает вирус чувствительным к эфиру. Суперкапсидная оболочка имеет шиповидные выросты из гликопротеидов, выполняющих функцию гемагглютининов и вариантспецифических антигенов, выявляемых в РТГА. Вирион имеет пулевидную форму. Вирус может размножаться в организме лабораторных животных, в культуре почек новорожденных хомячков или диплоидных клеток человека. Иммунотерапия и иммунопрофилактика бешенства. Для спасения больного вводят живую антирабическую вакцину, содержащую ослабленный вирус, подкожно в переднюю стенку живота. Током крови вакцинный вирус быстро достигает чувствительные клетки головного мозга, где фиксируется на специфических рецепторах, не вызывая инфекцию или вызывая ее ослабленные варианты течения, опережая вирус-возбудитель. Когда инфекционный вирус достигает чувствительных клеток, их рецепторы оказываются блокированными вакцинным вирусом, что предотвращает развитие инфекции. Это явление вирусной интерференции. Вакцина также стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета и синтез интерферона. Своевременное введение вакцины - единственное средство специфической терапии бешенства. Методы микробиологической диагностики бешенства. В целях микробиологического подтверждения диагноза используют методы иммуноиндикации (РИФ по обнаружению вирусного антигена в слоне или в посмертном материале), биопробу на белых мышах, а также для посмертной диагностики вирусоскопическое исследование.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 13 1.Микроорганизмы с дефектной клеточной стенкой. Протопласты, сферопласты. L-формы бактерий; роль в патологии человека. 2.Сыворотки антимикробные и антитоксические. Получение. Практическое применение. 3.Патогенные спирохеты. Классификация. Особенности биологии. Роль в патологии человека. Сифилис. Возбудитель. Лабораторная диагностика. 4.Методы генетического анализа. ПЦР. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

Билет 13

Из любой бактериальной клетки можно получить форму, полностью или частично лишенную клеточной стенки Они называются соответственно, протопласты и сферопласты. Весьма существенным является то, что под воздействием химиопрепаратов и других факторов. Нарушающих формирование клеточной стенки, они могут образовываться в организме больного, но при этом бактерии сохраняют способность взаимодействовать с организмом больного. Кроме того существуют, так называемые L – формы бактерий, которые в отличии от протопластов и сферопластов способные к размножению - это сферические образования разных размеров. Существуют стабильные L – формы, не способные реверсировать в исходный морфотип и нестабильные L – формы, реверсирующие в исходный тип при устранении причин, вызывающих их образование. В процессе реверсии восстанавливается способность бактерий синтезировать пептидоглика – муреин клеточной стенки. L – формы различных бактерий играют существенную роль в патогенезе многих хронических рецедивирующих заболеваний (бруцеллез, туберкулез, сифилис, хр. гонорея).

2.Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител. 1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины. 2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша. 3.Противовирусныесыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела. Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации животных (лошади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с последующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной сыворотки. Иммунные сыворотки, полученные от животных, называют гетерогенными, так как они содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Для получения гомологичных нечужеродных иммунных сывороток используют сыворотки переболевших людей (коревая, оспенная сыворотки) или специально иммунизированных людей-доноров (противостолбнячная, противоботулиническая), содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного заболевания. Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины. Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами. Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для лечения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета

Спирохеты — порядок бактерий с длинными (3—500 мкм) и тонкими (0,1—1,5 мкм) спирально закрученными клетками. Грамотрицательны, хемоорганогетеротрофы. Подвижны, размножаются поперечным делением. Эндоспор не образуют. Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные и факультативно-анаэробные. Спирохеты встречаются в почве, воде, других организмах. Сифилис - одна из классических венерических болезней. Возбудитель - Treponema pallidum (бледная трепонема). Она имеет форму правильной спирали размером до 15 мкм, с 8-12 крутыми глубокими равномерными завитками, концы заострены. Из многих антигенов возбудителя наиболее изучены три: липополисахаридный кардиолипин, белковый и нуклеопротеиновый. Treponema pallidum очень требовательны к питательным средам и на обычных средах не растут. Для их культивирования используют сложные среды, содержащие почечную и мозговую ткань. Посевы культивируют в строго анаэробных условиях при температуре 350С. При нагревании до 600С возбудитель быстро погибает. Под действием пенициллина переходит в L-формы. Для сифилиса характерно волнообразное течение. Выделяют первичный, вторичный и третичный периоды болезни. Первичный период начинается с появления на месте внедрения возбудителя (слизистая половых органов, анальное отверстие, полость рта) первичной сифиломы (твердого шанкра). Его продолжительность 45-50 дней. Он делится на: серонегативный (2-3 недели) и сменяющий его серопозитивный (в крови появляются антитела). Вторичный период развивается при отсутствии лечения, как результат генерализации инфекции. Он может продолжаться 3-4 года. Третичный период. Для него характерно образование грубых поражений кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов, костей. Методы микробиологической диагностики. Основными методами микробиологической диагностики сифилиса являются: • бактериоскопический; • серологический. Бактериоскопическое исследование. Оно является одним из основных методов диагностики при первичном сифилисе. Исследуют материал из первичной сифиломы, пунктат лимфатических узлов. Из него готовят мазки, окрашивают их по Романовскому- Гимза и микроскопируют. Используют и темнопольную микроскопию неокрашенных мазков. Серологическое исследование. Оно становится возможным с 3-4 недели заболевания и является основным методом диагностики сифилиса. Антитела выявляют в осадочных тестах (на основе реакции преципитации), РСК и реакций с мечеными антиглобулиновыми сыворотками. В серологической диагностике сифилиса используются две группы стандартных антигенных препаратов, нетрепонемные и трепонемные. Первые (кардиолипин бычьего сердца) имеют лишь сходство с антигенами возбудителя сифилиса, вторые являются либо стандартными штаммами Treponema pallidum, либо их ультразвуковым дезинтегратом. С кардиолипиновыми антигенами ставят осадочную микрореакцию преципитации (МР), р.Кана (флокуляционный тест) и РСК, с трепонемными - РСК и реакцию иммобилизации трепонем. Оценка результатов реакции качественная, по системе + + + +. В настоящее время в серодиагностике сифилиса широко используются иммунолюминисцентные и иммуноферментные методики, для реализации которых предложен ряд коммерческих тест систем.

4. Основным способом генетического анализа считают метод молекулярной гибридизации. Сущность способа заключается во взаимодействии комплементарных цепей ДНК или РНК, в результате которого образуются двунитчатые структуры. Гибридизация может осуществляться между комплементарными молекулами ДНК и ДНК, ДНК и РНК, РНК и РНК. Гибридизация осуществляют поэтапно. Сначала деспирализуют генетический материал с целью получения одноцепочных структур, затем адсорбируют его на нитроцеллюлозной мембране. Следующим этапом является обработка материала зондом, который представляет собой короткую последовательность нуклеиновой кислоты, комплементарной исследуемой кислоте и меченную радиоактивным фосфором. После обработки материала зондом, исследуемые пробы помещают в специальный счетчик. Искомую последовательность нуклеиновой кислоты в материале определяют по степени радиоактивности пробы. Метод высокочувствителен, т. к. позволяет выявить до 10^-10 г. нуклеиновой кислоты в 1 г. материала.

В начале 80-х годов К. Мюллисом был разработан способ под названием полимеразная цепная реакция (ПЦР). Суть этого метода сводится к следующему. Исследуемый материал нагревают до 90-100 єС, что приводит к раскручиванию 2-х цепочной ДНК на отдельные цепи. После расхождения цепей ДНК, к ним добавляют набор всех пуриновых и пиримидиновых оснований, праймеры и термостабильную ДНК, комплементарные той нуклеиновой кислоте, которую амплифицируют (накапливают). Затем смесь ДНК и праймеров охлаждают. При этом праймеры при наличии в смеси ДНК искомого гена связываются с его комплементарными участками. В результате синтезируются две копии гена. После этого цикл повторяют снова и снова. При каждом повторе цикла количество ДНК гена будет увеличиваться в 2 раза. Для проведения реакции необходимы специальные приборы – амплификаторы.

Этот метод позволяет обнаружить 100 молекул ДНК или РНК в 1 г. исследуемого материала, т. е. является самым высокочувствительным методом из всех известных в настоящее время.

ПЦР применяют для диагностики вирусных и бактериальных инфекций, анализ рекомбинаций фагов

Естественно, что гибридизация фагов, происходящая в период их внутриклеточного размножения, не может быть обнаружена, если клетка заражается фаговыми частицами одного генотипа. Не обнаруживается она и при смешанном заражении мутантом и нормальным фагом, так как гибридизация может быть выявлена лишь по рекомбинации признаков фагов двух генотипов. Накопление различных мутантных линий фагов оказалось необходимой предпосылкой проведения гибридизационной работы с фагами.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 14 1.Бактериологическое исследование, его этапы. Принципы внутривидовой дифференциации бактерий. 2.Иммунный ответ. Его типы. Клеточные кооперации. Роль макрофагов в образовании антител. 3.Чума. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Лечение. Профилактика. 4.Безусловные и условные латентные вирусные инфекции и механизм их развития. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

Билет 14

Выделение чистой культуры лежит в основе бактериологического исследования – важнейшего метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Цель его – выделение чистой культуры и ее идентификация, что позволяет правильно поставить диагноз инфекционного заболевания. ЭТАПЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ. 1. Первичная микроскопия исследуемого материала (необязательныйэтап). 2. Первичный посев с целью выделения чистой культуры. 3. Накопление чистой культуры. 4. Изучение биологических свойств выделенной чистой культуры и ее окончательная идентификация.

иммунный ответ - это совокупность процессов, происходящих в иммунной системе в ответ на введение антигена. Клетки, участвующие в иммунном ответе (Т- и В-лимфоциты и макрофаги), называются иммунокомпетентными.

Иммунный ответ может быть:

первичным (при первой встрече с антигеном),

вторичным (при повторной встрече с антигеном).

При этом выраженность первичного иммунного ответа достигает максимума к 7-8-му дню, сохраняется в течение 2 недель, а затем снижается. Вторичный иммунный ответ развивается быстрее и достигает большей (в 3-4 раза) интенсивности.

По типу взаимодействия клеток и образовавшихся клеток-эффекторов (по конечному результату) принято различать три типа иммунного ответа:

гуморальный иммунный ответ,

клеточный иммунный ответ,

иммунологическую толерантность.

Возбудитель чумы относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia, виду Y.pestis. Возбудитель чумы - полиморфные, мелкие, овоидные палочки. Они неподвижны, аспорогенны, в организме образуют капсулу. Грамотрицательные, окрашиваются биполярно. Факультативные анаэробы, психрофиллы, температурный оптимум 28⁰С. Хорошо растут на простых питательных средах. На плотных питательных средах уже через 12 часов формируются шероховатые (R-формы) колонии. Авирулентные штаммы образуют гладкие (S-формы) колонии. На жидких средах Y.pestis дает поверхностную пленку со спускающимися нитями. Биохимическая активность невелика. Носителями возбудителя являются дикие грызуны, а переносчиками - блохи. Природные очаги чумы занимают 6-7 % территории суши земного шара и выявлены на всех континентах. Заражение человека чаще всего происходит при укусе инфицированными блохами, контакте с больными, погибшими от чумы грызунами, а также при забое и разделке больных чумой верблюдов. Чума может передаваться и от человека человеку как антропонозное заболевание. Чума характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением лимфатической системы, септицемией. В зависимости от пути проникновения возбудителя в организм человека чума протекает в виде различных клинических форм: кожной, бубонной, первично-септической и легочной. После перенесенного заболевания вырабатывается стойкий и длительный иммунитет, обусловленный, преимущественно, фагоцитарной активностью клеток макрофагальной системы. Этиотропная терапия проводится антибиотиками, предпочтение отдается аминогликозидам. С целью специфической профилактики применяют живую вакцину. После вакцинации иммунитет сохраняется около года. Материал для исследования определяется клинической формой заболевания (пунктат бубона, мокрота, кровь). Как указывалось выше, микробиологическая диагностика чумы проводится только в специализированных лабораториях и предусматривает первичную бактериоскопию, выделение возбудителя или обнаружение его антигенов. Используются и методы серологической диагностики.

Взаимодействие вируса с клеткой - это сложный процесс, результаты которого могут быть различны. По этому признаку (конечный результат) можно выделить 4 типа взаимодействия вирусов и клеток. Латентная вирусная инфекция. Это такой тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором происходит репродукция вирусов, но клетка не погибает, а сохраняет свою жизнеспособность. В ней происходит синтез и вирусных, и клеточных компонентов, при этом клеточные синтезы преобладают, и поэтому клетка достаточно длительно сохраняет свои функции. Этот механизм лежит в основе безусловных латентных вирусных инфекций.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 15 1. Нормальная микрофлора человека. Строение, функции. 2.Фазы образования антител и их характеристика. Специфичность антител. Их классификация по признаку специфичности. Моноклональные антитела. 3.Стафилококки, их роль в патологии. Факторы патогенности стафилококков и методы их изучения. Принципы специфической терапии и профилактики. 4.Герпес-вирусы. Биологическая характеристика. Лабораторная диагностика. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

Билет 15

Нормальная микрофлора сопутствует своему хозяину на протяжении всей его жизни. С современных позиций ее следует рассматривать как совокупность множества микробиоценозов, характеризующихся определенным видовым составом и занимающих тот или иной биотоп в организме. В любом микробиоценозе следует различать постоянно встречающиеся виды микроорганизмов - характерные (индигенная, автохтонная флора), добавочные и случайные - транзиторные (аллохтонная флора). Количество характерных видов относительно невелико, но численно они всегда представлены наиболее обильно. Видовой состав транзиторных микроорганизмов разнообразен, но они немногочисленны. Количество бактерий, населяющих покровные ткани (кожу, слизистые оболочки) во много раз превосходи! число собственных клеток хозяина. Формирование нормальной микрофлоры ребенка начинается уже при прохождении плода через родовые пути матери. Польза от резидентных бактерий сводится прежде всего к защите от экзогенной инфекции и контролю за собственным микробным гомеостазом. Обеспечение колонизационной резистентности - одна из важнейших функций нормальной микрофлоры. Способность нормальной микрофлоры защищать поверхность слизистых оболочек и кожи от патогенных бактерий - мощный механизм противомикробной резистентности. Нормальная микрофлора является мощным иммуномодулятором. Она способствует созреванию иммунной системы. На гнотобионтах было установлено, что у безмикробных организмов недоразвиты лимфоидные органы, снижено число лимфоцитов и плазматических клеток, изменена фагоцитарная активность. Имеет место гипогаммаглобулинемия и низкий уровень нормальных антител. Нормальная микрофлора поддерживает иммунокомпетентные клетки в состоянии "постоянной готовности" праймирования (субактивации), что обеспечивает более быстрый и эффективный ответ на инфекцию. Нормальная микрофлора толстого кишечника принимает активное участие в различных метаболических процессах (обмен холестерина, стероидных гормонов, липидном обмене) за счет продукции большого количества ферментов, а также образования метаболитов при микробной трансформации субстратов эндогенного и экзогенного происхождения. При этом исходный субстрат через каскад биохимических реакций превращается либо в промежуточный, либо в конечный продукт катаболизма.3 Нормальная микрофлора - неограниченный банк генетического материала. Между представителями нормальной микрофлоры постоянно происходит обмен генетического материала, а также его передача патогенным видам, попадающим в ту или иную экологическую нишу. Нормальная микрофлора обладает детоксикационными свойствами как в отношении организмов, попавших из внешней среды, так и в отношении образующихся токсических продуктов метаболизма, путем их биосорбции или трансформации в нетоксичные продукты. Нормальная микрофлора участвует в регуляции газового, водно-солевого обмена, поддержании рН среды. Бактерии толстого кишечника синтезируют витамины, в том числе биотин, рибофлавин, пантотеновую кислоту, витамины К, Е, В12, фолиевую кислоту. Однако витамины не всасываются в толстом кишечнике и поэтому можно рассчитывать только на те из них, которые в небольшом количестве образуются в подвздошной кишке.

В образовании антител различают четыре фазы:

1. Фаза покоя (лаг-фаза, фаза индукции) - с момента поступления антигена в организм до появления антител. Продолжительность этой фазы - от нескольких дней до 1 мес., в зависимости от свойств антигена, его дозы, способа введения в организм, возраста животного и др. В этот период происходит пролиферация и дифференцировка лимфоидных клеток в направлении синтеза иммуноглобулина класса М.

2. Фаза нарастания титров антител (лог-фаза, продуктивная фаза) - от появления антител до момента достижения их максимального количества. Длительность этой фазы - 2-15 дней. В этой фазе антитела освобождаются из плазмоцитов и поступают в кровяное русло. Уменьшается число клеток, синтезирующих IgM, начинает нарастать продукция IgG. Впоследствии появляются IgA, а также JgE, JgD.

3. Фаза стабилизации, в которой уровень антител (или их титр) остается неизменным обычно в течение нескольких дней или недель. Ее длительность зависит от вида животного, характера антигенов и класса продуцируемых антител (иммуноглобулины имеют разный период полураспада).

4. Фаза снижения продукции антител. Продолжительность этой фазы различна и зависит от сохранения антигена в тканях, который является индуктором образования антител. Этому способствует, например, введение антигена с адъювантом, который создает депо, из которого АГ медленно поступает в организм, обеспечивая длительную антигенную стимуляцию. Снижение титра антител в результате начинается спустя несколько недель или месяцев. Способность к длительному образованию антител и в высоких титрах можно поддерживать путем повторных введений антигена на протяжении длительного времени.

При повторном попадании антигена через несколько недель или месяцев динамика иммунного ответа изменяется (информация об антигене хранится в генетическом аппарате лимфоцитов иммунной памяти). Латентный период и период нарастания титра антител становятся короче. Титры антител достигают максимума быстрее и сохраняются на высоком уровне дольше, повышается аффинитет антител. При вторичном ответе сразу синтезируются антитела класса G.

Каждое антитело специфично для определенного антигена; это связано с уникальной структурной организацией аминокислот в вариабельных участках его легких и тяжелых цепочек. Аминокислотная организация имеет разную пространственную конфигурацию для каждой антигенной специфичности, поэтому когда антиген вступает в контакт с антителом, многочисленные простетические группы антигена как зеркальное изображение соответствуют таким же группам антитела, благодаря чему между антителом и антигеном осуществляется быстрое и плотное связывание. Если антитело высокоспецифично и имеется много мест связи, происходит мощное сцепление между антителом и антигеном посредством: (1) гидрофобных связей; (2) водородных связей; (3) ионного притягивания; (4) ван-дер-вааль-совых сил. Комплекс антиген-антитело также подчиняется термодинамическому закону действия масс.

Стафилококки - кокки правильной круглой формы, в мазках обычно располагаются ассиметричными скоплениями (“гроздья винограда”) или беспорядочно. Спор не образуют, неподвижны. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Не требовательны к питательным средам. На плотных средах образуют гладкие, круглые, выпуклые колонии. Колонии окрашены за счет нерастворимого в воде

пигмента в различные оттенки желтого или белого цвета. На жидких средах при росте дают равномерное помутнение. Особенностью стафилококков является их способность расти на средах с высоким (до 15%) содержанием NaCl. Это используется при создании элективных питательных сред для их выделения. Стафилококки - метаболически активные микроорганизмы. Ферментируют многие углеводы, обладают протеолитической активностью. На основании различий биохимической активности все представители рода Staphylococcus делятся на более чем три десятка видов. Основную роль в патологии человека играют S.aureus, S.epidermidis, S.saprophyticus. Стафилококки имеют сложное антигенное строение. У них обнаружено свыше 50 различных антигенов. Они отличаются как по строению, так и по локализации. По локализации различают: − экстрацеллюлярные антигены - это антигены микрокапсулы и белковые антигены экзотоксинов и экзоферментов; − целлюлярные антигены - глубокие и поверхностные антигены клеточной стенки (тейхоевые кислоты, пептидогликан, белок А и другие поверхностные белки). Белок А способен прочно связываться с Fс-фрагментом молекул Ig G (в меньшей степени Ig M, Ig A), при этом Fab-фрагменты остаются свободными. Это свойство белка А используется при приготовлении антительных реагентов для реакции коагглютинации. С другой стороны, белок А является одной из причин того, что стафилококковые инфекции часто сопровождаются развитием

вторичного иммунодефицита. По специфичности антигены стафилококков подразделяют на родовые, видовые, типоспецифические и перекрестно-реагирующие - общие с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека. Стафилококки - условно-патогенные микроорганизмы. Способность отдельных штаммов вызывать те или иные формы стафилококковой инфекции во многом определяется их способностью продуцировать тот или иной набор токсинов и ферментов агрессии и защиты. Токсины стафилококков. Стафилококки продуцируют комплекс секретируемых экзотоксинов. Это мемброноповреждающие токсины - α, β, δ и γ-гемотоксины. Повреждая мембраны, каждый из этих токсинов разрушает эритроциты, лейкоциты, макрофаги и другие клетки. Кроме того, стафилококки могут образовывать энтеротоксины (такие штаммы вызывают кишечные формы стафилококковой инфекции), эксфолиативный токсин (обуславливает клинику пузырчатки новорожденных), лейкоцидин. α-гемотоксин, энтеротоксины А и В вызывают развитие синдрома токсического шока. Ферменты агрессии и защиты. Это многочисленная группа секретируемых белков-ферментов. Они обеспечивают распространение стафилококков по тканям и органам и защищают их от действия антимикробных механизмов организма. Это плазмокоагулаза, гиалуронидаза, фибринолизин, лецитиназа, протеаза, ДНК-азы и др. Основным методом микробиологической диагностики стафилококковых инфекций является бактериологическое исследование. Материал для него определяется ее клиническими проявлениями. В ходе бактериологического исследования помимо видовой идентификации возбудителя определяют продукцию выделенным штаммом факторов вирулентности. При внутрибольничной стафилококковой инфекции проводят фаготипирование выделенных штаммов Staphylococcus aureus. Для этиотропной терапии острых форм стафилококковой инфекции используют антибиотики, стафилококковую плазму или γ-глобулин, поливалентные стафилококковые фаги, в лечении хронических форм - анатоксин, аутовакцины. Для специфической профилактики стафилококковой инфекции можно применять стафилококковый анатоксин.

Вирусы семейства Herpesviridae занимают важное место в инфекционной патологии человека.

Вирионы герпес-вирусов имеют сферическую форму, их размеры от 140 до 210 нм. Геном представлен двунитевой линейной ДНК. ДНК состоит из двух ковалентно связанных фрагментов разной длины и содержащих разные нуклеотидные последовательности, но на концах имеются повторы. Нуклеокапсид построен по кубическому типу симметрии и окружен суперкапсидной оболочкой, содержащей липиды, что делает вирусы чувствительными к эфиру. Среди белков суперкапсидной оболочки есть гемагглютинины. Антигенами вирусов прежде всего являются гликопротеиды суперкапсидной оболочки (вариантспецифические антигены) и белки нуклеокапсида (группоспецифические антигены). Вирусы размножаются в различных культурах тканей с образованием ядерных включений и куриных эмбрионах. Вирусы герпеса характеризуются полиорганным тропизмом. Они могут вызывать не только острые, клинически выраженные формы, но и развитие бессимптомных, латентных форм инфекции. Герпес-вирусы проникают в чувствительные клетки путем эндоцитоза, утрачивая свою суперкапсидную оболочку. Методы микробиологической диагностики. Исследуемым материалом служит содержимое герпетических визикул. При вирусоскопическом исследовании в этом материале обнаруживают гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями. Этот же материал используют для заражения культур тканей, куриных эмбрионов при вирусологическом исследовании. В хорионаллантоисной оболочке эти вирусы образуют бляшки. Идентифицируют вирусы в реакции вирусонейтрализации. В содержимом герпетических везикул выявляют антигены вирусов герпеса методом иммуноиндикации, используя РСК и ИФА. С помощью этих же реакций в ходе серологического исследования обнаруживают инфекционные антитела в парных сыворотках больного.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 16 1.Особенности метаболизма у бактерий. Конститутивные и индуцибельные ферменты бактерий. Автоматическая регуляция синтеза ферментов. 2. Практическое применение учения об иммунитете 3.Возбудители анаэробной клостридиальной раневой инфекции. Их характеристика. Лабораторная диагностика. 4. Возбудитель амебиаза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1.Понятие о метаболизме. Анаболизм и катаболизм. Особенности метаболизма у бактерий. Методы изучения метаболизма бактерий.

Метаболизм бактерий представляет собой совокупность двух противоположных, но взаимосвязанных процессов - катаболизма и анаболизма. Катаболизм (диссимиляция) - распад веществ в процессе ферментативных реакций и накопление выделяемой при этом энергии в молекулах АТФ. Анаболизм (ассимиляция) - синтез веществ с затратой энергии. Изучают метаболизм бактерий с помощью биохимических и физико- химических методов исследования в процессе культивирования бактерий в определенных условиях на питательных средах, содержащих определенные субстраты. Особенности метаболизма у бактерий. 1) Процессы диссимиляции преобладают над процессами ассимиляции; 2)Высокая интенсивность процессов метаболизма, обусловленная тем, что соотношение поверхности к единице массы больше, чем у многоклеточных; 3)Субстратный спектр потребляемых бактериями веществ очень широк – от углекислого газа, азота, нитритов, нитратов до органических соединений, включая антропогенные вещества - загрязнители окружающей среды (обеспечивая тем самым ее самоочищение). 4)Бактерии имеют очень широкий набор ферментов - это также способствует высокой интенсивности метаболических процессов.

методы изучения

Изучают метаболизм бактерий с помощью биохимических и физико-химических методов исследования в процессе культивирования бактерий в определенных условиях на питательных средах, определенные субстраты.

Конститутивные и индуцибельные ферменты бактерий. Автоматическая регуляция синтеза ферментов.

Экзоферменты - ферменты бактерий, выделяемые во внешнюю среду и действующие на субстрат вне клетки (например, протеазы, полисахаридазы, олигосахаридазы) и Эндоферменты - ферменты бактерий, действующие на субстраты внутри клетки (например, ферменты, расщепляющие аминокислоты, моносахара, синтетазы). Синтез ферментов генетически детерминирован, но регуляция их синтеза идет за счет прямой и обратной связи, т.е. для одних - репрессируется, а для других - инициируется субстратом. Ферменты, синтез которых зависит от наличия соответствующего субстрата в среде (например, β-галактозидаза, β-лактамаза), называются индуцибельными. Другая группа ферментов, синтез которых не зависит от наличия субстрата в среде называетсяконститутивными (например, ферменты гликолиза). Их синтез имеет место всегда, и они всегда содержатся в микробных клетках в определенных концентрациях.

2.Практическое значение иммунитета

На учении об иммунитете базируются:

специфическая диагностика
профилактика и терапия инфекционных болезней животных, являющихся важным звеном в общем комплексе противоэпизоотических мероприятий

Искусственная иммунизация - по существу направленное изменение защитных сил организма, создание в нём новых полезных свойств устойчивости. Основа специфической диагностики - серодиагностика, построена на принципе строгой специфичности соединения антигена и антитела.

При помощи заведомо известного антитела можно обнаружить искомый антиген и, наоборот, с помощью антигена найти соответствующее ему антитело. С помощью типоспецифических диагностических сывороток удаётся установить тип изучаемого возбудителя (эшерихии, сальмонеллы, лептоспиры и другие).

Типирование циркулирующего возбудителя важно для иммунологического анализа эпизоотического процесса и отбора соответствующего его типу иммунного препарата. В ветеринарно-санитарной экспертизе серологическими методами определяют в мясных продуктах (колбаса и другие) примесь мяса определённых видов животных.

Широко применяется в ветеринарии аллергическая диагностика (бруцеллёз, туберкулёз и другие).

3.)Возбудители анаэробной клостридиальной раневой инфекции. Их характеристика.

Возбудители анаэробной инфекции по способности к спорообразованию делятся на две большие группы: спорообразующие (клостридии) и неспорообразующие (неклостридиальные анаэробы). Эти бактерии относятся к семейству Bacillaceae. Клостридии - это палочки средней величины или крупные, с закругленными, прямыми или заостренными концами, полиморфны. В мазках располагаются попарно или короткими цепочками. Большинство видов подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков. Образуют овальные или сферические эндоспоры, диаметр которых превышает ширину клеток. Отдельные виды (C.perfringens) образуют капсулу. Грамположительны. Облигатные анаэробы. Обладают сахаролитической и протеолитической активностью. Обитают в кишечном тракте млекопитающих, птиц и человека, откуда попадают в окружающую природную среду. Патогенные виды образуют сильные экзотоксины. Род Clostridium включает до 100 видов, из которых патогенными для человека являются возбудители газовой гангрены, столбняка и ботулизма.

4.Вирусы Коксаки выделены от больных с полиомиелитоподобными

заболеваниями. Они отличаются от вируса полиомиелита антигенными и

некоторыми другими биологическими свойствами.

По способности вызывать вялые и спастические параличи у лабораторных

животных различают вирус Коксаки А и вирус Коксаки В, причем у первого 24,

а у второго 6 сероваров. Некоторые серовары обладают гемагглютинирующей

активностью, в том числе и холодовой гемагглютинацией. Некоторые серовары

вируса Коксаки А не культивируются в культурах тканей.

Клинические формы Коксаки-инфекции разнообразны. Вирусы Коксаки А

обладают миотропностью, и для клинических проявлений вызываемой ими

инфекций характерны лихорадка, менингеальные явления, “герпетические”

ангины, перикардиты. Вирус Коксаки Вв силу своей нейротропности вызывает

энцефаломиелиты, менингиты, полиомиелитоподобные заболевания, обладая

кардиотропизмом, вызывает миокардиты. Специфическим для него является

поражение сердца с развитием некроза и аневризмы. Так же эти вирусы могут

вызывать ОКВИ и ОРВИ у детей. Иммунитет напряженный

вариантспецифический.

Специфической профилактики нет.

Вирусы ЕСНО антигенно отличны от вирусов полиомиелита и Коксаки.

Различают 31 серовар этих вирусов. Большинство из них обладают

гемагглютинирующей активностью, непатогенны для белых мышей, а вкультуре ткани дают выраженное цитопатическое действие.

Вирусы ЕСНО в основном вызывают кишечные инфекции у детей, но

может быть клиника и более тяжелых полимиелитоподобных заболеваний.

Принципы микробиологической диагностики инфекций Коксаки ЕСНО те же, что и при полиомиелите.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 17 1.Типы питания бактерий. Классификация бактерий по источникам углерода и азота. Механизмы питания бактерий. 2.Имунная система, как орган иммуногенеза. Центральные и периферические органы иммунной системы. Т- и В-лимфоциты. Их характеристика, методы подсчета. 3.Кампилобактериоз. Биология возбудителя. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика. Хеликобактериоз. Микробиологическая диагностика. 4. Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1.Типы питания бактерий. Классификация бактерий по источникам углерода и азота.

Питание бактерий - процесс потребления различных органических и минеральных соединений, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов. Бактериальная клетка не имеет специальных органов питания - является голофитной по способу потребления питательных веществ. По способу питания бактерии делятся на: Автотрофы – синтезируют все углеводсодержащие компоненты клетки из СО2 как единственного источника углерода. Гетеротрофы – организмы, которые не могут удовлетворять свои потребности в углероде только за счет СО , а также требует для своего питания готовые органичесике соединения. В свою очередь, гетеротрофов, подразделяют насапрофитов – источник питания мертвые органичесике соединения, паразитов – живущих за счет живых тканей животных и растений. В зависимости от источников энергии все организмы можно подразделить на три группы. Фотолитотрофы источник энергии солнечный свет, доноры электронов – неорганические соединения. Хемолитотрофы - источник энергии окислительно – восстановительные реакции, доноры электронов – неорганические соединения. Хемоорганитрофы – источник энергии окислительно-восстановительные реакции, доноры электронов – органические соединения. По источникам азота: Азотофиксирующие бактерии способны усваивать молекулярный азот из атмосферы или неорганический азот из солей аммония, нитратов или нитритов. Нитрифицирующие бактерии, которые способны использовать для синтеза белков в качестве основных источников азота соли аммиака, азотистой и азотной кислоты. Прототрофы – микроорганизмы, способные синтезировать все необходимые им органические соединения ( углеводы, аминокислоты) из глюкозы и солей аммония. Ауксотрофы – микроорганизмы, не способные синтезировать какое - либо из указанных

20). Механизмы питания бактерий.

Основные механизмы поступления питательных веществ в бактериальную клетку: Пассивный транспорт. Осуществляется за счет различного содержания питательных веществ в среде и в клетке и происходит в направлении от большой концентрации к меньшей, т.е. по градиенту концентрации. Для пассивной диффузии характерно отсутствие субстратной специфичности и она не требует затраты энергии. Облегченная диффузия. Характеризуется выраженной субстратной специфичностью и протекает при обязательном участии специфических белков, локализованных в мембране – это пермиазы – «проходящие сквозь». Они распознают и связывают молекулу субстрата на внешней стороне мембраны и обеспечивают ее перенос через мембрану. Облегченная диффузия происходит только по градиенту концентрации – поэтому не требует затрат энергии. Активный транспорт. С помощью этого механизма растворенные вещества могут поступать в клетку против градиента концентрации, поэтому активный транспорт требует от клетки затраты энергии. У бактерий этот механизм преобладает.

2. Центральными органами иммунной системы называют органы, где происходит формирование и созревание иммуноцитов. К ним относят костный мозг, вилочковую железу (тимус) и сумку Фабрициуса. Периферические органы иммунной системы содержат зрелые лимфоциты. Здесь после антигенного воздействия происходит их дальнейшая пролиферация и дифференцировка, продуцируются антитела и эффекторньш лимфоциты. К периферическим органам относятсяселезенка, лимфатические узлы, скопления лимфоидной ткани под слизистыми поверхностями желудочно-кишечного, дыхательного, мочеполового трактов(групповые лимфатические фолликулы, тонзиллы, пейеровы бляшки).

3.Кампилобактериоз. Возбудители. Клинические формы. Микробиологическая диагностика.

Возбудители кампилобактериоза относятся к семейству Spirillaceae, роду Campylobacter. Кампилобактеры имеют характерную s-образную форму с одним или более витком. Подвижны. Клетки имеют по одному полярному жгутику на одном или обоих концах. Спор, капсул не образуют. Грамотрицательны. Микроаэрофилы, рост возможен при концентрации О₂ не выше 3-6%. Очень требовательны к питательным средам. Для культивирования используют сердечно-мозговой или шоколадный агар. Однако, даже на этих высокопитательных средах видимый рост появляется на 6 сутки. Колонии круглые, мелкие, гладкие, выпуклые, блестящие. Имеют О- и Н- антигены. Они обладают выраженной инвазивной активностью и способны к внутриклеточному размножению. Продуцируют эндотоксин и энтеротоксин. Кампилобактериоз относится к сапронозам. Кампилобактеры широко распространены среди животных и птиц; средой их обитания является вода. Заболевание человека, при которых в роли этиологического агента выступают кампилобактеры, делятся на 4 группы: − диарреи (энтероколиты); − генерализованные и/или локализованные внекишечные формы инфекции; − перинатальные инфекции; − заболевания ротовой полости. Наиболее частыми возбудителями диарреи являются C.coli, C.jejuni. Внекишечные формы кампилобактериозов обычно развиваются как осложнения кишечной, но могут возникать и как самостоятельное заболевание. Иммунитет не достаточно изучен. Основными методами микробиологической диагностикикампилобактериозов являются методы иммуноиндикации и молекулярно - генетические. Для этиотропной терапии используют антибиотики. Специфическая профилактика не разработана.

4.25. Реакция нейтрализации (реакция нейтрализации токсина антитоксином; реакция вирусной нейтрализации на животных, эмбрионах и клеточных культурах.Механизм и практическое использование).

Идентифицировать вирус по характеру его действия на монослой культуры клеток, которые он разрушает или вызывает в них разного рода структурные изменения, очень трудно, и поэтому прибегают к постановке реакции нейтрализации (РН) вирусов заведомо известными вируснейтрализующими сыворотками. С этой целью полученный от больного вирус накапливают в культуре клеток и различные его разведения смешивают с неразведенной противовирусной сывороткой или, наоборот, постоянную дозу вируса добавляют к различным разведениям иммунной сыворотки. Смеси инкубируют в термостате. После этого смесями вируса и сыворотки заражают культуру клеток и о нейтрализующей силе ее антител судят по отсутствию цитопатического действия на клетки Смесью вирусов и сывороток можно заражать куриные эмбрионы или чувствительных животных. В таких случаях нейтрализующую активность антител определяют по предотвращению развития патологических изменений на хорионаллантоисной оболочке; нейтрализации вирусных гемагглютининов в жидкостях эмбриона, устранению летального действия вируса на животных

Подобным образом с помощью РН идентифицируются вирусы, выделенные из материала больных при заражении им куриных эмбрионов и животных. В таких случаях к вируснейтрализующим сывороткам прибавляют вируссодержащие жидкости эмбрионов и взвеси пораженных органов животных. После определенного времени инкубации смесями инфицируют культуры клеток, куриные эмбрионы и животных.

В серодиагностике вирусных инфекций РН определяют вирус–нейтрализующие антитела в сыворотке больных по известному вирусу. Ставят ее в динамике с парными сыворотками, одну из которых берут в разгаре заболевания, а вторую – спустя 2–3 недели, и по четырехкратному нарастанию титра антител в этой последней подтверждают диагноз.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 18 1.Белковый обмен бактерий. Методы его изучения. Тление и гниение. Углеводный обмен бактерий. Методы его изучения. Горение и брожение. 2.Теории образования антител. 3.Стрептококки. Биология возбудителя. Инвазивные формы стрептококков. Факторы вирулентности. Специфические формы инфекций, вызванных пиогенным стрептококком. Лабораторная диагностика и терапия. 4.Функциональное значение отдельных компонентов вирионов (вирусных нуклеиновых кислот, вирусных белков). Прионы. Вироиды. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1. Белковый обмен - это процесс синтеза собственных аминокислот и белков путем ассимиляции необходимых компонентов из внешней среды. Тление – расщепление белков в аэробных условиях. Гниение – расщепление белков в анаэробных условиях. Протеолитические свойства - способность расщеплять белки до промежуточных продуктов распада – пептонов - изучается при посеве на желатин и (или) лакмусовое молоко. При наличии протеаз у бактерий желатин разжижается, а в молоке образуется сгусток кремового цвета, а над ним светлая, прозрачная жидкость). Пептолитические свойства - способность расщеплять только промежуточные продукты распада белков – пептоны, до элементарных радикалов) изучается при посеве бактерий в мясо-пептонный бульон. Под крышку пробирки помещают индикаторные полоски, способные изменять свой цвет в присутствии летучих продуктов распада пептонов (аммиака, сероводорода, индола)

Углеводный обмен – это процесс синтеза и распада углеводов. Горение – это расщепление углеводов в аэробных условиях. Брожение – это расщепление углеводов в анаэробных условиях. Изучается углеводный обмен в процессе культивирования исследуемых бактерий на средах Гисса (полужидких средах, содержащих углевод и индикатор, реагирующий на появление кислых продуктов распада углеводов).

Теории образования антител

Теория боковых цепей Эрлиха. Эрлих полагал, что антитела представляют собой макромолекулы, специфичность которых для антигена зависит от присутствия определенных стереохимических конфигураций, обладающих комплементарностью к аналогичным структурам антигена, что обеспечивает специфическое взаимодействие между ними.

Инструктивные теории образования антител.

Сложилось убеждение, что именно антиген управляет образованием специфических антител, направляя механизмы белкового синтеза на изготовление тех уникальных молекулярных конфигураций, которые определяют иммунологическую специфичность

3. Стрептококки относятся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus. Стрептококки - кокки, располагающиеся цепочкой или попарно (вид S.pneumoniae, т.е. пневмококки), неподвижны, спор не образуют. S.pneumoniae в организме человека и животных образуют капсулу. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Требовательны к питательным средам, растут на средах с добавлением глюкозы или крови. На плотных питательных средах образуют мелкие (“точечные”), беспигментные колонии с матовой поверхностью. При росте в жидких средах стрептококки дают придонно - пристеночный рост, а среда остается прозрачной. Наибольшее значение в патологии человека играют: S.pyogenes, S.agalactiae, S.pneumoniae. Стрептококки имею сложное антигенное строение. По локализации их антигены делят на: − экстрацеллюлярные (антигены токсинов и ферментов агрессии и защиты, капсульные у пневмококков); − целлюлярные (поверхностные и глубокие). Факторы вирулентности стрептококков весьма разнообразны. Прежде всего, это белки клеточной стенки, в комплексе с тейхоеевыми кислотами обеспечивающие адгезию стрептококков на клетках тканей и органов. М-белок стрептококков серогруппы А является протективным антигеном. Он нарушает процессы фагоцитоза, из-за сходства в строении с антигенами сердечной и почечной ткани становится причиной аутоиммунных процессов. Являясь суперантигеном, этот белок вызывает множественную активацию популяций лимфоцитов и медиаторов иммунной системы, что опосредованно обуславливает развитие синдрома токсического шока. Fc-белок стрептококков неспецифически связывается с Fc-фрагментом иммуноглобулинов классов G и А, обладает антикомплементарным и антифагоцитарным действием и также может обуславливать аутоиммунные конфликты. Это токсины - стрептолизин О и стрептолизин S. Стрептококки относятся к условно-патогенным микроорганизмам. Они являются обитателями слизистых оболочек верхних дыхательных путей, пищеварительного (род Enterococcus) и мочеполового трактов. Поэтому вызываемые ими заболевания могут иметь как эндогенное, так и экзогенное происхождение. При экзогенном инфицировании пути передачи инфекции могут быть различными, но чаще всего это воздушно-капельный, контактно - бытовой или артифициальный. Стрептококки способны поражать любые органы и ткани, вызывая различные гнойно-воспалительные заболевания: от ангины до сепсиса. Основным методом микробиологической диагностики стрептококковой инфекции является бактериологическое исследование. Материал для него определяется клиническими ее проявлениями. Для обнаружения в исследуемом материале антигенов могут быть использованы методы иммуноиндикации (реакции коагглютинации, латекс-агглютинации, ИФА). Серологическую диагностику (определение титра антигиалуронидазы и анти-О-стрептолизина) используют как вспомогательный метод диагностики ревматического процесса и оценки степени его активности.

Для лечения применяют пенициллин, сульфаниламидные препараты. В случаях тяжелого течения используют антитоксическую противоскарлатинозную сыворотку.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат:

1) слизь из зева при ангине и скарлатине;

2) кровь при эндокардите и подозрении на сепсис;

3) гнойное отделяемое из очага поражения;

4) мокрота при заболеваниях органов дыхания;

5) моча при заболеваниях почек и мочевыводящих путей. Чаще всего исследуют слизь из зева и кровь. Слизь из зева, взятую стерильным ватным тампоном, засевают на чашки с кровяным агаром. Посевы выдерживают в термостате при 37°С 18—20 ч (первый день). На второй день просматривают колонии, делают мазки, микроскопируют. Колонии, окруженные зоной гемолиза, отсевают в пробирку с бульоном Мартена или кровяным бульоном.

На третий день учитывают характерный рост стрептококка на бульоне Мартена и проводят определение серологической группы стрептококка с помощью реакции преципитации, определяют серологический тип стрептококка в реакции агглютинации на стекле по методу Гриффитса с типовыми антистрептококковыми сыворотками.

Посев 5—10 мл крови для бактериологического исследования производят в колбы с 10-кратным объемом сахарного бульона или печеночного бульона Китта — Тароцци. Посевы выдерживают в термостате 17,2—2 мес, делая контрольные высевы на чашки с кровяным агаром каждые 2—3 дня. Дальнейший ход исследования аналогичен бактериологическому изучению мазков из зева.

Серологический метод диагностики стрептококковых инфекций используют главным образом для определения антител к стрептолизину О, фибринолизину, гиалуронидазе.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Стрептококки, особенно группы А, высокочувствительны к пенициллину и в отличие от стафилококков, как правило, не приобретают к нему устойчивости. Эффективны сульфаниламидные препараты. При хронических процессах применяют вакцинотерапию, фаготерапию.

4. Прионы — инфекционные агенты белковой природы, вызывающие смертельные заболевания у животных и человека. Прионы представляют собой неправильно свернутые молекулы прионного белка PrP, способные «размножаться», превращая нормальные молекулы PrP в подобие самих себя. Оказалось, что у прионов есть нечто похожее на наследственную изменчивость, что позволяет им эволюционировать под действием естественного отбора. Они могут приспосабливаться к разным типам клеток и даже вырабатывать устойчивость к лекарствам.\

Вироиды – это лишенные оболочки, ковалентно замкнутые кольцевые молекулы РНК, состоящие из 246–371 нуклеотидов, которые служат причиной некоторых заболеваний высших расте ний. Определена первичная и наиболее вероятная вторичная структура ряда вироидов. После того как было показано, что кло нированная кДНК вироида обладает инфекционностью, стало возможным более глубокое изучение структурно функциональ ных особенностей вироидов.

Функции вирусных нуклеиновых кислот

Функция вирусных нуклеиновых кислот независимо от их типа состоит в хранении и передаче генетической информации. Вирусные ДНК могут быть линейными (как у эукариотов) или кольцевыми (как у прокариотов), однако в отличие от ДНК тех и других она может быть представлена однонитевой молекулой. Вирусные РНК имеют разную организацию (линейные, кольцевые, фрагментированные, однонитевые и двунитевые), они могут быть представлены плюс- или минус-нитями.

Плюс-нити функционально тождественны и-РНК, т. е. способны транслировать закодированную в них генетическую информацию на рибосомы клетки хозяина.

ирусные белки

Вирусные белки по локализации в вирионе делятся на:

-капсидные,

-белки суперкапсидной оболочки,

-геномные.

Белки капсидной оболочки у нуклеокапсидных вирусов выполняют защитную функцию - защищают вирусную нуклеиновую кислоту от неблагоприятных воздействий, - и рецепторную (якорную) функцию, обеспечивая адсорбцию вирусов на клетках хозяина и проникновение в них.

Белки суперкапсидной оболочки, как и белки капсидной оболочки, выполняют защитную и рецепторную функции. Это сложные белки - липо- и гликопротеиды. Некоторые из этих белков могут формировать морфологические субъединицы в виде шипованных отростков и обладают свойствами гемагглютининов (вызывают агглютинацию эритроцитов) или нейраминидазы (разрушают нейраминовую кислоту, входящую в состав клеточных стенок).

Отдельную группу составляют геномные белки, они ковалентно связаны с геномом и образуют с вирусной нуклеиновой кислотой рибо- или дезоксирибонуклеопротеиды. Основная функция геномных белков - участие в репликации нуклеиновой кислоты и реализации содержащейся в ней генетической информации, к ним относятся РНК-зависимая РНК-полимераза и обратная транскриптаза.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 19 1.Типы окислительно-восстановительных процессов у бактерий. Особенности дыхательного аппарата у бактерий. Методы культивирования анаэробов. 2. Реакции иммунитета. Механизм взаимодействия антитела и антигена. Специфичность реакций иммунитета. 3.Гонококк. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика осложненной и неосложненной гонореи. 4.Возбудитель лямблиоза. Характеристика возбудителя. Патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1. Типы окислительно-восстановительных процессов у бактерий. ЦПЭ аэробных, факультативно анаэробных и анаэробных бактерий. Особенности дыхательного аппарата бактерий.

По типу дыхания микроорганизмы делятся на: Аэробы - которые нуждаются в свободном кислороде. Облигатные (строгие) аэробы (например, некоторые виды псевдомонад) не могут жить и размножаться в отсутствии молекулярного кислорода, поскольку они используют его в качестве акцептора электронов. Молекулы АТФ образуются или при окислительном фосфорилировании с участием цитохромоксидаз, флавинзависимых оксидаз и дегидрогеназ. При этом, если конечным акцептором электронов является О2, выделяется значительное количество энергии. Анаэробы – получают энергию при отсутствии доступа кислорода путем ускоренного, но не полного расщепления питательных веществ. Облигатные анаэробы (например, возбудители столбняка, ботулизма) не переносят даже следов кислорода. Они могут образовывать АТФ в результате окисления углеводов, белков, липидов путем 3 субстратного фосфорилирования до пирувата. При этом выделяется сравнительно небольшое количество энергии. Существуют факультативные анаэробы, которые могут расти и размножаться как в присутствии кислорода воздуха, так и без него. Они образуют АТФ при окислительном и субстратном фосфорилировании.

Органеллами дыхания у большинства бактерий являются производные цитоплазматической мембраны – мезосомы, на которых локализуются специальные дыхательные ферменты типа цитохромоксидаз.

Для культивирования анаэробных микроорганизмов необходимо создание бескислородных условий, достигаемое различными методами.

Методы культивирования анаэробов.

Физические методы основаны на создании вакуума в специальных аппаратах — анаэростатах. Иногда воздух в них заменяют каким-либо другим газом, например СО2. Доступ кислорода в питательную среду можно затруднить, если культивировать анаэробов в глубине столбика сахарного агара или среды Вильсона — Блера, налитых в пробирки в расплавленном состоянии и остуженных до 43°С. По методу Вейона — Виньяля расплавленный и остуженный агар с посевным материалом набирают в стеклянные трубочки, которые запаивают с двух концов.

Химические методы заключаются в том, что при культивировании исследуемого материала на плотных средах в эксикатор помещают химические вещества, например пирогаллол и щелочь, реакция между которыми идет с поглощением кислорода. В жидкие питательные среды можно добавлять различные редуцирующие вещества: аскорбиновую или тиогликолевую кислоту.

Биологический метод основан на одновременном культивировании аэробов и анаэробов на плотных питательных средах в чашках Петри, герметически закупоренных. Вначале кислород поглощается растущими аэробами, посеянными на одной половине среды, а затем начинается рост анаэробов, посев которых сделан на другой половине. Наиболее удобна для культивирования анаэробов специальная среда Китта — Тароцци. В нее входят сахарный МПБ, который наливают в пробирки в количестве 10—12 мл, и кусочки вареных паренхиматозных органов. Перед употреблением среду Китта ,— Тароцци кипятят на водяной бане для удаления растворенного в ней кислорода. Среду заливают сверху стерильным вазелиновым маслом. Заметный рост анаэробов (помутнение) может наблюдаться через 48 ч и более в зависимости от количества посевного материала.

Рост изолированных колоний анаэробов можно получить при рассеве исследуемого материала по поверхности кровяно-сахарного агара, разлитого в чашки Петри. После посева чашки помещают в анаэростат. Исследуемый материал в убывающей концентрации можно засевать в высокий столбик агара. Образовавшиеся отдельные колонии анаэробов выделяют, распилив пробирку в месте роста. Колонии анаэробов для получения значительного количества биомассы отсевают затем на среду Китта — Тароцци. В качестве источника энергии для анаэробов используют глюкозу, добавление которой в питательную среду обязательно.

2. Реакции иммунитета – это взаимодействие антигена с продуктами иммунного ответа. В любой реакции иммунитета выделяют две фазы:

1) специфическую – обусловлена взаимодействием антигена с антителом и образованием комплекса АГ – АТ;

2) неспецифическую.

Все реакции иммунитета делятся на:

1) простые; участвуют два компонента (антиген и антитело);

2) сложные; участвуют три компонента и более (антиген, антитело, комплемент и т. д.).

Выделяют также:

1) прямые; результат учитывается визуально без специальных индикаторных систем;

2) непрямые; для учета требуются специальные системы индикации.

В основе реакции антиген–антитело лежит взаимодействие между эпито-

пом антигена и активным центром антитела, основанное на их пространст-

венном соответствии ( комплементарности). Это взаимодействие состоит в

установлении между эпитопом и активным центром антитела нековалент-

ных химических связей, в основе которых лежат следующие типы межмо-

лекулярных взаимодействий (ни одно из них не является специфичным для

реакции антиген–антитело)

Приобретенный иммунитет специфичен, и иммунная система способна точно различить два различных микроорганизма. Разумеется, в основе специфичности лежит способность распознающих участков молекул антител различать антигены . Эта способность узнавать единственный антиген и выделять его среди других имеет фундаментальное биологическое значение для распознавания своего и чужого. Неспособность отличить "свое" от "чужого" может привести к синтезу антител, взаимодействующих с компонентами собственного организма ( аутоантитела ), что заканчивается серьезными последствиями.

3.Гонокок.

Микробиологическая диагностика. Исследуют отделяемое уретры, влагалища, шейки матки, при бленнорее — гнойные выделения конъюнктивы глаза. При хронической гонорее исследуют также мочу. Основной метод лабораторной диагностики — микроскопия исследуемого материала. Наличие характерной триады признаков дает основание поставить лабораторный диагноз гонореи. Однако однократное обследование больных иногда бывает недостаточным. Для улучшения диагностики больным, у которых не обнаружен гонококк, рекомендуют проводить провокацию (инъекция гоновакцины, смазывание очагов поражения 1% люголевским раствором на глицерине), а затем ежедневно 3—7 дней бактериологическое исследование отделяемого из очагов поражения. В случае хронического течения инфекции, а также при острой гонорее, леченной антибиотиками, микроскопический метод может не дать положительных результатов, поэтому прибегают к микробиологическому исследованию патологического материала. Производят посев на свежеприготовленный сывороточный, кровяной или асцит-агар. Наряду с этим, начиная с 3-й недели заболевания, проводят серологическое исследование: ставят реакцию связывания комплемента (реакция Борде — Жангу) с сывороткой крови больного и гонококковым антигеном. Иногда прибегают к постановке кожно-аллергической пробы с гонококковой вакциной. Однако эта реакция может быть положительной в течение многих лет после перенесенного заболевания.

Профилактика и лечение. Профилактика сводится к санитарно-просветительной работе среди населения, своевременному выявлению и лечению больных. Специфическая профилактика не осуществляется. Для профилактики бленнореи новорожденным в конъюнктивальный мешок вводят по 1—2 капли 30% раствора альбуцида.

Морфология и биологические свойства. Гонококки напоминают кофейные зерна или бобы. Это парные кокки, обращенные друг к другу вогнутыми сторонами. Размер их в среднем 0,7X1,3 мкм. В гнойном отделяемом располагаются в цитоплазме лейкоцитов, сохраняя там жизнеспособность (явление незавершенного фагоцитоза). В чистой культуре имеют вид круглых или бобовидных кокков, разных по величине, расположенных беспорядочно. Хорошо красятся всеми анилиновыми красками. Грамотрицательны. Внутриклеточное расположение, бобовидная форма и грамотрицательная окраска составляют характерную триаду свойств, которыми гонококки отличаются от других диплококков. Однако под действием лекарственных средств и при хроническом течении болезни они могут изменяться: наряду с грамотрицательными встречаются грамположительные гонококки неправильной формы, разной величины. При этом могут образовываться L-формы гонококка. Они обычно шаровидной формы и разных размеров: наряду с крупными встречаются очень мелкие. Спор, не образуют, неподвижны. В патологическом материале вокруг гонококка образуется слизистое капсулоподобное вещество. Аэробы. К питательным средам очень требовательны. Растут на средах, содержащих нативный человеческий белок (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость), при рН 7,2— 7,4, с обязательным добавлением витаминов. Обязательное условие культивирования — достаточная влажность Среды И присутствие СО,2. Рост происходит в пределах 30—39°С при оптимуме 37°С. На асцит-агаре колонии мелкие (1—2 мм), напоминающие капельки росы; иногда образуются дочерние колонии. На асцитическом бульоне дают слабое помутнение, образуют пленку, которая оседает на дно пробирки. Из углеводов разлагают только глюкозу. На кровяном агаре гемолиза не дают. Экзотоксина гонококки не образуют. При разрушении клетки выделяют эндотоксин, введение которого внутрибрюшинно белым мышам вызывает их гибель.

4.Лямблиоз.

Возбудителем лямблиоза у человека является Lamblia intestinalis, относящаяся к типу простейших, классу жгутиковых

В организме человека и животных лямблии имеют две формы существования — вегетативную (трофозоит) и в виде спор (цист). В вегетативной форме лямблии преимущественно находятся в верхних отделах тонкой кишки. При попадании в толстую кишку вегетативные формы превращаются в цисты, которые выделяются с испражнениями во внешнюю среду.

Цисты лямблий сохраняются жизнеспособными во влажном кале в зависимости от температуры от суток до 3 недель, а в чистой воде — до 5 недель. Длительно они выживают на различных пищевых продуктах, особенно на влажных. При высыхании происходит незамедлительная гибель цист

линическими показаниями к лабораторному обследованию для исключения лямблиоза являются (А. Я. Лысенко и др., 2002 г.):

• наличие болезней пищеварительного тракта, их тенденция к хроническому течению с частыми обострениями;

• нейроциркуляторная дисфункция, особенно в сочетании с патологией пищеварительного тракта;

• стойкая эозинофилия крови;

• аллергические проявления;

• «диарея путешественников».

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования. Проводится микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий. Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо примененять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях (Сафаралиева, Турдыева, Барроу) и проводить многократные исследования (от 2-3 до 6-7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод всплывания. В большинстве случаев цисты лямблий в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении лямблий могут колебаться от 2-3 суток до 2-3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

В дуоденальном содержимом трофозоиты лямблий обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании лямблий в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов.

В последнее время для лабораторного подтвеждения лямблиоза применяют иммунологические методы исследования, основанные на выявлении АГ возбудителя в фекалиях или специфических AT в сыворотке крови. При размножении L. intestinalis в кишечнике в большом количестве продуцируется специфический АГ GSA 65. В фекалиях его определяют методом моноклональных AT. Специфические AT класса IgM можно выявлять в сыворотке крови больного методом ИФА уже на 10-14 день от начала инвазии, их наличие в диагностических титрах свидетельствует об остром лямблиозе. Использование ПЦР для обнаружения ДНК лямблий в биологических субстратах является высоко эффективным методом диагностики, но применяется в основном для проведения научных исследований.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 20 1.Простые и сложные методы окраски бактерий. Окраска по Граму. 2.Диагностическая реакция агглютинации. Ее значение в диагностике инфекционных заболеваний. РНГА и её практическое применение. 3.Менингококк. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика менингококковой инфекции. Менингококковое бактерионосительство. Методы его выявления. 4.Принципы классификации вирусов. Основные систематические группы. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1.Простые и сложные методы окраски бактерий. Окраска по Граму.

В бактериологии различают следующие способы окраски: 1)Негативные (С помощью специальных приемов окрашивается фон мазка и тогда на нем хорошо видны неокрашенные бактериальные клетки.) 2) Позитивные (окрашиваются сами бактериальные клетки, хорошо видимые на неокрашенном фоне мазка): а) Простые- Используется 1 краситель, мало информативен; б)Сложные - Используется 2 и более красителей: Дифференциально – диагностические: _ Метод Грамма_ Метод Циля-Нильсена; Специальные: _ Окраска спор_ Окраска капсул_ Окраска жгутиков_ Окраска включений. Метод Грамма – основной метод окраски бактерий в бактериологии, важен для идентификации бактерий, позволяет изучить морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Тинкториальные свойства – отношение к окраске по Граму. Все бактерии делятся на грамположительные и грамотрицательные в зависимости от строения клеточной стенки. Грамположительные бактерии – при окраске по Граму окрашиваются генциан-виолетом в синий цвет и не обесцвечиваются спиртом. Грамотрицательные бактерии – при окраске по Граму обесцвечиваются спиртом и докрашиваются фуксином в красный цвет. ЭТАПЫ ОКРАСКИ ПО МЕТОДУ ГРАМА. 1. генциан-виолет – 40 секунд; 2. раствор Люголя – 40 секунд; 3. спирт этиловый – 20 секунд; 4. промыть водой; 5. водный фуксин – 120 секунд.

2. Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия хлорида. Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка (клетки, «склеенные» антителами, име ющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА используют для: 1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях; 2) определения возбудителя, выделенного от больного; 3) определения групп крови с использованием моноклональных антител против алло-антигенов эритроцитов. Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок. Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увеличивающимися разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка. Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии.

3.. Менингококк. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции. Менингококковое бактерионосительство. Методы его выявления.

Менингококки - это диплококки, в мазках из материала, взятого от больного, имеют вид кофейных зерен. Спор не образуют, жгутиков не имеют, в организме образуют капсулу (исключение менингококки группы В). Грамотрицательны. Строгие аэробы. Требовательны к питательным средам. Растут только на средах с добавлением сыворотки. На сывороточном агареколонии нежные, прозрачные, средней величины. В сывороточном бульоне - помутнение и осадок на дне. Биохимическая активность невелика, ее изучение используется для дифференциации менингококков от других представителей рода. Менингококки крайне неустойчивы во внешней среде, что следует учитывать при доставке материала. У менингококков выделяют 4 группы антигенов. По капсульному полисахаридному антигену их делят на группы, которые обозначаются заглавными буквами латинского алфавита (А, В, С и т.д.). Большинство выделяемых в настоящее время штаммов относится к группам А, В, Y. К факторам вирулентности менингококков относят их способность к адгезии и колонизации клеток, инвазии и продукцию токсических и аллергенных факторов. Важным компонентом вирулентности менингококков являются капсульные полисахаридные антигены, защищающие их от фагоцитоза, а также продукция ферментов агрессии и защиты. Подавление менингококками фагоцитов способствует их распространению в организме и генерализации инфекционного процесса. Менингококковая инфекция - антропоноз. Источником инфекции является больной или бактерионоситель. Основной путь передачи - воздушно- капельный. Клиническими формами проявления менингококковой инфекции могут быть: назофарингит, эпидемический цереброспинальный менингит, менингококцемия, менингококковый эндокардит. Для диагностики используются различные методы исследования: бактериоскопические (мазок из осадка спинномозговой жидкости при эпидемическом цереброспинальном менингите), бактериологические, методы иммуноиндикации, серодиагностики.

4.Принципы классификации вирусов. Основные систематические группы.

Вирусные белки. По локализации в вирионе они делятся на капсидные, белки суперкапсидной оболочки и геномные. Белки капсидной оболочки у нуклеокапсидных вирусов выполняют защитную и рецепторную функции, т.е. защищают вирусную нуклеиновую кислоту и участвуют в адсорбции вирусов на клетках хозяина и проникновении в них. Белки суперкапсидной оболочки как и белки капсидной оболочки выполняют защитную и рецепторную функции. Это сложные белки – липо - и гликопротеиды. Отдельную группу составляют геномные белки. Они ковалентносвязаны с геномом и образуют с вирусной нуклеиновой кислотой рибо- или дезоксирибонуклеопротеиды. Основная функция геномных белков - участие в репликации вирусной нуклеиновой кислоты и реализации содержащейся в ней генетической информации. Представители царства Vira по типу нуклеиновой кислоты делится на 2 подцарства - рибовирусы и дезоксирибовирусы.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 21 1.Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактериальной популяции в жидкой питательной среде. Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон». Понятие “Quorum sensing”. 2.Реакция агглютинации по идентификации. Ее значение в микробиологических исследованиях. Получение агглютинирующих сывороток. 3.Туляремия. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. 4. Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1.Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактериальной популяции в жидкой питательной

среде. Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон». Понятие “Quorumsensing”

Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам, реже путем почкования. Актиномицеты, как и грибы, могут размножаться спорами. Актиномицеты, являясь ветвящимися бактериями, размножаются путем фрагментации нитевидных клеток. Грамположительные бактерии делятся путем врастания синтезирующихся перегородок деления внутрь клетки, а грамотрицательные — путем перетяжки, в результате образования гантелевидных фигур, из которых образуются две одинаковые клетки.

Фазы развития бактериальной популяции в жидкой питательной среде.

размножение бактерий на жидких средах в периодической культуре можно рассматривать как замкнутую систему. В этом процессе выделяют 4 фазы. 1 фаза – начальная, или лаг – фаза, или фаза задержки размножения, характеризуется началом интенсивного роста клеток, но скорость их деления остается невысокой;2.фаза – логарифмическая, или лог – фаза, или экспоненциальная фаза, она характеризуется постоянной максимальной скоростью деления клеток, и значительным увеличением числа клеток в популяции; 3. фаза – стационарная, она наступает тогда, когда число клеток в популяции перестает увеличиваться. Это связано с тем, что наступает равновесие между числом в вновь образующихся и гибнущих клеток. Число живых бактериальных клеток в популяции на единицу объема питательной среды в стационарной фазе обозначается как М – концентрация. Этот показатель является характерным признаком для каждого вида бактерий. 4.фаза – фаза отмирания (логарифмической гибели), которая характеризуется преобладанием в популяции числа погибших клеток и прогрессивным снижением числа жизнеспособных клеток популяции.

Понятие «культура», «штамм», «колония», «клон».

Штамм — чистая культура вирусов, бактерий, других микроорганизмов или культура клеток, изолированная в определённое время и в определённом месте. Поскольку многие микроорганизмы размножаются митозом (делением), без участия полового процесса, по существу, виды у таких микроорганизмов состоят из клональных линий, генетически и морфологическиидентичных исходной клетке. Культура микроорганизмов - популяция микроорганизмов на питательной среде, находящаяся в состоянии размножения или закончившая его. Чистая культура состоит из микроорганизмов одного вида, смешанная (первично выделенная из природных источников — почвы, воздуха, воды и др.) — из нескольких. Колония бактериальная — скопление микроорганизмов в процессе их роста, размножения на поверхности пищевых продуктов, почвы, при посеве в лабораторных условиях на различных питательных средах.Клон - культура микроорганизма (популяция клеток), полученная из одной (родительской) клетки путем бесполого размножения.

Понятие “Quorumsensing”.

Понятие quorumsensing - «чувство кворума» - быстрый способ общения микроорганизмов друг с другом посредством сигнальных молекул.

2.Реакция агглютинации по идентификации. Ее значение в микробиологических исследованиях. Получение агглютинирующих сывороток.

Агглютинирующая сыворотка — сыворотка крови животных, способная вызывать реакцию агглютинации, получаемая при иммунизации животного определённой бактериальной культурой.

Такая сыворотка вызывает агглютинацию при взаимодействии именно с теми микроорганизмами, которые вводились животному, и не реагирует с другими (или реагирует очень слабо с родственными видами).

Такое свойство агглютинирующих сывороток позволяет определять с их помощью принадлежность микроорганизма к определённому виду. Во время инфекционного заболевания сыворотка больного также приобретает агглютинирующие свойства, с помощью чего можно установить вид возбудителя, поставив реакцию агглютинации с сывороткой больного и антигенами микроорганизма.

Агглютинирующие сыворотки могут обладать различной силой действия - минимальное количество сыворотки, при котором она способна агглютинировать называется титром сыворотки. При получении иммунных сывороток при помощи гипериммунизации животных их титр выше (до десятитысячных миллилитра), чем у сывороток больных. Титр сывороток, полученных искусственной иммунизацией, обычно значительно выше титра сывороток больных (до сотых долей миллилитра).

Для получения агглютинирующих сывороток иммунизацией животных чаще всего используют кроликов, овец и лошадей. Кролики - наиболее подходят для этой цели, так как сыворотка кроликов обладает слабыми агглютинирующими свойствами, а у сыворотки крови гипериммунизированных кроликов групповая агглютинация выражена более слабо, чем у бараньей и лошадиной сывороток.

Иммунизацию проводят как живыми культурами микроорганизмов, так и мертвыми или частями микробных клеток.

3.Туляремия. Биология возбудителя. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

Возбудитель туляремии отнесен к роду Francisellatularensis подразделяют на три географические расы (подвиды). F.tularensis - мелкиекоккобактерии; неподвижны, не образуют спор, продуцируют капсулообразное вещество. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Возбудитель туляремии, особенно в первых генерациях, не растет на искусственных питательных средах, что является одним из существенных признаков при его идентификации. Для поддержания лабораторных культур используют специальные (с добавлением желтка или цистина) среды, на которых через 2-5 суток формируются мелкие колонии с ровными краями беловатого цвета. Ферментативная активность туляремийного микроба не выражена. Возбудитель туляремии имеет Vi- и О-антигены. F.tularensis является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность связана со способностью развиваться в фагоцитах и подавлять их киллерную активность, образовывать капсулу, эндотоксин, нейраминидазу. Антигены клеточной стенки обладают свойствами аллергенов, что ведет к сенсибилизации инфицированного организма и усугубляет действие других факторов вирулентности. Естественные хозяева возбудителя - грызуны, водные крысы, домовые мыши. Заражение людей происходит при прямом контакте с больными животными, их трупами, через объекты внешней среды и пищевые продукты, инфицированные выделениями больных грызунов. Возможен и трансмиссивный путь передачи через укусы кровососущих членистоногих. От больных людей заболевание не передается. Возбудитель может проникать в организм через слизистые оболочки верхних дыхательных путей, глаз, желудочно-кишечного тракта и даже через неповрежденную кожу. Заболевание протекает тяжело, продолжается в среднем 4-6 недель и заканчивается, как правило, выздоровлением. Для микробиологической диагностики используют методы серодиагностики, иммуноиндикации, постановку аллергической диагностической пробы с тулярином. В специализированных лабораториях проводят бактериологическое исследование (материал для исследования определяется клинической формой болезни). Культуру выделяют, заражая лабораторных животных. Для лечения туляремии используют антибиотики: хлортетрациклин, левомицетин, стрептомицин. Специфическая профилактика осуществляется живой туляремийной вакциной.

4.Паразитарные инвазии. Классификация. Пути передачи. Периоды течения инвазий

Инвазия (от лат. invasio — вторжение, внедрение) — заражение человека, животных и растений паразитами. Инвазия может произойти активно, когда паразит нападает или внедряется в организм хозяина через поврежденные и неповрежденные кожные покровы, или пассивно, когда паразит вносится в организм с водой, пищей.
проникновение в организм паразитов с последующим их взаимодействием с организмом хозяина
паразитарные заболевания, возбудителями которых являются животные или протисты

Заболевания, вызываемые животными-эндопаразитами (гельминтозы — глистные инвазии, акариазы, миазы — болезни животных, вызываемые оводами) и мухами, все авторы однозначно относят к инвазиям. Менее ясно, употребим ли этот термин к болезням, которые вызываются насекомыми-эктопаразитами (таким, как педикулёз или фтириаз). вот что нашла

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Специальность (шифр) Дисциплина: микробиология, вирусология и иммунология Лечебное дело 060101.65 Форма обучения очная ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ БИЛЕТ № 22 1.Питательные среды. Требования, предъявляемые к ним. Классификация питательных сред. 2. Цитокины. Их классификация и значение в развитии иммунного ответа. 3.Бруцеллез. Биология возбудителя. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. 4.Особенности противовирусного иммунитета. Внутри- и внеклеточные механизмы устойчивости к вирусам. Зав. кафедрой Профессор _____________________________________ Г.М. Шуб

1.Питательные среды. Требования, предъявляемые к ним. Классификации питательных сред.

Питательная среда — вещество или смесь веществ, применяемая для культивирования макро- и микроорганизмов. Существует множество стандартных биологических питательных сред. Питательные среды должны содержать источники органогенов,неорганические соединения в виде различных солей, факторы роста, т.е.отвечать основному требованию к питательным средам - питательности.Кроме того, питательные среды, используемые в бактериологии, должныотвечать еще некоторым требованиям. Они должны быть изотоничны,стерильны и иметь определенную рН (кислотность) среды, определенный рН(электронный) потенциал и быть по возможности прозрачными.Для выращивания и изучения различных микроорганизмов предложенобольшое количество питательных сред. В зависимости от их происхождения,состава, назначения и консистенции (плотности) все среды можноподразделить на несколько групп.Классификация питательных сред по происхождению: 1)естественные - приготовленные из естественных продуктов (яичноглицериновая, картофельно-глицериновая среда, молоко, мясная вода и пр.); 2)искусственные - приготовленные из веществ, искусственно полученных из естественных продуктов (пептон, аминопептид, дрожжевой экстракт, казаминокислоты и т.п.), например, пептонная вода для культивирования холерного вибриона 3)синтетические - среды известного состава, приготовленные из химически чистых неорганических и органических соединений;Классификация питательных сред по составу: 1)простые - мясо-пептонный бульон (МПБ), мясо-пептонныйагар(МПА), агарХоттингера, бульон Хоттингера;2)сложные - это простые среды с добавлением дополнительногопитательного компонента. Классификация питательных сред по назначению: 1)основные - пригодные для культивирования разных бактерий;2)элективные (селективные) - пригодные для культивирования бактерийодного рода или вида;3)дифференциально-диагностические - среды, на которых рост однихвидов бактерий отличается от других;4)специальные - для определения отдельных свойств разных бактерий. Классификация питательных сред по плотности (консистенции): 1)жидкие;2)полужидкие (содержат 0,15 - 0,7% агар-агара);3)плотные (содержат 1,5 - 2% агар-агара).В связи с разнообразием питательных потребностей разныхмикроорганизмов создать универсальную питательную среду, пригодную длякультивирования любых бактерий, практически невозможно

2.Цитокины. Их классификация и значение в развитии иммунного ответа.

Цитокины — это небольшие регуляторные пептиды, участвующие в иммунорегуляции, хеморегуляции и биорегуляции в целом, которые секретируются неэндокринными клетками (в основном, иммунными) и оказывают местное воздействие на соседние клетки-мишени. Цитокины вместе с факторами роста относятся к гистогормонам (тканевым гормонам).

Цитокины вместе с продуцирующими их клетками бразуют «микроэндокринную систему», которая обеспечивает взаимодействие клеток иммунной, кроветворной, нервной и эндокринной систем. Образно можно сказать, что с помощью цитокинов клетки иммунной системы общаются друг с другом и с остальными клетками организма, передавая от цитокин-продуцирующих клеток команды на изменение состояния клеток-мишеней. И с этой точки зрения цитокины можно назвать для иммунносй системы «цитотрансмиттерами», «цитомедиаторами» или «цитомодуляторами» по аналогии с нейротрансмиттерами, нейромедиаторами и нейромодуляторами нервной системы.

Виды цитокинов

1.Интерлейкины (ИЛ) и фактор некроза опухолей (ФНО)
2.Интерфероны.
3.Малыецитокины.
4. Колониестимулирующие факторы (КСФ).

Дата добавления: 2019-08-31; просмотров: 552; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

12 3 4 5 6 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!