Состав синтетических сред для разбавления и хранения спермы хряков
| Компоненты | Среда | |
| ГХЦС-8 | ГХЦ | |
| Глюкоза ГОСТ 6038–51 или медицинская (мо- лекулярная масса 198,7), г | 40 | 60 |
| Хелатон (молекулярная масса 372,24), г | 2,6 | 3,7 |
| Натрий лимонно-кислый трехзамещенный (мо- лекулярная масса 357,16), г | 3,8 | 3,56 |
| Аммоний сернокислый (молекулярная масса 132,14), г | 1,8 | – |
| Натрий двууглекислый (молекулярная масса 84,1), г | 0,5 | 1,2 |
| Вода дистиллированная, мл | 1000,0 | 1000,0 |
Компоненты среды или сухие заготовки хранят в сухом теп- лом помещении. Среду готовят на дистиллированной воде. В стерильную колбу наливают необходимый объем свежей дис- тиллированной воды, растворяют в ней компоненты, после взвешивания их на аналитических весах, или сухую заготовку,
стерилизуют в течение 5–10 мин в водяной бане при температу- ре 100°С, охлаждают до 42°С и добавляют препарат «Спермо- сан-3» из расчета 250–300 тыс. ед. на 1 л среды. Колбу закры- вают стерильной пергаментной бумагой, которую фиксируют резиновым кольцом. Приготовленную среду хранят не более одних суток при температуре 2–5°С. Сухую заготовку среды можно хранить не более 6 месяцев с момента изготовления. Не реже одного раза в месяц приготовленную среду исследуют на бактериальную загрязненность. Сперму разбавляют через 20–30 мин после получения в соотношениях от 1:1 до 1:5 и хранят до трех суток при комнатной температуре в негерметически закры- тых целлофаном или пергаментной бумагой стеклянных сосу- дах. Для определения степени разбавления спермы можно поль- зоваться табл. 30.
|
|
|
Таблица 30
Степень разбавления спермы хряков из расчета получения в 100 мл 3–4 млрд подвижных сперматозоидов
| Концентрация половых клеток в свежевзятой сперме, млн/мл 100 | Степень разбавления спермы при подвижности спермиев, баллы | ||
| 9 | 8 | 7 | |
| 100 | 1:2 | 1:2 | 1:1 |
| 120 | 1:3 | 1:2 | 1:2 |
| 140 | 1:3 | 1:3 | 1:2 |
| 160 | 1:4 | 1:3 | 1:3 |
| 180 | 1:4 | 1:4 | 1:3 |
| 200 | 1:5 | 1:4 | 1:4 |
| 220 | 1:5 | 1:5 | 1:4 |
| 240 | 1:6 | 1:5 | 1:5 |
| 260 | 1:6 | 1:5 | 1:5 |
| 280 | 1:6 | 1:6 | 1:5 |
| 300 | 1:8 | 1:6 | 1:5 |
| 320 | 1:8 | 1:7 | 1:6 |
| 340 | 1:9 | 1:7 | 1:6 |
| 360 | 1:10 | 1:8 | 1:6 |
Во время хранения сперму необходимо осторожно переме- шивать не реже двух раз в сутки.
Если сперму хранят при пониженных температурах, но не ниже 6°С, то на 1 л синтетической среды (ГХЦС-8, ГХЦ) до- бавляют 30–40 мл желтка куриных яиц. Яйца следует хранить при температуре 2–5 градусов не более 7 суток.
По данным Н.Т. Плишко (1964, 1965, 1968), в синтетической среде ГХЦ 60–70 % спермиев сохраняют подвижность в течение 5–6 суток, а 50 % – в течение 10 суток. При однократном осеме- нении 52 свиноматок спермой, сохраненной в этой среде в тече- ние 2, 3 и 4 суток, оплодотворяемость составила 70–80 %, а 5–7 суток – 40 %. При осеменении свиноматок спермой, сохранен- ной в среде ГХЦ в течение 2–3 суток, средняя оплодотворяе- мость составила 82,6 %. В другом опыте Н.Т. Плишко устано- вил, что сперма, сохраняемая в среде ГХЦ до 4 суток, позволяет получать оплодотворяемость свиноматок в пределах 75–95 %.
|
|
|
По данным Н.Г. Балашова и др. (1968), подвижность спер- миев с оценкой 6 баллов в среде ГХЦ сохраняется до 6 суток, абсолютный показатель переживаемости составляет 770, а оп- лодотворяемость после первого осеменения была 87,1 %.
И.Д. Коврижной и О.И. Игнатенко (1969) при изучении сре- ды ГХЦ установили, что подвижность спермиев в сперме, раз- бавленной этой средой и сохраненной в течение 1, 2, 3 и 4 су-
ток, составляла соответственно 7,2; 6,3; 4,8 и 3 балла, абсолют- ный показатель переживаемости вне организма – 650, а средняя оплодотворяемость свиноматок составила 69,6. В ГДР при ис- пытании синтетической среды ГХЦ I. Tshinkel et al. (1970) уста- новили, что после суточного хранения спермы, разбавленной средой ГХЦ, с оценкой 6 баллов было 86 % эякулятов, после двухсуточного хранения – 60 % и трехсуточного – 37 %. Опло- дотворяемость свиноматок, осемененных спермой, сохраненной 1–3 суток, была практически одинаковой – 65,5–67,6 %.
В исследованиях Н.Г. Балашова, М.В. Силаевой (1967, 1971) при сравнительном изучении переживаемости спермы хряков в различных синтетических средах с хелатоном установили наи- лучшую переживаемость спермиев в среде ГХЦС-8.
|
|
|
По данным М.В. Силаевой (1970), оплодотворяемость сви- номаток после первого осеменения спермой, разбавленной сре-
дами ГХЦ, ГХЦЖ, ГХЦЖ-У, ГХЦС-8 и ГХЦСЖ-8 и сохранен- ной в течение трех суток, составила соответственно 81,8; 74,4; 52,3; 72,7 и 70,4 %.
На основании многочисленных лабораторных исследований и математической обработки данных В.М. Прокопцева и др. (1974, 1976) разработали новую среду ГБУ-9, которая имеет следующий состав, г:
1. Глюкоза медицинская – 9,72 г.
2. Борная кислота – 8,65 г.
3. Натрия цитрат трехзамещенный – 6,12 г.
4. Натрий двууглекислый – 0,75 г.
5. Калия цитрат двухзамещенный – 2,56 г.
6. Унитиол (2-, 3- димеркаптопропансульфонат натрия) – 0,42 г.
7. Спермосан-3 – 6,08 г.
8. Вода дистиллированная – 1000 мл.
По данным авторов, сперма, разбавленная ГБУ-9-средой, сохраняет достаточную для результативного осеменения свино- маток подвижность сперматозоидов в течение 4–5 суток хране- ния при комнатной температуре. Кроме того, в исследованиях В.М. Прокопцева (1981) было установлено, что оплодотворяе- мость свиноматок, осемененных спермой, разбавленной в среде ГБУ-9, была выше, чем при использовании среды ГХЦС-8.
|
|
|
Из приведенных литературных данных видно, что из всех разработанных в последнее время синтетических сред для раз- бавления и хранения спермы хряков наиболее широкое приме- нение в практике искусственного осеменения свиней получила ГХЦС-среда.
Единственный недостаток сухих заготовок ГХЦС-среды в том, что при хранении более 3 месяцев после изготовления они теряют свои физические (изменение цвета) и биологические (снижение выживаемости спермиев) качества. При изучении со- вместимости компонентов ГХЦС-среды в различных их сочета- ниях было установлено, что в смеси, содержащей только глюко- зу и сульфат аммония, изменение цвета наступало через 6 меся- цев (Н.Г. Балашов и др., 1988). С учетом этого в настоящее вре- мя при изготовлении сухих заготовок ГХЦС-среды в полиэтиле- новых пакетах отделяют сульфат аммония, что позволяет увели-
чить срок хранения этой среды до 6 месяцев. Для более дли- тельного хранения сухих заготовок ГХЦС-среды сотрудниками ВГНКИ ветпрепаратов – Н.Г. Балашов и др. (1988) была разра- ботана новая технология производства среды ГХЦСН-РУ-1.
Показатели подвижности, выживаемости сперматозоидов хряков и коэффициент относительной безвредности сред при применении ГХЦСН-РУ-1-среды соответствует требованиям ГОСТ 17637–72.
По данным Н.Г. Балашова и др. (1988), в процессе хранения ГХЦСН-РУ-1-среды ее физические свойства (рН, осмотическое давление) не изменились на протяжении 56 месяцев, а выжи- ваемость спермиев хряков в среде, сохраненной в течение 32 месяцев при температуре 2–8°С, была в пределах допустимых норм. Средняя оплодотворяющая способность спермы хряков, разбавленной в ГХЦСН-РУ-1 и ГХЦС-средах и хранившейся при комнатной температуре в течение 1–3 суток, составила 92,3 %, а через 4 суток хранения спермы оплодотворяемость свиноматок снизилась. При использовании ГХЦСН-РУ-1-среды она была 73,3 %, а при использовании ГХЦС-среды – 70,3 %.
На основании результатов производственных испытаний после первого осеменения из 144851 свиноматки, осемененной спермой хряков разбавленной ГХЦСН-РУ-1-средой, и из 10879 свиноматок, осемененных спермой хряков, разбавленной ГХЦС-средой, оплодотворилось соответственно 124047 (85,6 %) и 7589 (69,8 %) животных (Н.Г. Балашов и др., 1988).
Дозирование спермы хряков
Один из резервов повышения эффективности свиноводст- ва – более интенсивное использование ценных в генетическом отношения производителей не только путем увеличения разны- ми средствами их спермопродукции, но и рационального дози- рования спермы за счет возможно доступного снижения числа спермиев в дозе без ущерба для результатов осеменения. Есть все основания полагать, что принятая в настоящее время спер- модоза при определенных условиях может быть понижена.
Доза (объем спермы и число подвижных спермиев в ней) прежде всего определяется анатомо-физиологическими особен-
ностями половых органов свиноматок и техникой введения спермы. Исходя из того, что у свиней маточный тип естествен- ного осеменения, для их нормального оплодотворения требует- ся не только определенное число подвижных спермиев, но и оп- ределенный минимальный объем спермы. Это предложение бы- ло подтверждено еще в первых опытах, проведенных в 1931– 1932 гг. в ВИЖе (В. К. Милованов): по мере увеличения объема вводимой спермы от 5 до 100 мл закономерно повышались оп- лодотворяемость и многоплодие свиноматок. В дальнейшем на основании глубоких исследований по изучению влияния объема спермы и числа спермиев в дозе на результативность осемене- ния ученые пришли к выводу, что оптимальным объемом спер- мы, вводимой при искусственном осеменении, следует считать 100–150 мл, или 1 мл на 1 кг живой массы свиноматки, с содер- жанием не менее 5–12 млрд спермиев.
В литературе имеется множество и других рекомендаций, в которых предлагается использовать дозу спермы с наличием от 1 до 30 млрд подвижных спермиев. В результате исследований С.И. Сердюк установил, что даже при однократном осеменении свиноматок свежевзятой и разбавленной в разной степени спер- мой объемом 100 мл и наличием в ней 1,5 млрд активных спер- миев можно получать высокие оплодотворяемость и многопло- дие свиноматок. Результаты первого опыта С. И. Сердюка пред- ставлены в табл. 31.
Таблица 31
Дата добавления: 2019-07-17; просмотров: 497; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!