Вопрос 15. Жгутики бактерий, их функциональное значение. Химический состав. Способы обнаружения.
Жгутики – спирально изогнутая полая нить, образованная субъединицами флагеллина. Жгутики являются органом движения плавающих бактерий.
Место прикрепления жгутика имеет сложное строение и состоит из базальной структуры и «крюка».У грамположительных бактерий в состав базальной структуры входит 1 пара колец, у грамотрицательных – 2 пары. Эти кольца играют роль «приводного диска». Вся конструкция(базальная структура и крюк) выполняет роль хемомеханического преобразователя. Жгутики совершают поступательные и вращательные движения. Для жгутикового аппарата характерна периодическая изменчивость. В частности, некоторые бактерии выработали систему вариабельности антигенных характеристик жгутиков.
Подвижность определяют микроскопией препаратов в раздавленной или висячей капле. Можно также определять с помощью внесения культуры бактерий в столбик полужидкого агара или посевом бактерий в водный конденсат скошенного столбика агара.
Помимо жгутиков, поверхность многих бактерий покрыта микроворсинками. Они встречаются как у подвижных, так и у неподвижных форм. Они способны увеличивать площадь поверхности бактериальной клетки, что дает ей преимущество в утилизации питательных веществ из окружающей среды. Известны специализированные микроворсинки –фимбрии и пили.
Основная функции фимбрии – прикреплении бактерий к субстратам, что делает их важным фактором колонизации и патогенности.
|
|
|
Пили – жесткие цилиндрические образования, участвующие в конъюгации бактерий. Пили образует белок пилин. Их идентифицируют с помощью донорспецифических бактериофагов, адсорбирующихся на пилях и лизирующих клетки.
Вопрос 16. Простые и сложные методы окраски. Окраска по Граму.
Простые методы окраски заключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю — Нильсену и др.) включают последовательное использование нескольких красителей и имеют дифференциально-диагностическое значение. Отношение микроорганизмов к красителям расценивают как тинкториальные свойства. Существуют специальные методы окраски, которые используют для выявления жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида и разных цитоплазматических включений.
Механизм и этапы окраски по Граму
1. На фиксированный мазок наносят раствор генциановогофиолетового через полоску фильтровальной бумаги. Через 1-2 мин её снимают, а краситель сливают;
2. Наносят раствор Люголя на 1-2 минуты;
3. Обесцвечивают препарат этиловым спиртом в течение 30-60 секунд до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя;
4. Промывают препарат водой;
5. Докрашивают мазок водным раствоом фуксина в течении 1-2 мин, промывают водой, высушивают и микроскопируют.
|
|
|
* Грамположительные бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные - в красный.
Вопрос 17. Окраска по Цилю-Нильсену.
Окраска по Цилю-Нильсену используется для выявления кислотоустойчивых бактерий.
1. На фиксированный мазок наносят карболовый раствор фуксина через полозку фильтровальной бумаги и подогревают до появления паров в течение 3-5 минут;
2. Снимают бумагу, промывают мазок водой;
3. На мазок наносят 5% раствор серной кислоты или 3% раствор солянокислого спирта на 1-2 мин для обесцвечивания;
4. Промывают водой;
5. Докрашивают раствор водным раствором метиленового синего в течение 3-5 минут;
6. Промывают водой, высушивают, микроскопируют.
При обработке препарата серной кислотой некислотоустойчивые бактерии обесцвечиваются и окрашиваются метиленовым синим в голубой цвет, а кислотоустойчивые бактерии (например микобактерии) остаются окрашенными фуксином в красный цвет.
Вопрос 18. Окраска по Гинсу-Бурри. Окраска по Романовскому-Гимзе.
Окраска по Бурри-Гинсуиспользуется для выявления макрокапсул:
1. На предметном стекле смешивают каплю взвеси микробов с каплей туши и при помощи стекла с шлифовальным краем готовят мазок (равномерно размазывают смесь туши с взвесью микробов по предметному стеклу). Затем мазок высушивают и фиксируют;
|
|
|
2. На мазок наносят водный раствор фуксина на 1-2 мин;
3. Промывают водой, высушивают на воздухе и микроскопируют. При этом бактерии окрашиваются в красный цвет, а неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно-розовом фоне.
Окраска по Романовскому-Гимзе используется для выявления риккетсий и хламидий, спирохет, простейших.
1. Мазки, фиксированные в метиловом спирте, окрашивают красителем Романовского-Гимзе в течение 40-120 минут;
2. Ополаскивают в дистиллированной воде. Высушивают на воздухе. Микроскопируют;
Ацидофильные образования в составе микроорганизмов окрашиваются в различные оттенки красного цвета, а базофильные в цвета от пурпурного до синего.
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 1213; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!