Вопрос 12. Капсула, её биологическая роль. Методы выявления.
Капсула – слой аморфного, сильно обводнённого вещества, окружающий клеточную стенку многих бактерий. В состав большинства бактериальных капсул входят сложные полисахариды. Капсулы также могут содержать соединения азота. Капсулы некоторых болезнетворных бактерий формируют полисахариды и полипептиды, образованные мономерами D-глутаминовой кислоты, что лучше защищает бактерию от ферментативных воздействий фагоцитов. Капсульные антигены многих патогенных бактерий проявляют выраженные иммуногенные свойства; связывание антитела с капсулой изменяет её светопреломляющие характеристики. Функции:
· делает оболочку клетки более плотной и прочной;
· предохраняет бактерии от воздействия бактерицидных факторов;
· обеспечивает адгезию на различных субстратах;
· может содержать запасы питательных веществ.
Методы выявления капсул:
· Окраска по Бурри-Гинсу;
· Реакция набухания по Нойфельду.
Вопрос 13. Включения бактериальной клетки. Волютиновые зёрна и методы окраски.
В цитоплазме клеток бактерий часто содержатся гранулы различной формы и размеров. Их присутствие нельзя рассматривать как постоянный признак микроорганизма, обычно они в значительной степени связаны с физическими и химическими условиями среды обитания.
Многие внутрицитоплазматические гранулы состоят из соединений, которые служат для микроорганизмов источником энергии и углерода. Такие соединения обычно образуются, когда микроорганизм снабжается достаточным количеством питательных веществ, и используются, когда он попадает в неблагоприятные в отношении питания условия. В качестве резервных питательных веществ в клетках бактерий могут накапливаться вещества, состоящие из углеводов — гранулы гликогена (крахмала). При недостаточном поступлении углеродсодержащих веществ в питательную среду гранулы гликогена или гранулезы постепенно исчезают из клеток бактерий.
|
|
|
Большая часть бактерий в качестве резервного вещества синтезирует полимер из в - оксимасляной кислоты (поли-бета-оксимасляная кислота). У некоторых видов бактерий в клетках накапливаются гранулы жира и волютина.
Волютиновые гранулы, называемые еще метахроматическими гранулами, состоят преимущественно из пирофосфатов и служат запасным источником фосфора. Они также нужны для синтеза нуклеопротеидов. Волютин обнаруживается в виде крупных, хорошо видимых гранул, образующихся в больших количествах на средах, богатых глицерином или углеводами. Имеются у дифтерийной палочки, что и отличает её от ложнодифтерийной.
Для выявления волютиновых зёрен используют метод окраски по Нейссеру (они окрашиваются в тёмно-синий цвет, т.к. имеют щелочную реакцию; цитоплазма окрашивается в жёлтый цвет, т.к. имеет кислую реакцию).
|
|
|
Вопрос 14. Спорообразование у бактерий. Стадии, функциональное значение. Методы окраски спор.
Спора – особая форма покоящихся клеток со сведённой к нулю метаболической активностью. Они резистентны к нагреванию, радиации, высыханию и воздействию химических веществ, но абсолютно лабильны к воздействию открытого огня.
Споруляция начинается сразу после возникновения дефицита питательных веществ и продолжается около 8 часов. Её стимулирует внесение в среду глюкозы, фосфора, аммиака, а угнетает – пептон, лактоза, хлориды натрия и кальция. Для споруляции необходима индукция гена spoO, транскрипция которого запускает последовательную транскрипцию всех остальных необходимых генов.
Стадии споруляции:
1. Подготовительная: прекращение деления и увеличение количества липидных включений;
2. Предспора (примордиальная спора): в клетке появляется эллиптическая оболочка, окружающая участок цитоплазмы с изменёнными плотностью и тинкториальными свойствами;
3. Через 30 минут появляется оболочка и происходит увеличение коэффициента светопреломления;
|
|
|
4. Созревание споры сопровождается её уплотнением и снижением метаболической активности клетки.
После созревания и лизиса родительской клетки спора освобождается, сохраняясь в покоящемся состоянии до попадания в благоприятные условия.
Прорастание спор:
· различные химические вещества, повышение температуры и влажности индуцируют активацию споры. В оптимальных условиях после этого происходит прорастание спор;
· под воздействием автолизинов происходит расщепление кортекса, поглощение воды и набухание. Внешне эти процессы проявляются увеличением споры и уменьшением коэффициента светопреломления;
· при этом в споре происходят физиологические изменения: усиливается дыхание, увеличивается активность ферментов, происходит выделение аминокислот и пептидов. Спора утрачивает терморезистентность, лопается в произвольном месте и из неё выходит вегетативная клетка, снабжённая у подвижных видов жгутиковым аппаратом.
Методы окраски спор. Поскольку споры сильно преломляют свет, то распознавание их при микроскопии не представляет затруднений. В спорных случаях прибегают к специальным методам окраски: метод Циля-Нильсена в модификации Мюллера(ярко-красные споры четко выделяются на голубом фоне цитоплазмы), метод Пешкова (споры окрашиваются в голубой или синий цвета, цитоплазма — в розовый).
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 1003; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!