ГЛУБОКОЕ ЗАМОРАЖИВАНИЕ СПЕРМЫ 11 страница
Наряду с этим упомянутый ГОСТ предусматривает использование доз замороженной спермы с содержанием не менее 15 млн активных спермиев, что не имеет под собой ни теоретических, ни практических обоснований.
Замороженная сперма быков с активностью не ниже 4 баллов и выживаемостью при 38 °С не менее 7 часов имеет равнозначную оплодотворяемость при использовании для осеменения доз с содержанием 15, 10, 5 и 3 млн активных спермиев, что однозначно доказано изложенными выше многочисленными исследованиями. Поэтому мы считаем целесообразным установить стандартную дозу в пределах 15...5 млн активных спермиев. При этом главный показа-
Таблица 19. Допустимые показатели качества замороженной спермы
Показатель Допустимые требования
Внешний вид, цвет Однородная жидкость желтого или светло-
желтого цвета
Количество подвижных спермиев, баллов, (%), не менее 4(40)
Количество спермиев с прямолинейным поступательным
движением в дозе, млн 5...15
Объем дозы, см3 0,1...1,0
Выживаемость при 38 °С, ч. не менее 7
Количество спермиев с аномальной морфологией, % не более 18
Коли-титр не менее 0,3 (отрицательный)
Микроорганизмы, вызывающие инфекционные заболевания не допускаются
Количество микробных тел в дозе не более 100
Оплодотворяющая способность, % не менее 50
тель качества спермы — ее оплодотворяющая способность — должен быть не ниже 50 %.
Наряду с этим стандартизировать можно только ту продукцию, которая способна сохранять свои первоначальные показатели, по которым она допущена к использованию: активность, объем, санитарный уровень, оплодотворяемость и пр. А поэтому спермодоза должна иметь надежную стандартную упаковку. Для замороженной спермы это герметическая упаковка в пайетты, облицованные гранулы или ампулы.
Одним из обязательных контролен поступающей в. продажу замороженной спермы является определение количества активных спермиев в дозе. Для этого применяется разработанный нами фотограмметрический метод, который описан ниже.
Сущность метода заключается в микрофотосъемке и подсчете движущихся спермиев после оттаивания. Для этого необходимо иметь реактивы и аппаратуру для черно-белой обработки фотоматериалов, фотопленку чувствительностью 130 ГОСТ (160 ASA), 24x36 мм, трехзамещен-ный лимоннокислый натрий 2,8 % раствор, баню водяную с постоянной температурой 37±0,5 °С, микроскоп с оптической системой, обеспечивающей увеличение в 60...140 раз (объектив 5х и окуляр 12...28Х) для наблюдения и в 25 раз (объектив и окуляр фотонасадки 5х) для фотографирования
91
камеру для подсчета клеток крови глубиной 100 микрометров, набор меланжеров и микрогаптеток.
Дозу глубокозамороженной спермы в виде облицованных гранул, соломинок или пробирок помещают в водяную баню (t 37±0,5 °С) до полного оттаивания. Открытые гранулы оттаивают в пробирке (емкостью 5 см3) в 2,8 % растворе лимоннокислого натрия. Концентрацию спермиев путем разбавления 2,8 % раствором трехзамещенного лимоннокислого натрия при температуре 37±0,5 °С доводят до 1,5...2 млн в мл. Тщательно перемешивают пробу, микропипеткой заправляют подогретую (t 37+0,5 °С) счетную камеру и помещают ее на термостатирующий столик микроскопа.
Устанавливают в микроскопе увеличение в 60...140 раз и добиваются резкого изображения объекта. Регулировкой системы освещения (применяется осветитель = 20 вт, 12 В с реостатом) добиваются эффекта темного поля, экспонируют 2 секунды три участка камеры на стандартную пленку (окуляр фотонасадки 5х, объектив 5х). При этом в каждом кадре размещают по 15 больших квадратов счетной камеры. Проявляют негативную пленку и готовят три фотографии. Живые спермин оставляют на фотографии трассы своего движения, а мертвые обычную форму. Это дает возможность различать на фотографии живые и мертвые спермин.
После этого подсчитывают количество оставленных трасс на 3 фотографиях. Для подсчета отбирают 45 больших квадратов камеры общей площадью 1,8 мм2, ограничивающей объем 18-10"5 см3.
Количество активных спермиев определяют по формуле
(3)
где Vj — объем дозы спермы; и — количество подсчитанных спермиев в 45 квадратах; D — степень разбавления пробы спермы; V— = 18х10~5 см3 — объем, ограниченный 45 большими квадратами счетной камеры.
* Темнопольный конденсор представляет собой модифицированный конденсор КЗРЗ, между двумя линзами которого установлена центральная затемняющая пластина диаметром 10 мм.
92
-
СПЕРМЫ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ
Стационарное хранилище спермы или генетический банк племенного предприятия представляет собой здание размещенное в условно открытой зоне "Б" специального назначения.
Основным помещением банка является двухсветный зал (рис. 42) с размещенными в нем криогенными емкостями, как правило отечественного производства ХБ-500, ХБ-200. Импортные хранилища фирм Криодиффузи-он, Ер Ликид, Линде, Унион Карбайд и других емкостью от 200 до 1100 литров, представляют также интерес, но они на порядок дороже украинских, хотя по технико-эксплуатационным показателям не имеют существенных преимуществ.
Зал оборудуется системой подачи жидкого азота для заправки емкостей, контроля уровня жидкого азота в емкостях, принудительной приточной вентиляцией, освещением согласно повышенным нормам, электрокарой и кран-балкой для перемещения емкостей.
Подсобные помещения включают кабинет для заведующего и обслуживающего персонала, а также экспедицию. Стационарное хранилище может стыковаться с карантинным через бактерицидный шлюз, оборудованный ультрафиолетовыми лампами. Для доставки жидкого азота банку придаются специализированные машины, оснащенные емкостями ТРЖК-2 (1000 л), ТРЖК-7м (1830 л) ТРЖК-3 (7380 л) или ТРЖК-4м (320 литров).
В некоторых случаях стационарный банк оборудуют автономной системой ожижения и ректификации воздуха. Для этого могут быть использованы холодилъно-газовые машины, например ЗИФ-1002 производительностью 10 л жидкого азота в час (Фарбер, 1973).
Стационарное хранилище должно быть разбито на два отдела, первый из которых — по длительному хранению спермы (не менее 4-х лет) от оцениваемых по качеству потомства молодых быков. Сперма, хранящаяся в первом отделе, является не готовой для реализации продукцией, а полуфабрикатом.
Второй отдел хранит и реализует готовую продукцию от вышедших из оценки быков и получивших категорию улучшателей. В процессе 'оценки быков по качеству по-
93
томства их сперма подвергается оценке на оплодотворяющую способность.
Диспетчерская служба стационарного хранилища имеет связь со вторым отделом, с одной стороны, и с потребителями — с другой. Она отпускает спермопродукцию и имеет все необходимые условия для контрольной проверки качества реализуемой спермы, законсервированной по разным технологиям, разрешенным для массового использования в системе крупномасштабной селекции.
94
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ
ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ В ХОЗЯЙСТВАХ
Организация искусственного осеменения коров и телок независимо от категории хозяйств и формы их собственности должна строиться на следующих принципах.
В маточном стаде должна быть налажена систематическая селекция с выбраковкой непригодных к воспроизводству, больных и низкопродуктивных коров, ежегодный цикл которой завершается в четвертом квартале. Величина этой выбраковки, как показывает практика, колеблется в пределах 20...28 % в зависимости от хозяйства и уровня продуктивности стада. Наиболее эффективна эта селекция при использовании метода ранней диагностики стельности по уровню колебания концентрации стероидных гормонов
в молоке.
Разработанный иммуноферментный метод ранней диагностики стельности (Chatzidakis, Katrakili, Krambovitis, 1990) по определению в молоке концентрации прогестерона и эстронсульфата позволяет на 19-й день после осеменения установить наличие или отсутствие беременности и на 100-й день — наличие или отсутствие в организме самки живого плода. Применяя этот метод, можно быстро, с высокой точностью выявить также животных, бесперспективных для воспроизводства, и точно контролировать время запуска коров.
Основные принципы организации работы в хозяйствах
таковы:
— ежегодный ремонт маточного стада в пределах 25— 28 % возможен при интенсивном и физиологически полноценном кормлении телок и осеменении всего ремонтного стада не позже 20 марта;
95

— кормление и содержание ремонтных телок должно обеспечить их половое созревание, зрелость тела и проявление полноценных половых циклов к 13... 15-месячному возрасту. Чрезвычайно важным является не просто интенсивное выращивание телок, а направленное на развитие репродуктивной функции с возможностью их осеменения в 14...16-месячном возрасте (Семенченко, 1978);
— кормление, содержание и эксплуатация коров должны обеспечивать активное проявление у них деятельности системы органов размножения независимо от сезона. Наиболее желательным является сглаживание сезонности растелов с
равномерным их распределением в течение года;
— система организации искусственного осеменения должна обеспечивать легкое выявление у животных признаков полового возбуждения, их выделение из гурта и доставку к месту осеменения.
В тех случаях, когда осеменение коров производится непосредственно в скотном дворе, техник-осеменатор должен быть обеспечен специальным портативным фиксатором животных и переносной микролабораторией для выполнения операций с соблюдением требований по охране труда и правил асептики и антисептики;
— все животные, проявившие признаки полового возбуждения должны подвергаться клиникогинекологическо-му обследованию на предмет выявления гинекологических заболеваний, оптимального времени их осеменения и возможной беременности;
— осеменение всех коров и телок должно проводиться искусственно высококвалифицированными специалистами в специально для этого оборудованном помещении с обеспечением техники безопасности и выполнением зооветеринарных требований;
— в крупных хозяйствах целесообразно создавать специальный цех по воспроизводству животных;
— на всех этапах воспроизводства должен быть строгий учет и отчетность на уровнях: ферма -» хозяйство -> районная лаборатория по воспроизводству -> облплемобъедине-ние -> Укрплемобъединение.
В крупных животноводческих хозяйствах в связи с механизацией трудоемких процессов животные, как правило, обезличены. Работа ведется не с отдельными животными, а в целом со стадом. При этом пункты по искусственному осеменению не в состоянии на должном уровне обеспечивать работу по воспроизводству. Поэтому возникла необходимость создания специальной службы, включающей лабораторию по воспроизводству и улучшению животных и систему скотопрогонных дорог с расколами и ловушками для удобства изоляции и фиксации животных (Осташко, 1978).
Пункты искусственного осеменения должны строиться^ по типовым проектам № 807-6 и 807-7, (Гипрониисельхоз, 1966).
Допускается организация пунктов и в переоборудованных помещениях, отвечающих необходимым ветеринарно-санитарным и зоотехническим требованиям. При осеменении коров на пастбищах для каждого стада необходимо иметь передвижной пункт с одним или несколькими станками (рис. 43). Типовой проект лаборатории по воспроизводству и улучшению крупного рогатого скота № 35/1413 от 1974 г. разработан при нашем участии. Он выполнен в нескольких вариантах: из бетонных блоков, из газосиликатных плит, из кирпича.
В Украине приняты различные системы содержания и эксплуатации животных: привязное — с доением в доиль-но-молочном блоке или в молокопровод; беспривязное — с доением в доильно-молочном блоке или в молокопровод; беспривязное — с доением в доильно-молочном блоке и другие системы.
Технология с привязным содержанием имеет некоторые преимущества, но она связана с малой подвижностью животных, что угнетает проявление половых рефлексов, затрудняет выбор коров в охоте и тем самым снижает эффективность искусственного осеменения. Рациональная система организации воспроизводства способствует устранению этих недостатков. При этом выгульно-кормовые площадки следует размещать на расстоянии 100...150 метров от коровников. Их разбивают на отдельные загоны шириной 30...40 м, длиной 70...80 м из расчета не менее 8 м2 грунтовой площадки на одну голову. Каждый такой загон рассчитан на одновременное содержание в среднем 100 коров или одной технологической группы. .
Загоны оборудуют навесами для грубых и сочных кормов (рис. 44) и отсеками с расколами для изоляции коров в охоте (6x10 м). Загоны соединяют с коровниками скотопрогонными дорожками, огражденными металлическими, деревянными или электрическими изгородями высотой 1,5 м. Коров и телок выгоняют в загоны на прогулку, во время которой скотники, а также операторы по искусственному осеменению ведут за ними постоянное наблюдение и животных с признаками течки и охоты выделяют в отсеки. После прогулки коров из загонов направляют по скотопрогонным дорожкам в коровники, а животных с признаками полового возбуждения из отсеков отправляют в лабораторию по воспроизводству, где их подвергают клинико-гинекологическому обследованию — определяют оптимальное время осеменения и осеменяют. Осемененных животных до конца охоты выдерживают на привязи и, если охота продолжается, через 12 часов осеменение повторяют. При наличии доильно-молочного блока лабораторию по воспроизводству и улучшению животных совмещают с ним. Кроме того в схеме расположения лаборатории на территории комплекса с доением животных в коровниках предусматривают: путепровод раздачи кормов; автопоилки; выгульно-кормовые площадки с твердым покрытием (на 100 коров); выгульную площадку (на 100 коров); загон при лаборатории; лабораторию.
Воспроизводство при беспривязном содержании животных в хозяйстве организуют в соответствии со схемой, представленной на рис. 45. В таких хозяйствах поголовье с учетом удоя и физиологического состояния воспроизводительной и молочной функции делится на группы по 100...200 голов, которых содержат в отдельных загонах и помещениях
для отдыха. Животные распреде'ляются таким образом: новотельные; стельные; коровы со сроком беременности 1...2 месяца; стельные коровы со сроком беременности 2...4 месяца; стельные коровы со сроком беременности 4...7 месяцев; коровы в запуске; телки случного возраста.
Такая группировка животных позволяет проводить выборку их в охоте только среди новотельных (холостых) коров и телок.
В лаборатории по воспроизводству животных таких хозяйств работает один-два оператора по искусственному осеменению и скотник.
Этот персонал утром, в обед и вечером наблюдает за поведением животных в загонах, где содержат нестельных коров и телок, выявляет животных с признаками полового возбуждения. Ему помогают скотники по уходу и доярки. Во время доения таких коров выявляют на преддоильной площадке и цоследоильной. С площадок коров по скотопрогонным дорожкам отправляют в лабораторию, что позволяет им свободно общаться, стимулировать друг друга, а оператору — определить оптимальное время осеменения по клиническим признакам и поведению животных. На рис. 46 показана схема лаборатории по воспроизводству и улучшению стада при беспривязном содержании коров.
Для осеменения телок на комплексах по выращиванию ремонтного молодняка строят пункты искусственного осеменения, примыкающие к цеху животных 14... 18-месячного возраста. Рядом устраивают и оборудуют специальные загоны с расколами и прогонами-коридорами для перевода животных в манеж пункта.
Необходимо практиковать приучение телок ко входу на пункт с целью снятия стрессового состояния при осеменении.
Лабораторию по воспроизводству стада или пункт искусственного осеменения следует располагать возможно ближе к помещениям, в которых содержатся животные, и к путям прогона. Можно строить пункт в блоке с коровником, но с отдельным входом. На фермах, где внедрена поточно-цеховая система производства молока, он должен примыкать к цеху раздоя и осеменения коров. К пункту необходимо иметь хорошие подъездные пути для автомашин, оборудованных транспортными резервуарами для своевременной заправки сосудов Дьюара жидким азотом.
Пункт для осеменения коров и телок, принадлежащих населению, необходимо строить отдельно. Согласно действующей инструкции по искусственному осеменению коров и телок пункт должен иметь: манеж для манипуляций с животными, лабораторию для работы со спермой и эмбрионами, моечную, кладовую, помещение для передержки коров и телок до и после осеменения, бытовые помещения для персонала.
В манеже площадью 15...16 м необходимо иметь на задней стороне окно площадью 1...1,5 м и розетку для дополнительного освещения. На противоположной стене манежа окон не должно быть. Панели стен до высоты 1,5 м от пола окрашивают масляными красками светлых тонов или выкладывают плиткой. Пол должен быть твердым, легко поддающимся чистке и мойке (желательно асфальтовый или бетонный с резиновыми дорожками), с уклоном 1...20. В пункте необходимо холодное и горячее водоснабжение. Входы и выходы помещения пункта оборудуют дезбарьерами.
В манеже устанавливают фиксационный станок со сквозным вводом и выводом животных, с удобной фиксацией их при осеменении.
Необходимо также иметь санитарное ведро, умывальник, кружку Эсмарха для санирующих растворов и стеклянный сосуд для антисептиков.
Сосуд Дьюара размещают в специально оборудованном месте с приточно-вытяжной вентиляцией.
Лабораторию размещают в отапливаемой (18...23 °С), светлой комнате, площадью 6...8 м" с входом в моечную. Она должна отвечать требованиям работы со спермой, размещения и хранения для этих целей инструментов, посуды, материалов и реактивов в специальных шкафах Здесь должен быть сушильный шкаф для стерилизации инструментов и посуды, микроскоп для оценки спермы, холодильник.
Пол в лаборатории и моечной покрывают линолеумом или метлахской плиткой, стены облицовывают глазурованной светлой плиткой или красят белой масляной краской. Бактерицидные лампы устанавливают из расчета 1 Вт на 1 м3.
Моечную (не менее 6 м2), с выходом в манеж, располагают рядом с лабораторией и оборудуют средствами для мытья и стерилизации инструментов, посуды и приборов, а также для стирки халатов, полотенец. Обязательны стол для посуды и шкаф для хранения растворов, умывальник, тазы, электроплитка, стерилизатор, шкаф для верхней специальной одежды и обуви персонала.
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 114; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!
