Качественные реакции на аминокислоты и белки
Цель работы: изучить строение и свойства аминокислот и белковых веществ сырья и готовых продуктов. Освоить методы определения белковых веществ в пищевых продуктах.
Объекты исследования: глицин, β-аланин, желатин, молоко, яйцо (раствор белка).
Качественные цветные реакции на аминокислоты
Задание для выполнения: провести качественные реакции на карбоновые аминокислоты – нингидриновую реакцию, реакцию Фоля, биуретовую реакцию.Провести цветную реакцию на циклические аминокислоты – ксантопротеиновую реакцию.
1.2.1.1 Нингидриновая реакция
Принцип реакции: в результате взаимодействия α-аминокислоты с нингидрином (трикетогидринденгидратом) образуется окрашенное комплексное соединение.
При нагревании (до температуры 70 °С) α-аминокислоты окисляются нингидрином и подвергаются окислительному дезаминированию с образованием аммиака и декарбоксилированию с образованием альдегида и диоксида углерода СО2, а нингидрин восстанавливается:
Восстановленный нингидрин, конденсируясь с аммиаком и окисленным нингидридом, образует соединение, которое, енолизируясь, переходит в окрашенную форму, имеющую сине-фиолетовый цвет.
В присутствии органических растворителей, на которых готовят раствор нингидрина (ацетон, этанол), возможно протекание побочной реакции с образованием соединения, содержащего в своем составе радикал (R) аминокислоты:
|
|
|
Наличие радикала аминокислоты в составе этого соединения обусловливает различную окраску (красную, жёлтую, голубую) соединений, возникающих при реакции аминокислот с нингидрином.
Реакция с нингидрином является специфической для аминокислот, содержащих α-аминогруппу, и характерна как для некоторых карбоновых, так и циклических аминокислот. В реакции глицина с нингидрином образуется комплексное соединение, имеющее сине-фиолетовую окраску.
Материалы и реактивы: водный 1%-ный раствор глицина, 0,1%-ный раствор нингидрина в 95%-ном растворе ацетона.
Оборудование: стеклянные палочки, пробирки, капельницы, водяная баня, термометр лабораторный, часы, штатив для пробирок.
Порядок выполнения работы: в пробирку вносят 5 капель раствора глицина (исследуемого продукта) и 2 капли раствора нингидрина. Содержимое пробирки тщательно перемешивают на водяной бане при температуре 70 °С в течение 5 мин.
В пробирке появляется сине-фиолетовая окраска.
Реакция Фоля на «слабосвязанную» серу цистеина
И цистина
Принцип реакции: при кипячении цистеина и цистина в щелочной среде от них легко отщепляется сера в виде сероводорода, который в щелочной среде образует сульфид натрия. Для цистеина уравнение реакции имеет вид:
|
|
|
Образование сульфида натрия можно обнаружить с помощью ионов тяжелых металлов, например, ионов свинца, образующих с ионами серы нерастворимый сульфид свинца чёрного цвета. Для выявления сульфида серы можно использовать ацетат свинца, который при взаимодействии с гидроксидом натрия образует плюмбит натрия. В свою очередь, плюмбит натрия, реагируя с сульфидом натрия, приводит к образованию сульфида свинца:
Материалы и реактивы : водный 0,01%-ный раствор цистеина, реактив Фоля (к 10%-ному раствору ацетата свинца добавляют 10%-ный раствор гидроксида натрия до растворения образовавшегося осадка), концентрированный раствор гидроксида натрия.
Оборудование: стеклянные палочки, штатив с пробирками, пипетки, водяная баня, часы.
Порядок выполнения работы: в пробирку вносят 1 см3 раствора цистеина (исследуемого вещества), 2 см3 концентрированного раствора гидроксида натрия и 1 см3 реактива Фоля. Смесь тщательно перемешивают и кипятят на водяной бане 2 мин. Через 3…5 мин выпадает бурый или чёрный осадок сульфида свинца.
Дата добавления: 2018-10-26; просмотров: 1030; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!