Определение концентрации сперматозоидов в эякуляте.



Определить можнослед.методами:калориметрический(стандарты мутности),фэк,спектрофотометром,электронные счетчики камера горяева.

Калориметрический:Для определения концентрации спермиев жеребцов Г.В. Паршутин и Е.В. Румянцева сконструировали специальные стандарты. Они представляют собой запаянные пробирки, содержащие жидкость, имеющую цвет, соответствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определения концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку с диаметром стандартных пробирок, устанавливают рядом с ней пробирки стандарта и подбирают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено количество спермиев в 1 мл спермы.

С камерой Горяева:1.подгот.счетной камеры:притирается покровное стекло,со шлиф.краями.2.разбавление спермы меланжером 3 %р-ром натрий хлор(они станов-ся неподв), сперму барана в 200 раз,быка-400,хряка,жереб,кобеля-в 20 раз.3.зарядка счетной камеры:на кусок ваты 2 капли на вату,подносим к покров.стеклу,ж-ть сама стекает под стекло и подсчитыв.в 5 бол.квадратах.потом по формуле c=н*d*400*1000/n*p=млрд.на млн.,где-н число спермиев,

D-cстепень разбавления спермы,n- число малых квадратов,п-глуб.камеры горяева.

Баран-1млрд.,бык-0,7 млрд.,хряк-0,1 млрд,жеребец-0,15 млрд.

Разбавление спермы и разбавители.

Состав зависит от вида жив и способа хран. Разбавл чз 30 мин после получ. Разбавители: ГФ - глюкозофосфатный разбавитель, желатинированный, глюкозоцитарно-желточные среды. Разб. готовят на дист воде. Для быка: ГЦЖ, вода 100мл, глюкоза 3, цитрат Nа 1.4 , желток яйца 20, спермосан-3 75-90тыс ед. Для барана:ГЦЖ, вода 100мл, глюкоза 0.8, цитрат Nа 2.8 , желток яйца 20, спермосан-3 50-75тыс ед. Для жеребца: ЛХЦЖ, вода 100мл, лактоза 11, цитрат Nа 0.089, гидрокарбонат Nа 0.008, хелатон (трилон Б) 0.1, желток яйца 1.6, спермосан-3 25-30тыс ед. Для хряка: ГХЦС, вода 100мл, глюкоза 4, цитрат Nа 0.38, гидрокарбонат Nа 0.05, сульфат аммония 0.18, хелатон (трилон Б) 0.1, спермосан-3 25-30тыс едТребования к разбавителям спермы.

Стерильные, готовятся непосредственно перед получением спермы, строго специфичные, Изотоничность, безвредность, атератогенность, способность облегчать замораживание, питание и дыхание сперматозоидов и тд

Визуальная оценка спермы.

Визуальная(цвет(красный оттенок – кровь, желтый – моча, бурый – застарелые травмы, зеленоватый – гной, наличие хлопьев – воспаление пузырьковидных желез), консистенция(. Зависит от степени насыщенности эякулята спермотозоидами), запах(В норме – специфический для каждого вида животных), объем эякулята((0,5)1-1,5(3-4), Бык (2)4-5(10-20)_, Жеребец (40-50)60-100(200-300), Хряк (100)200-300(800-1000))), концентрация сперматозоидов (онцентрация миллиард в 1 мл: Баран: 1 Бык 0,7 Хряк 0,1 Жеребец 0,15, концентрацию определяют с помощью ФЭК, с пом щетной камеры Горяева, с пом оптических стандартов),

 

 

18 Значение компонентов, входящих в состав разбавителей спермы. Для оптим.сохранен.спермиев.в состав разбавителя ввобятся :1.сахара-энергет.мат-л,защищает спермии от потери электр.заряда,сахара также для дыхания и глиолиза.они снижают электропровод-ть р-ров,те нейтр.вредн.возд-ие на сперму электролитов.

2.лимонно-кисл.натрий-рн щелочн.,вводим для нейтр-ии мол.кислоты.прод-ов распада ж-ти спермат-ов,защищает от самоотравл.спермы,сп-т уплотнению коллоидн.покрова и создает буферность среды,явл.буфером.уч-т в дыхании сперматозоидов.3.лецитин-сп-т более длит-му переживанию,мсягч.температ.шок,исп-ся для жизни и питания сперм-ов.4.хелатон(трилон б)- связ-т ионы ме,торм-т акт-ть ферм-ов.сниж-т активн.обмен.проц.в сперме.5.аб-торможение бакфлоры(очищенные-стрептомицин,спермосан 3)

6.глицерин-исп-ся частично для питания и при замораж-ии спермы- вызывает стеклование.преп-т образов-ию кри сталлов льда.7.молоко свежее-большой буф-ть.повыш.вязкость разбавит.спермы.рн близка к секр.маточн.молока,явл.самой биол.активн.средой для спермат-ов.

Биологические основы проведения искусственного осеменения.

1. Овуляция у животных происходит вне зависимости от полового акта(иск кошки и кролики). 2 Течка и половая охота клинически выражены и легко определяются. 3. Получать сперму от самцов при определенных условиях не составляет трудности. 4. Полученный эякулят можно разбавлять и делить в десятки раз, хранить при определенных условиях продолжительное время.

Способы получения спермы.

1. Хирургический(после кастрации) бывает лишь раз в жизни. 2. Методом мастурбации. 3. Фистульный метод(фистула устанавливается на уровне S-образного изгиба). 4. Ректальный массаж ампул семяпроводов. 5. Электроэякуляция(основан на раздражении ампул семяпроводов эл током). 6. С пом искусственной вагины. 7. Влагалищный(извлекают из влагалища) не исп-т. 8.Губочный(губка во влагалище) не исп. 8 Спермособиратель(гондон)

Глазомерная оценка спермы.

Это приблизительная оценка кач-ва спермы.опред-ся микроск-ки. В нее входит: 1.определение густоты спермы..2.определ.подвижности сперм-ов.для этого надо столик морозова(монтируется в микроскоп),сбоку в верхней части налив-ся в межстен.прост-во вода,в центре дырка для света,сбоку отверстие для измер.темпер.,(9-40 град)на него кладут предм.стекло,подогрев.и смотрят

1.опред.густоты.сперма –густая(расст-ие му сперм-ми меньше 1 спемат-да),средняя(равно длине 1 сп-да),редкая(расст.блольше 1),норма: бараны,бык-только густая,жеребцы,хряки-густ.,средн.,(есть аспермия-нет сперм-ов,олигоспермия-мало их)

2.определен.подвижности:1 из основн.оценок.,сперм-ды соверш-т только прямол-ое движен..(активность сперм-ов-кол-во сперм-ов,соверш.прямолин.движен.)на столик морозова покровное стекло,подогрев-ся,нанос.1 каплю спермы и оценив.в баллах в поле зрения 10 сперматозоидов смотрим:если движутся 10 ,то 10 б из 10,2 не движутся или непрямолин.-8 б,и т.д.

В разбавлен.сперме подвижность сперм-ов доп-ся на 1 б ниже(баран 9б,бык 8 б,хряк 7 б,жереб. 6 б.)).если разб- 1 ниэже и при повыш.температуре(отнимай 1 балл), а разморожен.сперма активность не менее 3-4 б.


Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 726; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!