ПЭГ-интерферон-альфа 2b (ПЕГ-интрон, Шеринг-Плау, США)

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 2

В настоящее время для лечения хронических вирусных гепатитов В и С широко используется непегилированный интерферон-альфа 2b (Интрон-А), способный подавлять репликацию вирусных ДНК или РНК. При традиционном режиме его применения (3 млн. МЕ 3 раза в неделю) максимальная концентрация препарата после подкожного введения определяется в пределах 8-12 часов, а период его полужизни в среднем составляет 6 часов. Пегинтрон имеет значительно лучший фармакологический профиль, чем нативный интерферон-альфа 2b, что выражается в значительном увеличении периода полужизни и ослаблении иммуногенных свойств. В процессе работы по созданию Пегинтрона было показано, что его антивирусная активность in vitro составляет приблизительно 35-40% от таковой нативного интерферона-альфа 2b. В то же время присоединение относительно небольшой молекулы ПЭГ с молекулярной массой 12 kDa к нативному интерферону приводит к тому, что in vivo максимальная концентрация последнего достигается, как и при применении непегилированного препарата, через 8 - 12 часов, но стабильная концентрация поддерживается в течение 48-72 часов. Таким образом, период «эффективной» полужизни препарата составляет в среднем около 40 часов. Данный фармакологический профиль обеспечивается введением препарата 1 раз в неделю, что благоприятно сказываться и на качестве жизни пациента, получающего противовирусное лечение.

ПЭГ-интерферон-альфа 2а (ПЕГАСИС)

Еще одним представителем группы пегелированных интерфернов-альфа является аналог интерферона-альфа 2а, выпускаемый под торговым названием Пегасис. Он отличается от Пегинтрона несколько более сложной химической структурой - интерферон соединен с разветвленной цепью ПЭГ, имеющей более высокую молекулярную массу - 40 kDa (общая молекулярная масса Пегасиса около 60 kDa), при конъюгации использована амидная химическая связь в положении аминогруппы лизина, являющаяся наиболее прочной. Это и предопределило особенности фармакодинамики и клинической эффективности Пегасиса у пациентов с хроническим гепатитом С. Результаты исследований позволяют рассматривать этот препарат как наиболее эффективный среди интерферонов-альфа, особенно у так называемой сложной категории пациентов с 1b генотипом HCV и/или высокой вирусной нагрузкой, с циррозом печени.

Эргостерин и витамины группы D. Продуценты и схема биосинтеза эргостерина. Среды и пути интенсификации биосинтеза.

Витамин D — это группа родственных соединений, в основе которых находится эргостерин, который обнаружен в клеточных мембранах эукариот. Поэтому, например, пекарские или пивные дрожжи применяют для получения эргостерина, как провитамина, обладающего антирахитическим действием. Содержание эргостерина в дрожжевых клетках колеблется в пределах 0,2—11%.

При недостатке в организме гормона 1,25-дигидроксихолекаль-циферола, предшественником которого является витамин D₃ у детей развивается рахит (аналог рахита у взрослых — остеомаляция).

Трансформация эргостерина в витамин D₂ (кальциферол) происходит под влиянием ультрафиолетового облучения. При этом разрывается связь в кольце (позиции 9,10) и образуется двойная связь в боковой цепочке (позиции 22, 23). Эта последняя гидрирована в витамине D₃ (холекальциферол). Физиологическая активность обоих витаминов D₂ и D₃ равноценна.

Кроме дрожжей продуцентами эрогостерина могут быть мицелиальные грибы — аспергиллы и пенициллы, в которых содержится 1,2—2,2% эргостерина. Замечено, что полиеновые антибиотики, действующие на клеточную мембрану дрожжей, заметно стимулируют их содержание в биомассе.

Получение эргостерина в производственных условиях можно подразделить на следующие этапы: размножения исходной культуры и накопление инокулюма, ферментация, сепарирование клеток, облучение клеток ультрафиолетовыми лучами, высушивание и упаковка целевого продукта.

Так, применительно к дрожжам, инокулюм получают на средах, обеспечивающих полноценное развитие клеток, после чего основную среду с ацетатом (активатором биосинтеза стеринов), обогащенную источником углерода и содержащую пониженное количество азота (высокое значение C/N), засевают сравнительно большим объемом инокулята. Культивирование дрожжей (ферментацию) проводят при температуре, близкой к максимальной для конкретного штамма, и выраженной аэрации (2% О₂в газовой фазе). Спустя 3—4 суток, в зависимости от ростовых характеристик и биосинтетической активности культуры, клетки сепарируют и подвергают вакуум - высушиванию. Затем сухие дрожжи облучают ультрафиолетовыми лучами — УФЛ (длина волны 280—300 нм) в течение оптимального по продолжительности времени, при требуемой температуре и с учетом примесных веществ. Эти контролируемые показатели, установленные опытным путем, указываются в регламентной документации. Облучение дрожжей можно проводить до сепарирования клеток в тонком слое 5% суспензии, учитывая малую проникающую способность УФЛ

Облученные сухие дрожжи применяют в животноводстве; в промышленности их выпускают под названием "кормовые гидролизные дрожжи, обогащенные витамином D₂". В таком препарате содержится не менее 46% сырого белка, незаменимые аминокислоты (лизин, метионин, триптофан) и 5000 ME витамина D₂ /г.

В случае получения кристаллического витамина D₂ клетки продуцента гидролизуют соляной кислотой при 110°С, затем температуру снижают до 75—78°С и добавляют этанол. Смесь фильтруют при 10—15°С, оставшуюся после фильтрации массу промывают водой, высушивают, измельчают, нагревают до 78°С и дважды обрабатывают тройным объемом этанола. Спиртовые экстракты объединяют и упаривают до 70%-го содержания сухих веществ. Полученный "липидный концентрат" обрабатывают раствором едкого натра. Эргостерин кристаллизуется из неомыленнной фракции концентрата при 0°С. Его можно очистить повторными перекристаллизациями. Кристаллы высушивают, растворяют в серном эфире, облучают УФЛ, эфир отгоняют, раствор витамина D₂ концентрируют и кристаллизуют.

"Кислотный фильтрат" обычно упаривают до 50%-го содержания сухих веществ и применяют как концентрат В-витаминов. Производят также масляный концентрат витамина D₂.

Дата добавления: 2018-04-04; просмотров: 529; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 12

Мы поможем в написании ваших работ!