Краткие теоретические положения. Для успешного культивирования микроорганизмов в лабораторныхт условиях, помимо правильно подобранных питательных сред



Для успешного культивирования микроорганизмов в лабораторныхт условиях, помимо правильно подобранных питательных сред, посева, необходимы оптимальные условия для роста и жизнедеятельности:

-температура

-свет

-влажность и т.д.

Температура. Для создания оптимальных температурных условий (37С) чашки Петри с посевами устанаавливают на полках термостата.

Термостат- это двустенный шкаф. Между стенками находится воздух или вола, подогреваемые с помощью электричества. Температуру в термостате контролируют с помощью термометра. Чтобы воздух циркулировал свободно, полки должны быть решетчатыми. По этой же причине нельзя термостат загружать плотно.

Чашки Петри должны стоять дном вверх. Лаборант ежедневно фиксирует температурный режим работы термостата.

Свет. Подавляющему числу микроорганизмов свет для роста не нужен, поэтому их выращивают в темноте.

Влажность. Жизнь микробов невозможна без влаги. Поэтому данное условие необходимо учитывать при культивировании.

Аэрация. По потребности в кислороде микроорганизмы делятся на аэробов и анаэробов. Культивирование аэробов происходит при пассивной аэрации, т.е. микроорганизмы берут кислород из внешней среды, либо путем продувания воздуха через культуру.

Культивирование анаэробов происходит в анаэростате – это герметически закрывающийся контейнер со специальным устройством по откачиванию воздуха. Культыры помещаются в анаэростат, герметически закрывают дверцу, и насосом откачивают воздух.

Запишите культуральные свойства в тетрадь.

Культуральные признаки микробов определяются характером роста их на питательных средах. Будучи постоянными, для каждого вида микроба, они являются важным диагностическим признаком.

Колония – это потомство одной клетки, видимое скопление огромного количества микроорганизмов на питательной среде.

 

1. Размеры колонии. Она может быть очень мелкой, мелкой, средней и большой. Диаметр измеряется в миллиметрах и может находиться в диапазоне от 0,1 до 5 и более. Колонии, не превышающие 1 мм в диаметре, называются точечными.

2. Цвет, а также способность к выделению красящего пигмента в окружающую среду.

3.Поверхность. Здесь определяют, является ли она гладкой, шероховатой, бугристой или же вовсе складчатой.

4. Профиль колонии: кратерообразная, выпуклая, конусовидный или просто плоский.

5. Структура колонии. Она может быть однородной, струйчатой, крупнозернистой или мелкозернистой.

6. Оптические свойства: прозрачная, полупрозрачная, непрозрачная, флуоресцирующая, матовая или блестящая;

7. Консистенция. Колония может быть вязкой или жидкой, тестообразной или пленчатой, маслянистой или хрупкой.

8.Край колонии: ровный, лопастной, ризоидный, волнистый, зубчатый и т. д.

 

Изучение роста кишечной палочки на среде Эндо по муляжу (зарисовать).

 

На среде Эндо кишечная палочка образует выпуклые колонии малиново-красного цвета с металлическим блеском или без него.

Среда Эндо – дифференциально-диагностическая среда. Кроме питательной основы, среда содержит 1% лактозу и насыщенный спиртовой раствор основного фуксина, обесцвеченного перед добавлением к агару раст­вором сульфита натрия. Свежеприготовленная среда Эндо бесцветна или слегка розовая.

При росте на этой среде кишечная палочка разлагает лактозу, образуются кислые продукты, они восстанавливают фуксин из бесцветного соединения в красный и поэтому вырастают колонии, окрашенные в малиново-красный цвет.

 

Изучение характера роста стафилококков на желточно-солевом агаре (ЖСА) по муляжу (зарисовать)

Посев на желточно-солевом агаре проводят для определения лецитовителлазы (лецитиназы). Для приготовления ЖСА к 10% солевому агару, расплавленному и остуженному до 60 градусов, добавляют 10% желточной взвеси (1 желток асептично взбалтывают в 200 мл физиологического раствора), агар тщательно смешивают и разливают в чашки.

 

St.aureus образует на желточно-солевом агаре непрозрачные круглые, слегка выпуклые колонии золотистого или желтого цвета. Среда вокруг колоний мутнеет за счет расщепления липовителлина (комплекс жира и белка), содержащегося в желтке ферментом лецитиназой. В результате действия фермента от липовителлина отрываются жирные кислоты, степень дисперсности белка уменьшается, происходит преципитация его, что приводит к помутнению среды. Освобождение жирных кислот сопровождается образованием “радужного” ореола вокруг колоний (лецитиназоположительные стафилококки).

 

St.epidermidis на желточно-солевом агаре образует колонии белого цвета или лимонно-желтые с ровным краем, среднего размера. Среда вокруг колоний не изменена (лецитиназоотрицательные стафилококки).

 


Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 308; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!