Микробиологические исследования чистоты воздуха



Методом Коха., для чего чашку с питательным агаром поставить на горизонтальную поверхность, открыть ее на 5 минут, после чего поместить в термостат. При учете результатов подсчитать число выросших колоний на чашке Петри и рассчитать микробной число воздуха, для чего используется таблица Омелянского.

Типирование бактерий с помощью бактериофагов.

Методика:

1)       На чашку петри с питательной средой наносят 1-2мл исследуемой жидкой бактериальной культуры и равномерно распределяют ее.

2)       Чашку расчерчивают на сектора

3)       С помощью бактериальной петли на дистальный конец каждого сектора наносят соответствующий бактериофаг

4)       После подсыхания чашки ставят в термостаи на сутки

5)       Далее выявлябт зону лизиса

S-, R- формы колоний.

Признак S тип R тип

 морфологя                           

1)       подвижность     Изначальная форма          После действия фактора полиморфизм

2)       подвижность     изначальная       Временная потеря подвижности

3)       капсулообразование                         Временная потеря капсулы

колониеобразование         Колонии овальной формы или округлой, с ровными краями с гладкой или блестящей поверхностью    Колонии неправильной формы с неровными краем, шероховатой поверхностью средней или больщой величины

Аг состав           изначальный      Потеря части аг

верулентность   изначальная       Теряет активность

 

Опыт трансформации.

Поместить в пробирку 1 мл раствора ДНК – культуры донора, смесь инкубировать в течение 20 мин при температуре 37 градусов, после чего произвести высев петлей на селективную питательную среду, содержащую 100 ед/мл стрептомицина. Одновременно произвести контрольные высевы культуры- реципиента и раствора ДНК. При учете результатов обратить внимание на наличие роста в вывесе из трансфорамационной смеси при отсутствии роста в контрольных вывесах.

Опыт трансдукции.

В пробирку поместить 1 мл 4-часовой культуры-реципиента, добавить 1 мд суспензии трансдуцирующего фага, содержащего в 1 мл 10 в шестой степени , смесь инкубировать в течение 60 мин при температуре 37 градусов, после чего 0,1 мл смеси нанести на среду Эндо и распределить стеклянным шпателем по поверхности чашки. Контролем служит посев 0,1 мл культуры-реципиента на ту же среду. Чашки инкубировать в термостате. При учете результатов следует определить число выросших колоний, способных расщеплять лактозу (окрашенных в красный цвет).

Простериализаванной бактериологической петлей отбирают материал и наносят его на стенку пробирки у верхнего уровня среды и слегка встряхивав пробирку смывают его средой. Край пробирки и пробку обжигают и быстро закрывают.


Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 111;