В пробирку со скошенным агаром



На скошенные среды переносят культуру с колоний на чашках. Для этого необходимо приподнять крышку чашки Петри и стерильной петлей прикоснуться к колонии. После этого берут пробирку со скошенным агаром и так, чтобы поверхность скошенного агара была перед глазами. Пробирку открывают над пламенем горелки и обжигают ее край , а затем петлю вводят в пробирку до дна, где имеется не небольшое количество конденсационной воды. Плоской поверхностью петли прикасаются поверхности агара и делают посев штрих образными движениями, постепенно продвигаюсь снизу вверх. Обжигают в пламени горелки край пробирки и пробирку , закрывают пробирку над пламенем.... В пробирку с жидкой питательной средой.

 

Определение протеолитических свойств бактерий.

Протеолитическая активность бактерии определяется их способностью разжижать желатину, свернутую сыворотку крови, образовывать при расщеплении белков индол, сероводород, аммиак.

газ      индикатор.Признаки положительного роста

аммиак лакмус синеет

сероводород     Индикатор пропитанный уксусно-кислым растворои свинца       чернеет

индол Щавелевая кислота           розовеет

 

Определение сахаролитических свойств бактерий.

Сахоролитические свойства бактерий выявляются в способности ферментировать углеводы с образованием различных кислых продуктов с образованием газообразных веществ . Для этого использу.ют короткий и длинный «пестрый» ряд. Первый включает в себя среды Гисса с моно-дисахаридами ( глюкоза, лактоза, сахароза, мальтоза) и с шестиатомным спиртом – маннитом.

В длинный пестрый ряд вводят дополнительно среды с моносахаридами, полисахаридами и спиртами. В качестве индикатора во все среды добавляют реактив Андрале ( щелочной раствор кислого фуксина).

Чистую культуру исследуемых бактерий засевают на среды пестрого ряда. Если бактерии ферментируют углевод до образования кислых продуктов, наблюдается изменение цвета среды; при разложении углевода до кислоты и газообразных продуктов наряду с изменением цвета появляются пузырьки газа. При отсутствии ферментации цвет среды не меняется.

 

Определение каталазной активностизаключается в способности разлагать активные формы кислорода.

Методика. На середину предметного стекла наносят 2-3 капли Н2О2 с помощью петли исследуемая культура вносится в перекись водорода и перемешивается. Если появляются пузырьки , то каталазная активность положительна.

 

Определение чувствительности микробов к антибиотикам.

Метод дисков.

На поверхность агара в чашке Петри вылить 1 мл взвеси бактерий и распределить ее по поверхности, остаток культуры убрать пипеткой. После высыхания поверхности чашки на ее сектора нанести пинцетом диски с антибиотиками. Выдержать чашки в течение 30 мин, после чего поместить в термостат.

Метод разведений.

Взять два ряда пробирок: 1-7 физраствора , 2-8 пробирок по 1 мл бульона. В первую пробирку первого ряда внести 1 мл пенициллина, содержащий 160 единиц. Содержимое пробирки перемешать и 1 мл перенести во вторую пробирку, из второй пробирки 1 мл перенести в третью и т.д. таким образом, в пробирках будет 80, 40, 20, 10, 5 единиц и т.д пенициллина в 1 мл.

В каждую пробирку второго ряда (кроме восьмой) внести по 0,2мл разведения пенициллина из соответствующей пробирки первого ряда . Получаем разведения пенициллина 8, 4, 2, 1 и т.д в 1 мл бульона. В каждую пробирку засеять одну петлю суточной бульонной культуры испытуемого микроба.

Результат учитывается через сутки пребывания пробирок в термостате. Отметить наименьшую концентрацию антибиотика (наибольшее его разведение), при которой отсутсвует рост микроба (бактерицидная концентрация), а также ту концентрацию, при которой лишь наблюдается задержка рост культуры (бактериологическая концентрация) по сравнению с контрольной восьмой пробиркой. 

Постановка опыта Бухнера.

На поверхность агара в чашке Петри налить по 1 мл будьнной культуры, равномерно распределить по поверхности, остаток удалить пипеткой . кружочки стерильной бумаги поместить на поверхность агара и осветить открытую чашку прямыми солнечными лучами в течение 1-2 часов, после чего чашку закрыть крышкой и поставить в термостат


Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 192;