Антитела — это специфические белки иммуноглобулины,
Синтезируемые в организме определенным типом клеток под
Воздействием антигена и обладающие свойством специфиче_
Ски с ним связываться.
Антитела — важнейшие специфические факторы защиты
организма против возбудителей инфекционных болезней и ге_
нетически чужеродных веществ. Они образуются в организме в
результате естественного инфицирования, вакцинации живы_
ми или убитыми вакцинами, контакта лимфоидной системы с
чужеродными клетками или тканями (трансплантатами) либо
с собственными аутоантигенами.
Первоначально антитела условно классифицировали по их
функциональным свойствам на нейтрализующие, лизирующие и
коагулирующие. К первым были отнесены антитоксины, антифер_
менты и вируснейтрализующие лизины; ко вторым — агглютини_
ны и преципитины; к третьим — гемолитические и комплементсвя_
зывающие антитела. С учетом функциональной способности анти_
тел были даны названия серологическим реакциям: агглютинация,
гемолиз, лизис, преципитация и др. Кроме того, антитела под_
разделены по физическим свойствам на тепловые, которые хоро_
шо вступают в реакцию взаимодействия при температуре 37_С, и
холодовые (криофильные), вступающие в реакцию при 4_С. По
подвижности в электрическом поле белки сыворотки крови раз_
деляются на альбумины и три глобулиновые фракции — _, _ и _.
При помощи электрофореза удалось установить, что антитела
|
|
|
связаны только с __ и __глобулиновыми фракциями.
В дальнейшем для разделения антител применили метод
высокоскоростного центрифугирования. Скорость седимента_
ции белков измеряют в единицах Сведберга (S). В результате цен_
трифугирования антитела были разделены на две основные
группы: 7S —небольшие молекулы антител, 19S — большие мо_
лекулы антител. После электрофореза антитела 7S в основном
обнаруживаются в __глобулиновой фракции, а 19S — в __глобу_
линовой.
Также было установлено, что антитела имеют различное
количество активных центров в молекуле, которые определя_
ют их валентность. В связи с этим они были разделены на:
_полные (двух_ и пятивалентные) — при взаимодействии с
антигеном, в ответ на который они выработаны, дают визу_
________ ____ ________ ____ ___ ___
ально видимые реакции (агглютинации, лизиса, преципи_
тации и др.);
_неполные (моновалентные, блокирующие — при специфи_
ческом взаимодействии с гомологичным антигеном не дают
видимого проявления серологической реакции, то есть не
могут агрегировать частицы в крупные конгломераты,
а лишь блокируют их.
Неполные антитела образуются независимо от полных ан_
тител и выполняют те же функции. Представлены они различ_
|
|
|
ными классами иммуноглобулинов. Для обнаружения непол_
ных антител существуют специальные реакции — Кумбса, бло_
кирующая проба и др.
Следует отметить, что при поступлении антигена в организм
могут образовываться антитела с различной функциональной
активностью (преципитины, агглютинины, лизины и др.). Все они
идентичны, различно лишь их действие. Точное число возмож_
ных антител неизвестно, предполагают, что их не менее 10 000.
В соответствии с Международной классификацией сыворо_
точные белки, несущие «антительную» активность и называв_
шиеся ранее гамма_глобулинами, получили название иммуно_
глобулинов и обозначаются символом Ig. Иммуноглобулины
подразделяют на классы (пять классов — IgG, IgМ, IgD, IgА,
IgЕ), а в пределах каждого класса — на подклассы.
_______ ____ ___
______________
Иммуноглобулины — белки с четвертичной структурой, то
есть их молекулы построены из нескольких полипептидных
цепей. Молекула каждого класса состоит из четырех полипеп_
тидных цепей — двух тяжелых и двух легких, связанных меж_
ду собой дисульфидными мостиками, являющимися активным
центром (участок молекулы иммуноглобулина, взаимодейству_
ющий только с комплементарным участком молекулы специ_
|
|
|
фического антигена). Легкие цепи (L) — структура, общая для
всех классов и подклассов. Тяжелые цепи (Н) имеют характер_
ные структурные особенности, присущие определенному клас_
су (подклассу). Легкие цепи подразделены на два типа: _ (кап_
па) и _ (лямбда). Тяжелые цепи обозначают греческими бук_
вами _ (гамма), _ (мю), _ (альфа), _ (дельта) и _ (эпсилон)—
___ ___________ _________ _______
соответственно латинскому обозначению того или иного класса
иммуноглобулинов: IgG, IgМ, IgА и др.
В молекуле иммуноглобулина различают два вида межце_
пьевых связей — между одноименными тяжелыми цепями и
между легкими и тяжелыми цепями. При обработке молекул
папаином они расщепляются на три фрагмента: два Fаb_фраг_
мента и один Fс_фрагмент. Fab_фрагмент обладает способнос_
тью связываться с антигеном, но не вызывает агглютинацию и
преципитацию. Fс_фрагмент связывает комплемент, а также
обеспечивает прикрепление Ig к Fс_рецептору клеточных мем_
бран. При расщеплении иммуноглобулина пепсином образует_
ся двухвалентный F(ab)2 — фрагмент, который благодаря сво_
ей двухвалентности действует как полное антитело и обладает
способностью агглютинировать или преципитировать специфи_
|
|
|
ческие антигены (рис. 16).
При электронно_микроскопическом исследовании установ_
лено, что IgG имеет V_образную форму, а IgМ — звездчатую кон_
фигурацию со средним диаметром 30–35 нм (рис. 16).
Рис. 16
Структура молекулы Ig. Локализации участков,
ответственных за различные функции:
VL, VH — вариабельные; СL, СH— константные.
________ ____ ________ ____ ___ ___
Антитела, образовавшиеся при иммунном ответе организ_
ма, при всей специфичности неоднородны и отличаются друг от
друга, то есть они гетерогенны. Предполагается, что существу_
ет более 100 000 антигенов и к каждому из них синтезируется
«свое» специфическое антитело. Главной основой гетерогенно_
сти (разнообразия специфичностей) антител служит уникаль_
ность их активных центров. Антитела гетерогенны по принад_
лежности к различным классам и подклассам, а также по физи_
ко_химическим и биологическим свойствам.
_______ ___ _____
Антитела, входящие в определенные классы иммуноглобу_
линов, обладают различными физическими, химическими, био_
логическими и антигенными свойствами.
Иммуноглобулины содержат три вида антигенных детер_
минант: изотипические, аллотипические и идиотипические.
У каждого биологического вида тяжелые (5 классов) и легкие
(2 типа) цепи иммуноглобулинов имеют определенные антиген_
ные особенности. Одинаковые антигенные детерминанты для
каждого представителя данного вида называют изотипически_
ми (изотипы). Вместе с тем имеются внутривидовые различия
названных цепей иммуноглобулинов — аллотипы, обусловлен_
ные генетическими особенностями организма_продуцента: их
признаки генетически детерминированы. Например, у тяже_
лых цепей описано более 20 аллотипов. Существуют различия
между разными антителами, даже если они относятся к одному
классу, подклассу или аллотипу, — идиотипы. Они характери_
зуют «индивидуальность» данного иммуноглобулина в зависи_
мости от специфичности антигена_индуктора.
Все указанные антигенные различия определяют с помощью
специфических антисывороток.
Иммуноглобулин М (IgМ). Молекулярная масса — 950 000,
константа седиментации — 19S, функционально валентен, пер_
вым появляется после заражения или вакцинации животного. Об_
ладает выраженной способностью агглютинировать, преципити_
ровать или лизировать антигены, а также связывать комплемент.
Находится преимущественно в плазме крови, при инфекционных
процессах количество его значительно повышается. Не участву_
ет в аллергических реакциях и не проходит через плаценту.
___ ___________ _________ _______
Иммуноглобулин G (IgG). Наиболее изученный класс анти_
тел. Молекулярная масса — 160 000, константа седиментации—
7S. В сыворотке крови содержится в наиболее высокой концент_
рации (в среднем 12 г/л) и составляет от 70 до 85% всех иммуно_
глобулинов, присутствует также в тканевых жидкостях. Двухва_
лентен, образует с поливалентными антигенами сетевую структу_
ру. Вызывает преципитацию растворимых антигенов. Принимает
участие в реакции агглютинации и опсонизации корпускулярных
антигенов. Для лизиса антигена необходимо связывание с молеку_
лой комплемента. IgG играет ведущую роль в защите от многих
вирусных и бактериальных инфекций (оспа, бешенство, столб_
няк и др.), обладает выраженными свойствами нейтрализации
токсинов, выдерживает нагревание при 75_С в течение 30 мин.
Четыре подкласса IgG различают между собой по структу_
ре тяжелых цепей и молекулярной массе. У крупного рогатого
скота известно два подкласса — IgG1 и IgG2. Молекулы имму_
ноглобулина (за исключением IgG2) способны связываться с
клетками тканей и вызывать их специфическую сенсибилиза_
цию, вследствие чего иммуноглобулин принимает участие в ре_
акциях гиперчувствительности немедленного типа. Скорость
синтеза составляет 32 мг на 1 кг массы в сутки. Концентрация
его значительно повышается при различных инфекционных и
аутоиммунных процессах.
Иммуноглобулины класса А (IgА) представлены двумя ви_
дами — сывороточным и секреторным.
Сывороточный IgА. Молекулярная масса — 170 000, кон_
станта седиментации — 7S, концентрация в сыворотке крови
составляет 15–20% от общего количества иммуноглобулинов.
Не обладает способностью преципитировать растворимые ан_
тигены, не связывает комплемент по классическому пути. При_
нимает участие в реакции нейтрализации токсинов. Термоус_
тойчив. Синтезируется в селезенке, лимфатических узлах и в
слизистых оболочках; поступает в секреты — слюну, слезную
жидкость, бронхиальный секрет, молозиво.
Секреторный IgА (SIgА). Имеет добавочный структурный
компонент, отсутствующий в сывороточном. Представляет со_
бой полимер, чаще димер: молекулярная масса — 380 000, кон_
станта седиментации — 11S и 15S. Синтезируется в слизистых
оболочках. Биологическая функция IgА заключается в основ_
________ ____ ________ ____ ___ ___
ном в местной защите слизистых оболочек, например, при за_
болеваниях желудочно_кишечного тракта или дыхательных
путей. В кишечном тракте SIgА устраняет бактериальную ад_
гезию, нейтрализует вирусы. SIgА образуется в результате ас_
социации димерной формы IgА с особым белком, названным
секреторным компонентом, находящимся в собственном слое
слизистой оболочки. SIgА проходит базальную мембрану и про_
никает в эпителиальную клетку, где соединяется с секретор_
ным компонентом, после чего происходит выход синтезирован_
ного SIgА на поверхность эпителиального покрова кишечника.
Иммуноглобулин D (IgD). Молекулярная масса — 160 000,
константа седиментации — 7S. Концентрация IgD в сыворотке кро_
ви человека не превышает 1% от общего количества иммуногло_
булинов. Биологическая функция его не совсем ясна. Установле_
но, что он является одним из основных иммуноглобулинов, вхо_
дящих в состав рецепторов __лимфоцитов; термостабилен, может
активизировать комплемент по альтернативному пути, обладает
антивирусной активностью, не связывается с тканями. Отмечено
увеличение его содержания при миеломной болезни у человека.
Иммуноглобулин Е (IgЕ). Впервые идентифицирован в
1966 г., идентичен антителам, ранее названным реагинами.
Молекулярная масса — 190 000, константа седиментации 8,5S.
Концентрация в сыворотке крови составляет в среднем 0,25 мг/л.
IgЕ термолабилен, инактивируется при 56_С в течение 1 ч, не
связывает комплемент, быстро и прочно связывается с клетка_
ми тканей, тканевыми базофилами, принимает участие в реак_
ции гиперчувствительности немедленного типа. У человека
обусловливает атипические реакции — сенную лихорадку, кра_
пивницу, бронхиальную астму. При аллергических заболева_
ниях концентрация IgЕ в сыворотке крови значительно увели_
чивается и может составлять в среднем 1,6 мг/л. Считают, что
IgЕ играет защитную роль при гельминтозных и протозойных
заболеваниях, в частности способствует усилению фагоцитар_
ной активности макрофагов и эозинофилов. IgЕ обнаружен у
людей, больных ревматизмом и системной волчанкой.
Классы иммуноглобулинов у животных и птиц. У лошадей
установлены IgМ, IgG и IgА, у крупного рогатого скота — IgG
(два подкласса G1и G2), IgМ и IgА, у свиней, овец и коз — IgМ,
IgG и IgА, у домашних птиц — IgМ, IgG и IgА.
___ ___________ _________ _______
_______ _____ __ ___
____
Во многих исследованиях, связанных с изучением патоло_
гии животных, используют антитела, специфически реагирую_
щие с антигеном. Известно, что иммунная система организма
вырабатывает специфические антитела на огромное множество
антигенов. В основе такой способности лежит наличие боль_
шого разнообразия клонов лимфоцитов, каждый из которых
вырабатывает антитела одного типа с узкой специфичностью.
Общее число клонов у мышей, например, достигает 107–1010.
В ответ на данный антиген в реакцию вовлекается множество
клонов, что обусловливает высокую гетерогенность синтезиру_
емых антител. Так, при иммунизации комплексом «гаптен—
белок» образуется до 8000 различных антител.
Спектр вырабатываемых антител изменяется в ходе иммун_
ного ответа, различен он и у разных видов животных. Поэто_
му при использовании антисывороток для идентификации и
количественного определения антигенов возникает пробле_
ма неспецифического связывания и перекрестной реакции ан_
тител.
Многие исследователи пытались получить антитела с узкой
специфичностью. Например, бактериальные полисахариды в
определенных условиях дают антитела с высокой специфично_
стью. В 1975 г. Д. Кехлер и Ц. Милстейн предложили принци_
пиально новый подход к получению гомогенных антител мето_
дом гибрида. С его помощью производят слияние плазмацито_
мы (опухолевой клетки, возникшей из антителообразующих
клеток) с клетками селезенки иммунизированного животного.
Так получают гибридные клетки (гибридомы), способные нео_
граниченно размножаться и синтезировать антитела узкой спе_
цифичности (моноклональные антитела). Следует подчеркнуть,
что моноклональные антитела, обладая высокой специфичнос_
тью, могут не обнаруживать некоторые антигенные детерми_
нанты у родственных микроорганизмов, а также исключают
участие комплемента в реакции «антиген — антитело», иммун_
ной преципитации. Поэтому в ряде случаев целесообразно ис_
пользовать поликлональные сыворотки.
Процесс получения моноклональных антител включает сле_
дующие этапы:
________ ____ ________ ____ ___ ___
_иммунизация животных;
_подготовка клеток к слиянию;
_слияние;
_отбор клонов, продуцирующих антитела;
_клонирование и реклонирование;
_накопление гибридомных клеток;
_получение культуральной жидкости или асцита, содержа_
щих антитела;
_выделение антител.
Основные этапы получения гибридом, синтезирующих мо_
ноклональные антитела, схематически представлены на ри_
сунке 17.
Получение гибридом возможно при соблюдении специаль_
ных условий: стерильность, наличие соответствующих реакти_
вов и питательных сред для культивирования клеток. При этом
антиген должен быть достаточно очищенным для иммунизации,
так как организм вырабатывает антитела на все антигенные
детерминанты всех компонентов вводимого материала, что зна_
чительно осложняет отбор клонов, продуцирующих антитела к
интересующей антигенной детерминанте.
Методы иммунизации организма постоянно совершенству_
ются. Для этого используют культуры лимфоцитов, выращен_
ные в суспензии, или же лимфоциты культивируют в малень_
кой камере на диализной мембране, через которую происходит
обмен питательных веществ, поступающих из небольшого ре_
зервуара (Д. Марбрук, 1967).
После слияния клеток и отбора гибридомных клеток, про_
дуцирующих антитела, осуществляют клонирование с целью
выделения стабильных клеточных линий. Для этого использу_
ют метод лимитирующих разведений в полужидком агаре. Пос_
ле отделения клонов клеток, синтезирующих антитела, их раз_
множают в достаточном количестве и замораживают. Для полу_
чения больших количеств моноклональных антител отдельные
образцы размножают in vitrо в монослое или в суспензии в ре_
акторах, или же гибридомные клетки вводят в организм жи_
вотных и в результате получают от них асцитную жидкость,
содержащую моноклональные антитела.
Моноклональные антитела широко используют для диаг_
ностики инфекционных болезней животных и человека бакте_
___ ___________ _________ _______
риальной и вирусной этиологии. Например, получены антитела
против возбудителей сибирской язвы, бруцеллеза, листериоза,
ящура, бешенства, классической чумы свиней, болезни Ауески
и др. Важно подчеркнуть, что использование моноклональных
антител в радиоиммунном или иммуноферментном анализах
резко повышает чувствительность и специфичность реакции.
Рис. 17
Основные этапы получения гибридом,
синтезирующих моноклональные антитела
________ ____ ________ ____ ___ ___
Перспективно использование моноклональных антител для
определения стельности коров по содержанию прогестерона в
молоке. Для этих целей получают моноклональные антитела
на прогестерон, связанный через янтарную кислоту с бычьим
альбумином. Указанные антитела применяют для обнаружения
прогестерона в молоке и при иммуноферментном анализе не#
посредственно в производственных условиях. Компонентами
реакции пропитывают фильтровальную бумагу, на которую за#
тем наносят каплю исследуемого молока, и через несколько
минут определяют уровень содержания прогестерона по изме#
нению цвета фильтровальной бумаги.
Моноклональные антитела могут быть использованы при по#
лучении вакцины генно#инженерным методом. Уже созданы та#
кие вакцины против вируса синего языка, бруцеллеза, болезни
копыт у овец, кокцидиоза. Например, вакцина против кокцидио#
за готовится путем клонирования генов возбудителя Eimeria
tenella, которые кодируют образование белковых антигенов.
В результате клонирования таких генов возможно получить
индивидуальные белки возбудителя в значительных количе#
ствах, что позволяет использовать их для вакцинации. Такие
белки не обладают инфекционностью, стоимость их невели#
ка. Компания «Геникс» (США), разработав клонирование ге#
нов Eimeria tenella и добившись их экспрессии в клетках E. Coli,
показала, что полученные белки#антигены при введении их ку#
рам вызывают частичный иммунитет к кокцидиозу.
Моноклональные антитела можно применять в качестве
лечебного средства при злокачественных опухолях, речь идет о
моноклональных антителах против специфического антигена ра#
ковых клеток или возбудителя злокачественного перерождения
тканей. Научные исследования в данной области проводятся очень
интенсивно, и возможно, что моноклональные антитела займут
достойное место среди противоопухолевых лечебных средств.
_______ ___ ___________
____________ __ _ _
Антитела вырабатывают плазматические клетки селезен#
ки, лимфатических узлов, костного мозга, пейеровых бляшек.
Плазматические клетки (антителопродуценты) происходят из
предшественников _#клеток, после их контакта с антигеном.
___ ___________ _________ _______
__клетки и их потомки функционируют по клональному прин_
ципу: по мере развития иммунного ответа они дифференциру_
ются, пролиферируют и созревают. Механизм синтеза анти_
тел аналогичен синтезу любых белков. Синтез молекул анти_
тел происходит на полирибосомах. Легкие и тяжелые цепи,
из которых состоит молекула антител, синтезируются раз_
дельно, затем соединяются на полирибосомах, а окончатель_
ная сборка происходит в пластинчатом комплексе. Одна плаз_
матическая клетка может переключаться с синтеза IgМ на син_
тез IgG.
При первичном иммунном ответе в антителообразовании
различают две фазы: индуктивную (латентную) и продуктив_
ную. Первая фаза — период от момента парентерального введе_
ния антигена до появления лимфоидных антиген_реактивных
клеток; продолжительность ее не более суток. В эту фазу про_
исходят пролиферация и дифференцировка лимфоидных кле_
ток в направлении синтеза иммуноглобулина класса М. Во вто_
рую фазу (примерно 10–15 сут) кривая нарастания уровня ан_
тител резко возрастает, при этом уменьшается число клеток,
синтезирующих IgМ, и нарастает продукция IgА.
Антитела способны реагировать с антигеном благодаря на_
личию у них определенных структур, которые называют актив_
ным центром. Это полость или щель, соответствующая простран_
ственной конфигурации детерминантной группы антигена. Пос_
ледняя же определяется последовательностью аминокислот
вариабельных участков легких и тяжелых цепей антитела. Ак_
тивный центр, куда входит определенной формы и жесткости
детерминантная группа, должен быть ей комплементарен, без
чего не наступит феномен серологической специфичности. Мо_
лекулы антител различных классов различают по валентности,
то есть по количеству у них активных центров. Так, IgG и IgА
бивалентны (обладают двумя активными центрами), IgМ поли_
валентен — может связать 5–10 молекул антигена, так как об_
ладает 10 активными центрами.
Предполагают, что соединению антигена и антитела способ_
ствуют: гидрофобное взаимодействие, водородные связи, куло_
новы силы между группами ионов с противоположным заря_
дом, вандерваальсовы силы, которые действуют на очень близ_
ком расстоянии.
________ ____ ________ ____ ___ ___
Активность связывания антител с антигеном оценивают по
аффинитету и авидности. Аффинитет характеризует уровень
сродства антитела к испытуемому антигену, степени совпаде_
ния (комплементарности) конфигураций активного центра ан_
титела и антигенной детерминанты (подобно ключу в замочной
скважине). Под авидностью понимают количество (валентность)
и расположение активных центров, характеризующие «жад_
ность» связывания с антигеном всей молекулы антитела. Чем
выше авидность иммунной сыворотки, тем слабее склонность
агрегатов к диссоциации. Отмечено, что один и тот же антиген
вызывает образование антитела с различным уровнем аффини_
тета и авидности. Высокоаффинные антитела образуют более
прочные комплексы с антигеном, чем низкоаффинные. Авид_
ность зависит как от аффинности, так и от валентности, прихо_
дящейся в среднем на одну молекулу антител. При равной аф_
финности авидность больше, чем авидность IgG, поскольку IgМ
функционально пятивалентен, а IgG двухвалентен.
_____ ____ _____________
_________________
Знание механизмов взаимодействия антигенов
с антителами раскрывает сущность многообразных иммуноло_
гических процессов и реакций, возникающих в организме под
влиянием патогенных и непатогенных агентов. Механизм ре_
акции антигена с антителом объясним на основе современных
представлений о наличии у антигенов нескольких детерминан_
тных групп и двух активных центров в молекуле антитела.
Детерминантные группы антигена несут электрический за_
ряд. В процессе индукции синтеза антител они так или иначе
определяют специфичность формирующихся антител. Концевые
части полипептидных цепей имеют заряд, противоположный за_
ряду детерминантной группы антигена. Полярные группы анти_
гена и антитела, обладающие противоположными зарядами, со_
единяются между собой. Прочность образовавшегося комплекса
зависит от количества реагирующих групп и полноты совпаде_
ния структуры полярных групп антигена и антитела. Чем боль_
ше реагирующих групп и чем полнее совпадение структуры по_
лярных групп, тем прочнее соединение, и наоборот (см. рис. 18).
___ ___________ _________ _______
При оптимальном соотношении антигена с антителом про_
исходит полное взаимное насыщение всех валентностей, и об_
разуются прочные комплексы, выпадающие в осадок. При из_
бытке антител часть активных центров остается свободной и
образование комплекса задерживается. В случае избытка анти_
гена возникают рыхлые комплексы и замедляется выпадение
осадка. При максимальном избытке антигена, когда связаны
все активные центры антитела, образование комплексов пре_
кращается, и осадок не выпадает.
Специфичность антител, обусловливающая механизм их
взаимодействия с антигеном, связана с конфигурацией актив_
ных центров, которые должны строго соответствовать детерми_
нантным группам антигена.
Реакция между антителом и антигеном протекает в две ста_
дии, первая — специфическая (непосредственное соединение
активного центра антитела с антигенной детерминантой), вто_
рая — неспецифическая, когда отличающийся плохой раство_
римостью иммунный комплекс «антиген — антитело» выпада_
ет в осадок. Неспецифическая стадия, как правило, возможна в
присутствии растворов электролитов и визуально проявляется
по_разному, в зависимости от физического состояния антигена.
Если антигены корпускулярные, имеет место феномен агглю_
тинации — склеивания различных химических частиц, сенси_
билизированных антигенами, и клеток, в том числе микроор_
ганизмов. Образующиеся конгломераты выпадают в осадок, при
этом микробные клетки морфологически заметно не меняются:
Рис. 18
Структура агрегатов АГ–АТ и их молекулярные соотношения:
а — 5:1; б — 3:1; в — 2,5:1; г — 1:1,25; д — 1:2.
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)__ Показатель повреждаемости нейтрофилов (ППН). В сенси_
билизированном организме элементы белой крови, в том числе
нейтрофилы, проявляют повышенную чувствительность к ал_
лергену. Учитываемый критерий повреждения нейтрофилов—
усиление амебоидной реакции этих лейкоцитов при инкубации
крови в смеси со специфическим аллергеном. Для повышения
точности наблюдения за поврежденными нейтрофилами исполь_
зуют чисто химический метод окраски клеток на гликоген по
А. Л. Шабадашу, который позволяет точнее отдифференциро_
вать нейтрофильные лейкоциты от других форменных элемен_
тов крови (эозинофилы, лимфоциты и моноциты содержат зна_
чительно меньше гликогена, а в эритроцитах он отсутствует)
и обнаружить даже минимальные повреждения нейтрофилов в
виде амебоидных реакций.
Количество обнаруживаемых поврежденных нейтрофилов,
например в присутствии туберкулина у больных туберкулезом,
находится в прямой зависимости от степени активности специ_
фического процесса (процент поврежденных нейтрофилов в ак_
тивной фазе туберкулеза в 1,5–3,5 раза выше, чем при затиха_
нии процесса).
Сегментоядерные нейтрофилы претерпевают аллергичес_
кую перестройку значительно раньше, чем наружные кожные
покровы.
Реакция специфического лейколиза основана на повреж_
дении — разрушении лейкоцитов под влиянием аллергена; пер_
вично повреждаются лимфоциты, а остальные лейкоциты—
вторично.
Механизм специфического лейколиза заключается в воздей_
ствии аллергена на лимфоциты сенсибилизированного организ_
ма. Реакция служит для диагностики аллергических состоя_
ний у животных.
Реакция ингибиции и миграции лейкоцитов основана на
подавлении миграции макрофагов и лейкоцитов под действием
медиаторов, вырабатывающихся сенсибилизирующимися лим_
фоцитами в присутствии специфического антигена.
Специфическое розеткообразование: __лимфоциты живот_
ного, иммунизированного гетерогенными эритроцитами, спо_
собны in vitrо фиксировать на своей поверхности соответству_
ющие эритроциты, образуя «розетки». Реакция получила на_
_______ _____ _____________ ______ ______ ___
звание «иммуноцитоприлипание». Воспроизводится in vitrо,
если сенсибилизированные лимфоциты смешивают со взвесью
танизированных эритроцитов, на которых фиксируются соот_
ветствующие аллергены.
Фагоцитарная активностъ лейкоцитов. Ведущую роль в
фагоцитозе играют нейтрофильные гранулоциты и макрофа_
ги. Активность нейтрофильных гранулоцитов можно уста_
новить несколькими методами, принимая во внимание сле_
дующее:
_способность к адгезии — определение количества клеток,
фиксирующихся на стеклянной пластинке при 37_С;
_миграцию — выход нейтрофильных гранулоцитов из капил_
ляров в окружающую ткань (метод «кожного окна»);
_хемотоксис — способность клеток перемещаться в направ_
лении химического градиента;
_фагоцитарную активность — способность захватывать и
уничтожать бактерии.
Тест на активность наиболее полно характеризует функцио_
нальные способности нейтрофильных гранулоцитов и широко
применяется для оценки уровня клеточной неспецифической
резистентности.
При постановке фагоцитарной реакции учитывают три по_
казателя:
_активность фагоцитоза (фагоцитарный показатель, процент
фагоцитоза) — процент фагоцитарных бактерий;
_интенсивность фагоцитоза (фагоцитарный индекс, фагоци_
тарное число) — среднее число микробов, поглощенных од_
ним нейтрофильным гранулоцитом;
_завершенность фагоцитоза (индекс переваривания) — отно_
шение числа погибших микробных клеток к живым в маз_
ке или снижение интенсивности роста микробов после кон_
такта их с кровью.
Дата добавления: 2021-03-18; просмотров: 118; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!