Начальное микроскопическое исследование
Просмотр эякулята на стекле – это только ориентировочное иссле- дование, требующее дальнейшего уточнения. Оно осуществляется сле- дующим образом: на чистое, обезжиренное предметное стекло (предва- рительно согретое до температуры хранения эякулята) наносится капля эякулята (10 мкл), которая слегка распределяется до получения тонкого слоя (в толстой капле хуже просматривается клеточный состав). Для соз- дания тонкого слоя необходимо покрыть каплю покровным стеклом, не прижимая. Приготовленный препарат стабилизируется 1 минуту, затем просматривается в микроскопе с окулярами ×7 или ×10 и объективами
×8, ×10 или ×20 со спущенным конденсором и открытой диафрагмой. Оценивается клеточный состав эякулята, примерная подвижность спер- матозоидов, их морфология, наличие агглютинации, агрегации, слизи, присутствие «круглых клеток» (эритроцитов, лейкоцитов, клеток спер- матогенеза, эпителия), элементов сока простаты, кристаллов Беттхера.
При микроскопическом исследовании обязательной является оценка следующих параметров.
1. Агглютинация сперматозоидов. Скопление подвижных спер-
матозоидов без каких-либо клеток свидетельствует об агглютинации. В норме у практически здоровых пациентов агглютинации сперматозоидов нет. Степень данного показателя оценивается полуколичественно:
«-» – отсутствие;
«+» – слабо выраженная: в нативном препарате до 10 кучек сперма- тозоидов по 4-6 в каждой;
|
|
|
«++» – значительная: в препарате более 20 кучек сперматозоидов по 4-8 в каждой;
«+++» – резко выраженная: в препарате более 20 кучек, в каждой более 20 сперматозоидов;
«++++» – тяжёлая степень: все подвижные сперматозоиды находятся в состоянии агглютинации.
2. Агрегация сперматозоидов. Скопление неподвижных спермато-
зоидов свидетельствует об агрегации. Небольшие скопления неподвиж- ных клеток часто присутствуют в семени здоровых мужчин, и это явля- ется нормальным, в то время как большие скопления, содержащие сотни сперматозоидов, – патология.
3. Слизь является содержимым предстательной железы и семенных
пузырьков, в нормальном эякуляте отсутствует. В большом количестве попадает в эякулят при простатите или везикулите. Она плотно обвола- кивает сперматозоиды, замедляя их подвижность и скоростные параме- тры, искажает точное определение количества и концентрации сперма- тозоидов.
4. Лецитиновые зёрна (липоидные тельца) – это мелкие блестя-
щие зёрнышки, содержащиеся в нормальной сперме в большом количе- стве. При воспалении их количество значительно уменьшается или они исчезают совсем.
5. Амилоидные тельца (гиалиновые шары) – крупные округлые
|
|
|
образования с концентрическими дугами и окружностями, появляющи- мися при изменении глубины резкости, служат следствием застойных явлений в предстательной железе.
6. Кристаллы спермина (Беттхера) могут быть ромбовидной или
друзообразной формы, различных размеров. Образуются при охлажде- нии спермы из спермина и фосфорнокислых солей. Встречаются через 1 час после получения эякулята крайне редко, при суточном исследова- нии – гораздо чаще. С количественными и качественными показателями эякулята напрямую не связаны.
Кроме того, эякулят содержит другие клетки, которые определяются как «круглые». Они включают в себя клетки сперматогенеза, лейкоци- ты, эритроциты, макрофаги, остатки цитоплазмы (остаточные тельца) и эпителиальные клетки, чаще из урогенитального тракта.
Оценка подвижности сперматозоидов (кинезиограмма)
При проведении исследования обязательно должен соблюдаться принцип термостабильности.
Оценка подвижности проводится в двух каплях семени, в каждой из которых рассматривается по 100 сперматозоидов. Если различие в ко- личестве подвижных сперматозоидов в этих каплях составляет больше
10%, готовят третий препарат, снова оценивают подвижность, после чего среднее значение рассчитывают по трём препаратам.
|
|
|
Сперматозоиды традиционно оцениваются по следующим катего- риям:
- А – быстрое поступательное движение;
- В – медленное или вялое поступательное движение;
- С – непоступательное движение (колебательное или маятнико-
образное, манежное);
- D – неподвижные сперматозоиды.
Для оценки подвижности в окуляр ×10 или ×15 вкладывают окошко Фонио и с объективом ×40 подсчитывают сперматозоиды. В первую оче- редь оцениваются сперматозоиды А, в следующие 5 секунд – проходящие через окошко Фонио малоподвижные сперматозоиды В, затем С. В конце просмотра подсчитываются сперматозоиды D. Для набора 100 спермато- зоидов анализируют несколько полей. Если сперматозоидов мало, под- счёт проводят без окошка Фонио. При наличии в препарате агглютина- ции или агрегации, в которые вовлечены 10-15% сперматозоидов, оценка подвижности проводится только по свободным формам.
Для оценки подвижности сперматозоидов также может применяться камера Горяева. Для этого сперму с помощью полуавтоматических доза- торов разводят в 20 раз физиологическим раствором (исследуемый эяку- лят в количестве 0,02 мл разводится в 0,4 мл подогретого физиологиче- ского раствора), который перед использованием согревают до температу- ры термостатирования эякулята. Разведение эякулята проводится много- кратным пипетированием, при этом необходимо кусочком бинта убирать остающуюся каплю эякулята с кончика наконечника дозатора для более точного получения нужного объёма. Камеру Горяева перед исследовани- ем тщательно протирают кусочком чистого бинта, слегка смоченного в 96° спирте. Также необходимо обработать и покровное стекло.
|
|
|
Разведение эякулята в физиологическом растворе, пипетирование, заливание его в камеру Горяева являются травмирующими факторами и сами по себе приводят к снижению качественных параметров спермато- зоидов.
Нельзя проводить микроскопическое исследование непосредствен- но после заливания в камеру разведённого эякулята, необходимо дать возможность механически «травмированным» сперматозоидам восста- новить подвижность. Оптимальным является проведение исследования через 0,5-1 минуту после внесения эякулята в камеру Горяева.
В камере смотрят только неподвижные и малоподвижные спермато- зоиды. Расчёт ведут по формуле:
Х=А-(В+С),
где А – общее количество сперматозоидов;
В – количество малоподвижных сперматозоидов; С – количество неподвижных сперматозоидов.
Отсюда количество активноподвижных сперматозоидов составля- ет (Y):
Ответ выдаётся в процентах.
Подвижность сперматозоидов в норме регистрируется при их коли- честве:
– с нормальной подвижностью – более 50% (группы А + В):
– с поступательным быстрым движением (группа А) – 25% и более;
– с поступательным медленным движением (группа В) – 25% и менее;
– с маятникообразным движением и неподвижных (С+D) – 50% и менее.
При комнатной температуре сперматозоиды сохраняют подвижность в течение 12-24 часов, при этом в первые 2 часа подвижность не снижа- ется, к концу 5-го часа уменьшается примерно в 2 раза.
Дата добавления: 2021-02-10; просмотров: 33; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!