Бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон
6.2.1 Состав:
ферментативный перевар казеина | 10 г; | |||
лактоза (С ![]() ![]() ![]() ![]() | 10 г; |
| ||
желчь | 20 г; |
| ||
бриллиантовый зеленый | 0,0133 г, |
| ||
(или 2,66 см ![]() |
| |||
вода | 1000 см ![]() |
|
6.2.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты или дегидратированную готовую среду в воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (7,2±0,2) при температуре 25 °С. Разливают и стерилизуют среду по 6.1.2.
6.2.3 Раствор бриллиантового зеленого
6.2.3.1 Состав:
бриллиантовый зеленый | 0,5 г; | |||
вода | 100 см ![]() |
|
6.2.3.2 Приготовление
Бриллиантовый зеленый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят водой до метки.
6.3 Селективная обогатительная среда (бульон Мак-Конки)
6.3.1 Состав бульона Мак-Конки приведен в таблице 2.
Таблица 2
Состав среды | а) Среда двойной концентрации | б) Среда нормальной концентрации |
Пептон, г | 40 | 20 |
Лактоза (С ![]() ![]() ![]() ![]() | 20 | 10 |
Желчь, г | 10 | 5 |
Раствор бромкрезолового пурпурового, см ![]() | 2 | 1 |
Натрий хлористый, г | 10 | 5 |
Вода, см ![]() | 1000 | 1000 |
6.3.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты в воде. Нагревают на слабом огне до кипения, кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, доводят объем до 1 дм , охлаждают до 45 °С - 55 °С и устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял при температуре 25 °С (7,2±0,1). Разливают и стерилизуют среду по 6.1.2.
|
|
6.3.3 Раствор бромкрезолового пурпурового
6.3.3.1 Состав:
бромкрезоловый пурпуровый | 1 г; | |||
раствор гидроокиси натрия ![]() ![]() | 19 см ![]() |
| ||
вода | 80 см ![]() |
|
6.3.3.2 Приготовление
Бромкрезоловый пурпуровый переносят в фарфоровую ступку с 19 см раствора гидроокиси натрия c(NaOH)=0,1 моль/дм
и после растворения добавляют воду.
6.4 Селективная обогатительная среда (среда Кесслера)
6.4.1 Состав среды Кесслера приведен в таблице 3.
Таблица 3
Состав среды | а) Среда двойной концентрации | б) Среда нормальной концентрации |
Пептон, г | 20 | 10 |
Лактоза (С ![]() ![]() ![]() ![]() | 5 | 2,5 |
Желчь, г | 10 | 5 |
Раствор кристаллического фиолетового, см ![]() | 4 | 2 |
Вода, см ![]() | 1000 | 1000 |
6.4.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты в воде. Нагревают на слабом огне до кипения, кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, доводят объем до 1 дм , охлаждают до 45 °С - 55 °С и устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял при температуре 25 °С (7,2±0,1).
Разливают среду по 6.1.2 и стерилизуют в автоклаве при температуре (115±1) °С в течение 20 мин.
|
|
6.4.3 Раствор кристаллического фиолетового
6.4.3.1 Состав:
кристаллический фиолетовый | 1 г; | |||
вода | 100 см ![]() |
|
6.4.3.2 Приготовление
Кристаллический фиолетовый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят водой до метки.
6.5 Кристалл виолет нейтральный красный желчный лактозный агар (VRBL-агар)
6.5.1 Состав:
ферментативный перевар животных тканей | 7 г; | |||||
дрожжевой экстракт | 3 г; |
| ||||
лактоза (С ![]() ![]() ![]() ![]() | 10 г; |
| ||||
хлористый натрий | 5 г; |
| ||||
желчные соли | 1,5 г; |
| ||||
нейтральный красный | 0,03 г |
| ||||
(или 1 см ![]() |
| |||||
кристаллический фиолетовый | 0,002 г |
| ||||
(или 0,2 см ![]() |
| |||||
агар | 12-18 г |
| ||||
(зависит от желирующей способности агара); |
| |||||
вода | 1000 см ![]() |
|
6.5.2 Приготовление
Основная цель правильного приготовления среды - получение необходимой селективной способности и специфичности среды.
Тщательно размешивают компоненты или дегидратированную готовую среду в воде и оставляют на несколько минут. Устанавливают рН так, чтобы после кипения он составлял (7,4±0,2) при температуре 25 °С. Нагревают до кипения, помешивая время от времени. После 2 мин кипения немедленно охлаждают в водяной бане при температуре 44 °С - 47 °С. Избегают перегрева среды, не применяя вторичного нагревания. Среду не стерилизуют в автоклаве. Контролируют стерильность среды во время использования. Используют среду в течение 4 час после приготовления.
6.5.3 Раствор нейтрального красного
6.5.3.1 Состав:
нейтральный красный | 3 г; | |||
вода | 100 см ![]() |
|
6.5.3.2 Приготовление
Нейтральный красный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят водой до метки.
|
|
Дата добавления: 2020-12-12; просмотров: 117; Мы поможем в написании вашей работы! |
![](/my/edugr4.jpg)
Мы поможем в написании ваших работ!