ПРИМЕНЕНИЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ АНАЛИЗЕ

Анализ спиртов алкилнитритным методом газожидкостной хроматографии

Метод разработан для анализа алифатических одноатомных спиртов в биологических жидкостях (кровь, моча, промывные воды) или дистилляте. Он основан на переведении этих спиртов в более летучие эфиры азотистой кислоты - алкилнитриты, (спирт этиловый имеет Ткип = 78 °С, этилнитрит имеет T кип = 17 °С, спирт пропиловый Т кип = 97,5 °С, пропилнитрит Т кип = 48 °С). Для этого к исследуемому объекту прибавляют растворы натрия нитрита и кислоты трихлоруксусной:

ССl₃-СООН + NaNO₂ = CCl₃-COONa + HNO₂

ROH + HNO₂ = RONO₂↑ + H₂O

Образовавшиеся алкилнитриты, которые находятся в газообразном состоянии над жидкостью, вводят в дозатор хроматографа, хроматографируют. После получения хроматограммы производят идентификацию пиков: определяют абсолютное расстояние удерживания каждого полученного пика. Затем рассчитывают относительное расстояние удерживания пиков. В качестве стандарта используют пропилнитрит. Абсолютное расстояние удерживания стандарта, пропилнитрита, определяется по той же методике со стандартным 4‰ раствором спирта изопропилового. Полученные данные сравнивают с данными таблицы 1 и 2 и делают вывод о том, какие спирты обнаружены в биожидкости.

Условия хроматографирования: прибор МХК с детектором катарометром, колонка: НЖФ - ПЭГ - 1500, носитель ИНЗ-600, Т кол. = 60 °С, газоноситель - гелий.

Качественный анализ смеси спиртов: в пенициллиновый флакон помещают 0,5 мл биологической жидкости 0,5 мл 50% раствора кислоты трихлоруксусной, флакон закрывают резиновой пробкой и помещают в металлический стакан, укупоривают металлической крышкой с отверстием и затем вводят шприцом 0,25 мл 30% раствора натрия нитрита. Взбалтывают, выдерживают 1-2 мин., сухим, чистым шприцом отбирают 1,0 мл газовой фазы и вводят в дозирующее устройство хроматографа. На хроматографической ленте отмечают момент ввода пробы.

Таблица 1

Расстояния удерживания алкилнитритов на приборе № 1

Алкилнитрнт	l_абс_.	l_отн_.
Этилнитрит	2,3	0,64
Пропилнитрит (станд)	3,6	1,00
Изопропилнитрит	2.6	0,72
Бутилнитрит	6,8	1,88
Изобутилнитрит	4,6	1,27
Амилнитрит	13,5	3,75

Таблица 2

Расстояния удерживания алкилнитритов на приборе № 2

Алкилнитрит	l_абс_.	l_отн_.
Этилнитрит	3,2	0,61
Пропилнитрит (станд)	5,2	1,00
Изопропилнитрит	4,8	0,92
Бутилнитрит	9,6	1,84
Изобутилнитрит	6,5	1,25
Амилнитрит	18,8	3,61

Для количественного определения спирта этилового в биологических объектах применяют метод внутреннего стандарта. В качестве внутреннего стандарта применяют спирт пропиловый. Смесь этилнитрита и пропилнитрита вводят в дозатор хроматографа и проводят хроматографирование. Расчёт количественного содержания этилового спирта в исследуемом объекте

производят по калибровочному графику (средние значения hэтан., hпроп., hэтан./hпроп. приведены в табл. 3 и 4). Калибровочный график строят с использованием стандартных растворов, содержащих 1, 2, 3, 4, 5‰ спирта этилового в воде и 1 мл раствора спирта пропилового в воде в концентрации ‰. Калибровочный график строят ежедневно, т.к. при повторном включении прибора условия хроматографии могут изменяться. Поскольку исследуемые биологические жидкости отличаются по вязкости от водных растворов спиртов, то вводят поправочные коэффициенты (0,95 для крови и 1,05 для мочи), и содержание этанола в биологической жидкости рассчитывают с учётом данных коэффициентов.

Количественное определение спирта этилового: в пенициллиновый флакон помещают 0,5 мл биологической жидкости, 0,5 мл внутреннего стандарта 4‰ раствора пропанола, 0,5 мл 50% раствора кислоты трихлоруксусной, флакон закрывают резиновой пробкой и помещают в металлический стакан, укупоривают металлической крышкой с отверстием и затем вводят шприцом 0,25 мл 30% раствора натрия нитрита. Взбалтывают, выдерживают 1-2 мин, сухим, чистым шприцом отбирают 0,5 мл газовой фазы и вводят в дозирующее устройство хроматографа. На хроматографической ленте отмечают момент ввода пробы. Получив хроматограмму, определяют высоты пиков этилнитрита (hэтан.) и пропилнитрита (hпроп.), находят отношение высот (hэтан./hпроп.), затем по калибровочному графику определяют концентрацию этанола в растворе.

Таблица 3

Дата добавления: 2020-12-12; просмотров: 130; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 1 2 3 456 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!