IV. Примеры ситуационных задач
Задача 1
Используя иллюстрации (микрофотографии мазков крови, соинкубированных с объектами фагоцитоза из 30-минутной и 120-минутной проб), рассчитать показатели теста, поставленного с целью определения фагоцитарной активности. Дать заключение о состоянии фагоцитарной активности данного образца крови.
Задача 2
Предложите тесты для оценки состояния гуморального врожденного иммунитета. Для каждого теста назовите вид(ы) исследуемого материала; интерпретируйте значение повышенных и пониженных показателей.
Задача 3
Предложите тесты для оценки состояния клеточного врожденного иммунитета. Для каждого теста назовите вид(ы) исследуемого материала; интерпретируйте значение повышенных и пониженных показателей.
Задача 4
При учете РА на стекле выделенной чистой культуры бактерий получены следующие результаты: в капле с изотоническим раствором хлорида натрия имеется равномерно мутная суспензия, в каплях с диагностическим дизентерийными сыворотками Зонне и Флекснера ¾ мелкие белые хлопья на фоне прозрачной жидкости. Дайте заключение о специфичности реакции, результате идентификации чистой культуры бактерий и объясните полученные результаты.
Задача 5
При учете РА на стекле выделенной чистой культуры бактерий получены следующие результаты: в капле с изотоническим раствором хлорида натрия имеется равномерно мутная суспензия, в каплях с диагностическим дизентерийными сыворотками Зонне ¾ мелкие белые хлопья на фоне прозрачной жидкости и Флекснера ¾ равномерно мутная суспензия. Дайте заключение о специфичности реакции, результате идентификации чистой культуры бактерий и объясните полученные результаты.
|
|
|
Тема 2: Серологический метод диагностики инфекционных заболеваний (продолжение). Реакция преципитации. Реакция связывания комплемента. Реакция нейтрализации
Цель: знать механизмы, технику постановки и учёт серологических реакций: реакция преципитации (РП), реакция связывания комплемента (РСК), реакция нейтрализации (РН); уметь ставить и учитывать РП по Асколи в диагностике сибирской язвы, учитывать РП в геле с целью определения токсигенности дифтерийной палочки (РН токсина антитоксической сывороткой), РСК в диагностике сыпного тифа.
Задание на дом:
I. Вопросы для самоподготовки:
1. Реакция преципитации. Определение, виды.
2. РСК: этапы реакции, методика определения рабочей дозы комплемента, подготовка гемолитической системы.
3. Реакции нейтрализации.
II. Базовый текст
Реакция преципитации. Определение, виды
Реакция преципитации (РП)(лат. praeci pito ¾осаждать) ¾ это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количествах; избыток одного из них снижает уровень образования видимого иммунного комплекса.
|
|
|
Реакции преципитации ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое распространение получили разновидности реакции преципитации в полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектро форез и др.
Реакция кольцепреципитации.Реакцию проводят в узких преципитационных пробирках с иммунной сывороткой, на которую наслаивают растворимый антиген. При оптимальном соотношении антигена и антител на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Избыток антигена не влияет на результат реакции кольцепреципитации вследствие постепенной диффузии реагентов к границе жидкости. Если в качестве антигенов в реакции кольцепреципитации используют прокипяченные и профильтрованные водные экстракты органов или тканей, то такая реакция называется реакцией термопреципитации (реакция Асколи, при сибирской язве).
|
|
|
Реакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони.Для постановки реакции расплавленный агаровый гель тонким слоем выливают на стеклянную пластинку и после его затвердевания в нем вырезают лунки размером 2-3 мм. В эти лунки раздельно помешают антигены и иммунные сыворотки, которые диффундируют навстречу друг другу. В месте встречи в эквивалентных соотношениях они образуют преципитат в виде белой полосы. У многокомпонентных систем между лунками с разными антигенами и антителами сыворотки появляется несколько линий преципитата; у идентичных антигенов линии преципитата сливаются; у неидентичных — пересекаются.
Реакция радиальной иммунодиффузии.Иммунную сыворотку вносят в расплавленный агаровый гель и равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в которые помещают антиген в различных разведениях. Антиген, диффундируя в гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др.
|
|
|
Иммуноэлектрофорез — сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов вносится в лунки геля и разделяется в геле с помощью электрофореза. Затем в канавку параллельно зонам электрофореза вносят иммунную сыворотку, антитела которой, диффундируя в гель, образуют в месте «встречи» с антигеном линии преципитации.
Реакция флоккуляции (по Рамону) (лат. floccus — хлопья шерсти) ¾ появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) в пробирке при реакции токсин ¾ антитоксин или анатоксин ¾ антитоксин. Ее применяют для определения активности антитоксической сыворотки или анатоксина.
Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 326; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!