Реакция преципитации и ее разновидности. Механизм и методы постановки, практическое применение.

Билет №1

Генетические и биохимические механизмы Лекарственной устойчивости. Путь преодоления лекарственной устойчивости бактерий.

Антибиотико-резистентные бактерии возникли и стали распрост­раняться сразу после внедрения антибиотиков в клиническую прак­тику. Как тревожный сигнал прозвучали сообщения о появлении и распространении пенициллинрезистентных стафилококков. В насто­ящее время повсеместно возрастает число лекарственно-устойчивых форм бактерий. Так, частота обнаружения пенициллиноустойчивых ста­филококков доходит до 90-98%,Устойчивость к анти­биотикам чаще возникает у бактерий, реже у спирохет, риккетсий, хламидии, микоплазм, дрожжеподобных грибов.

Механизмы резистентности микроорганизмов к антибиотикам и другим химиотерапевтическим препаратам сложны и разнооб­разны. Главным образом они связаны со следующими причинами:

1) превращением активной формы антибиотика неактивную форму путем ферментативной инактивации и модификации;

2) утратой проницаемости клеточной стенки для определенного химиотерапевтического препарата;

3) нарушениями в системе специфического транспорта данного препарата в бактериальную клетку; 

4) возникновением у микроорганизмов альтернативного пути об­разования жизненно важного метаболита, заменяющего основной путь, блокированный препаратом.

'механизмы резистентности могут быть подразделены на первич­ные и приобретенные.к пер в и ч н ы м механизмам относятся те, которые связаны с отсутствием «мишени» для действия данного препарата; к О б р е т е н н ы м - изменением «мишени» в результате модификаций, мутаций, рекомбинаций. В первом случае речь идет о естественной резистентности, Однако чаще всего резистентность к химиотерапевтическим препаратам, в том числе антибиотикам, приобретается микробными клетками с генами резистентности (г-гены); которые они получают в процессе свой жизнедеятельности от других клеток данной или соседней популяции. Устойчивость к антибиотикам бактерий, грибов и простейших также возникает в результате мутаций в хромосомных генах, контролирующих образование структурных и химических компонентов клетки, являющихся «мишенью» для действия препарата. Биохимические механизмы резистентности бактерий к бета-JIактамным антибиотикам разнообразны. Они могут быть связаны с индуцибельным синтезом бета-лактамазы, можно объяснить снижением проница­емости наружнои мембраны грамотрицательных бактерий.

Генет и биох мех лекарств устойч. 1.первичная-м б связ с отсутств мишени для возд-я а/б. 2.приобр в рез-те мутаций, рекомб. модифик. модиф-стаф :а/б пенициллин выраб структуры, разр а/б 3.мутац-некот структ кл изм и станов недоступн; рекомб-получ Р-плазмиды. Пути преодол-рац а/б/терапия. Борьба с лекарственно-устойчивыми бактериями проводится разными путями. К ним относятся систематическое получение новых химиотерапевтических препаратов, которые отличаются отсуществующих механизмом антибактериального действия. Основным направлением является химическая модификация извстных антибиотиков с защищенными активными группами,устоичивыми к бактериальной ферментам. Кроме того, проводятся исследования по изысканию ингибиторов, подавляющих активность бактериалых ферментов, препятствует адгезии на клетках макроорганизмов,а также ограничения распространения лекарственно-устойчивых форм бактерий.

 

Попятия «инфекция», «инфекционный процесс», «инфекционая болезнь». Условия возникновения инфекционной болезни.

Инфекция или инфекционный процесс- ЭТО совокупность физиологических или патологических реак­ЦИЙ, которыми макроорганизм отвечает на внедрение возбудителя. Вызывая нарушения его внутренний среды и физиологических функций.

Для возникновения инфекционного заболевания необходимо сочетание следующих факторов:

наличия микробного агента;

восприимчивости макроорганизма;

наличия среды, в которой происходит зто взаимо­действие.

Микробный агент - это патогенные и условно-пато­генные микроорганизмы.

Эпидемия - это широкое распространение инфек­ции в популяции с охватом больших территорий.

Пандемия - распространение инфекции практиче­ски на всю территорию земного шара.

Эндемичные заболевания (с природной очагово­стью) - это заболевания, для которых отмечены тер­риториальные ареалы с повышенной заболеваемо­стью данной инфекцией.

Классификация инфекций

1. По этиологии: бактериальные, вирусные, прота­зойные, МИКОЗЫ, микст-инфекции.

2. По количеству возбудителей: моноинфекции, по­лиинфекции.

З. По тяжести течения: легкие, тяжелые, средней тя­жести.

4. По длительности: острые, подострые, хрониче­ские. латентные.

5. По путям передачи: 1) горизонтальные:

а) воэдушно-капельный путь;

б) фекально-оральный;

в) контактный; г) трансмиссивный; д) поповой;

2) вертикальные:

а) от матери к плоду (трансnлацентарный);

б) от матери к новорожденному в родовом акте;

артифициаnьные (искусственные).

В зависимости от локализации возбудителя разли­чают:

очаговую инфекцию;

генерализованную инфекцию. Наибоnее тяжелая форма - сепсис.

Выделяют следующие периоды инфекционных бо­лезней:

инкубационный; от момента проникновения возбу­дителя в организм до появления первых признака8 заболевания;

nродромальный; характеризуется появлением первых неясных общих СИМПТОМОВ. Возбудитель интенсивно размножается, колонизирует ткань, начинает продуцировать ферменты и токсины. Продолжительность – от нескольких часов до не скольких дней;

разгар болезни; характеризуется nоявnением спе-

цифических симптомов;

исход:

а) летальный ИСХОД:

б) выздоровление (клиническое и микробиологиче­ское). КЛиническое выздоровление: симптомы за­болевания угасли, но возбудитель еще находится в организме. Микробиологическое - полное вы­здоровление;

В) хроническое носительство.

Герпесвирусы, классификация и общая характеристика. Вирусы герпеса патогенные для человека, их роль в патологии человека. Особенности репродукции вирусов герпеса в клетке, онкогенные функции генома герпесвирусов. Лабораторная диагностика и специфическая профилактика и лечение герпетических инфекций.

Семейство Herpesviridae, подсемейства:

1)a-herpesviruses (1 и 11 типов, герпес-зостер);

2)b-herpesviruses;

3)g-aherpesviruses.

Герпес-вирусы относительно нестабильны.

Крупные вирусы, ДНК 2-нитчетые, капсид кубической симметрии с шипиками. Образовывают гигантские клетки. Обладают нейро- и лимфотропностью. Культивируется на культуре клеток. Инфицирование происходит в детском возрасте. Множественные пути заражения. После перенесенной инфекции остается пожизнен­ный иммунитет. Вирус пожизненно персистирует в нервных ган­глиях. При снижении защитных сил организма проис­ходит развитие вирусной инфекции.

Диагностика:1.Выявление многоядерных гигантских клеток. 2.ПЦР-выявления ДНК. 3.Вирусологический метод.

Профилактика:1.Инактивированая вакцина

-цельновирусы

-субъединицы(гуморальный и клеточный иммунитет)

А-герпес типа I вызывает афтозный стоматит в ран­нем детском возрасте, лабиальный герпес.

 А-герпес типа 11 вызывает генитальный герпес, гер­пес новорожденных. Герпес-зостер является возбуди­телем опоясывающего лишая и ветряной оспы.

 В-герпес (цитомегаловирус) при размножении в клетках культуры вызывает цитопатичеекие измене­ния. Имеет сродство с клетками слюнных желез и по­чек, вызывая в них образование крупных многоядер­ных включений. При развитии заболевания имеют место вирусемия, поражение внутренних органов, ко­стного мозга, ЦНС, развитие иммунопатологических заболеваний.

g-герпес-вирус (вирус Эпштейна-Бара) вызывает инфекционный мононуклеоз.

 

Билет №2

Рациональная антибиотикотерапия. Побочное действие антибиотиков на организм человека и на микроорганизмы. Формирование антибиотико-резистентных и антибиотикозависимых форм бактерий.

Рациональня а\бтерапия.- направлена на предупреждение резистентных форм, терапевтической концентрации. Минимальная ингибирующая концентрация/или мин подавляющая конц-это мин конц а/б, подавляющая рост бакт. Терминальная конц в 2-4 р больше. Меры борьбы направлены на получение резистентных видов: 1)новые гр или хим модификац а/б 2)нельзя использовать как крнсерванты 3)получ а/б, которые подавляют адгезию и ферменты бактериальной клетки 4)прицельная а/б терапия-определяет чувствительность штамма к а/б и лечат тем, к которые наиболее чувствительны 5)нельзя использовать в медецине-в ветеринарии 6)запрещается для профилактики.

Побочное действие антибиотиков.

Для макроорганизма:

- токсическое действие;

- дисбактериозы;

- аллергические реакции;

- иммунодепрессивное действие;

- эндотоксический шок.

Для микроорганизмов :

- формирование атипичных форм микробов;

- формирование антибиотикорезистентных и антибиотикозависимых форм микроорганизмов.

 

Реакция преципитации и ее разновидности. Механизм и методы постановки, практическое применение.

Реакция преципитации и ее варианты. Сущность данной реак­ции состоит в осождение (прециnитации) антигена, находящегося в дисперсном коллоидном состоянии, воздействием специфических антител в растворе электролита. Механизмы реакций агглютинации и преципитации аналогичны и описываются теорией «решетки».

Реакция преципитации является высокочувствительным тестом, так как позволяет обнаружить малые количества антигена или гапте­на. Высокая чувствительность реакции преципитации позволяет ис­пользовать ее для выявления антигенов с помощью известных анти-сывороток. В одном из вариантов последовательные разведения ан­тигена наслаивают на стандартное разведение диагностической сыворотки в пробирках, при этом осадок образуется в виде кольца на границе двух сред (кольцепреципитация). Реакцию оценивают по мак­симальному разведению антигена, при котором наблюдается кольцо преципитации визуально. Кроме того, помутнение может быть зафиксировано инструментальными методами - нефелометрией и др. Реакция преципитации применяется в лабораторной практике при диагностике инфекционных заболеваний, а также в судебной медицин­ской экспертизе для определения видовой принадлежности белков, в частности белков кровяных пятен, спермы, помощью этой ре­акции в санитарной практике определяют фальсификацию рыбных и мясных изделий. В биологии реакция преци­питации используется становления сте­пени ил филогенетического родства различных видов животных и растений.

Иммунодиффузия. взаимодействие антигена с антителами происходит не жидкости, а в геле

ИММ ноэлектрофорез (ИЭФ) представляет собой электрофореза в геле с иммунодифузией.

Иммуноблотиг - один из современных высокоточных вариантов электрофореза- с анализом разделенных белков иммунологическим методом.

Реакция Кумбса (антиглобулиновый тест.). Неполные антитела в отличие от нормальных моновалентны, поскольку они имеют один активный центр, способный взаимодействовать только с одним эпи­топом: в то время как другие эпитопы остаются не связанными. В ре­зультате этого не происходит образования крупных комплексов, вы­падающих в осадок в растворе электролита. Последние проявляются только в реакциях с бивалентными антителами. Для исправления это­го положения вводится антиглобулиновая сыворотка (АГС), содержа­щая бивалентные антитела к глобулину, которая свяжет между собой моновалентные антитела, содержащиеся в исследуемом материале Таким образом про изойдет визуально видимая реакция гемагглюти­нации или агглютинация, свидетельствующая о наличии в исследуе­мой сыворотке неполных (моно валентных) антител. Например, в слу­чае беременности резус-отрицательной женщины резус-положитель-

3)     

4)

5)

плодом  у нее в сыворотке крови появятся неполные антитела. Для их выявления в пробирку с исследуемой сывороткой крови вно­сят резус-положительные эритроциты, а затем АГС. Появление ге­магглютинации свидетельствует о положительной реакции.

Стафилококки,классификация,характиристика биологических свойств. Токсины, ферменты патогенности. Заболевания вызванные стафилококками. Патогенез, эпидемиология, роль стафилококков в госпитальных инфекциях. Методы микробиологической диагностики стафилококковой инфекции, специфическая профилактика и терапия.

Род стафилококки. к сем. микрококкоцеа. образуют капсулу. Элективная среда-молочно-солевой агар. Колонии гладкие, блестящие, без запаха, приподняты над агаром. Диф-диагн.ср.- с добавл. соли. Все Гр+ кокки, расположенные гроздьями. Факультативн анаэробы, на обычных питательных средах образуют пигмент: белый, золотист, лим-желт. хорошо растут на пит ср, содерж Nacl ,расщепляют многие углеводы. Факторы патогености: капсула, лейкоцидин, гемолизин, белок А, энтеротоксин, фибринолизин (растворяет фибрин, ограничивающий местн. восп. очаг), плазмокоагулаза (свертывание плазмы крови), гиалуронидаза (спос-ет распр-ю стаф. в тк. вследствие нарушения прониц-ти) лецитиназа (разруш.лецитин в составе клет.мембр. лейкоцитов), ДНКаза-имеет золотистый 1) ф-р колонизации: ф-т липаза- разр жирн к-ты ,способствует накоплению. 2)ф-р инвазии-гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза 3) факт защиты от фагоцитоза: микрокапсула, пептидогликан, тейхоевые к-ты, белок А 4) антилизоцимная акт-ть 5) факт, поврежд кл и тк: гемотоксин=гемолизин. Стаф энтеротоксиныA,B,C,D,E- накапл в продуктах и вызыв пищ отравлен(пищ токсикоз) 6)ф-р защиты от антимикр препаратов:ф-т беталактамаза.Эпид-я:Обнар-ся на коже и слиз. Резервуаром золот. Стаф. явл-ся здоровые носители и больные. Наиб. опасность предст. бактерионосители и больные с кожными поражениями. Стаф. резистентны к усл. ср. Стаф вызыв всевозм воспал проц: ранев инф,пневмония,бронхиты.пораж почек и мочепол сист и генерализ инф. менингит и сепсис. Имм-т после инф-ии недолг, местн. Диагн: 1) иссл материал(гной) подверг. б/с иссл-ю и высевают на пит. ср.2) б/л:исслед мат-л кровь, мокрота, фекалии. После выделения чист. культ. опред. видов. принадл-ть. Для стаф.aureus-плазмокоагулаза, гемолизин и белокА. Фаготипирование для установления источника инф-ии. Также необходимо определение чувств-ти к ряду а/б. 3)серол прим редко Проф-ка: борьба с источн инф-ии, предупрежд забол в ЛУ. Леч-е: а/б (в-лактамные препараты), цефалоспорины, реже тетрациклины

 

Билет№3

---

Дата добавления: 2019-07-15; просмотров: 560; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!