Особенности анаэробного дыхания.Способы культивирования анаэробов

Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительно-восстановительный потенциал среды, соз­дать условия анаэробиоза, т. е. пониженного содержания кислорода в среде и окружающем ее пространстве. Это достигается применением физических, химических и био­логических методов.

 

Физические методы.

 

Основаны на выращивании мик­роорганизмов в безвоздушной среде, что достигается:

 

1) посевом в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества;

 

2) посевом микроорганизмов в глубину плотных пи­тательных сред;

 

3) механическим удалением воздуха из сосудов, в ко­торых выращиваются анаэробные микроорганизмы;

 

4) заменой воздуха в сосудах каким-либо индиффе­рентным газом.

Химические методы.

 

Основаны на поглощении кисло­рода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэро-стате, эксикаторе) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия Na2S204.

 

Биологические методы.

 

Основаны на совместном вы­ращивании анаэробов со строгими аэробами. Для этого из застывшей агаровой пластинки по диаметру чашки вырезают стерильным скальпелем полоску агара шири­ной около 1 см. Получается два агаровых полудиска в одной чашке. На одну сторону агаровой пластинки засе­вают аэроб, например часто используют S. aureus или Serratia marcescens. На другую сторону засевают ана­эроб. Края чашки заклеивают пластилином или заливают расплавленным парафином и помещают в термостат. При наличии подходящих условий в чашке начнут размно­жаться аэробы. После того, как весь кислород в прост­ранстве чашки будет ими использован, начнется рост анаэробов (через 3-4 сут). В целях сокращения воздуш­ного пространства в чашке питательную среду наливают возможно более толстым слоем.

 

Комбинированные методы.

 

Основаны на сочетании фи­зических, химических и биологических методов создания анаэробиоза.

 

Рост и размножение микроорганизмов.Способы подсчета количества микробных клеток.Способы оценки микробной массы.

Рост бактерий- это увеличение количества, массы и размеров всех микробной клетки, начинающийся сразу после ее деления. Рост неразрывно связан с размножением.

 

Размножение у бактерий– процесссамовоспроизведения микробной клетки. Он начинается сразделения ДНК нуклеоида на две дочерние нити, каждая из которых затем достраивается комплементарной нитью, при этом одновременно происходит образование двух дочерних клеток (полуконсервативный способ). Бактерии размножаются поперечным делениемсрезким увеличением количества клеток в популяции, процесс повторяется через одинаковые промежутки времени (от нескольких минут до нескольких суток), являясь индивидуальной генетической характеристикой микробного вида. При делении могут образовываться либо две одинаковые клетки, либо две асимметричные (полиморфные).

Подсчет живых бактерий осуществляется путем количественного посева бактерий на питательные среды с последующим подсчетом количества колоний. Для этого посевной материал равномерно распределяют по поверхности хорошо высушенного питательного агара. Можно также посевной материал сначала смешать с расплавленным агаром, а затем разлить (либо в пустые чашки, либо на поверхность застывшего питательного агара в чашке Петри).

 

Периодическое культивирование.фазы и характеристики.Синхронные культуры,способы получения, использование. Непрерывное культивирование.

В условиях непрерывного культивирования в сосуд, содержащий популяцию бактерий, подается свежая питательная среда и из него одновременно удаляется часть среды с клетками микроорганизмов. Это позволяет на длительное время задержать культуру в состоянии логарифмического роста.Синхронные культуры – это популяции микроорганизмов, в которых все клетки находятся на одинаковой стадии клеточного цикла и делятся одновременно. Такие культуры часто необходимы для изучения процессов обмена веществ на протяжении цикла клеточного деления.Периодический метод культивирования предусматривает внесение посевного материала в питательную среду (инокуляция клетками среды) в начале процесса и получение культуры по достижении заданной фазы развития популяции. Концентрация микроорганизмов в периодической культуре нарастает и останавливается либо из-за лимитирования субстратом, либо из-за ингибирования токсичными продуктами жизнедеятельности. Для этого типа культивирования характерно непрерывное изменение физиологического состояния клеток, вызванное изменениями условий, производимыми жизнедеятельностью самих клеток. Отсюда следует, что периодическая система может поддерживать размножение клеток только в течение ограниченного времени. После фазы экспоненциального (логарифмического) роста популяция начинает испытывать недостаток элементов питания и угнетается продуктами метаболизма, что ведет к нарушению физиологического состояния клеток. Периодические культуры находятся в неустойчивом состоянии, что является серьезным недостатком, особенно когда их применяют при изучении свойств микроорганизмов.Практически все системы периодического культивирования являются закрытыми, поскольку микроорганизмы в них размножаются и проходят все фазы развития без притока питательной среды и оттока культуральной жидкости.

 

 

 21. Влияние физических факторов на микроорганизмы
Физические факторы:температура
Высокие температуры – бактерицидное действие
Низкие температуры – бактериостатическое и бактерицидное действие (исключение – спорогенные формы)

Классификация по оптимальной температуре
1 – психрофилы растут при температуре от -10 до +40С, зона оптимального роста от +10 до +15С; например, возбудитель чумы

2 – мезофилы растут при температуре от +15 до +45С, оптимум роста 30-37С, к ним относится основная группа патогенных и условно-патогенных бактерий

3 – термофилы растут при температуре от +40 до +90С, оптимум роста 50-60С; к ним относятся обитатели горячих источников, бактерии участвующие в процессах самонагревания навоза, сена    

                Атмосферное давление не оказывает существенного влияния на бактерии

К осмотическому бактерии высокочувствительны, гиперосмотическое и гипоосмотическое давление вызывают осмотический шок – повреждение или распад бактериальной клетки

Высушивание

---

Дата добавления: 2019-02-22; просмотров: 257; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!