Індикація вірусів – це виявлення вірусів у досліджуваному матеріалі без встановлення їх належності до родини, роду, виду, сероваріанту
• Методи індикації
• Цитопатична дія віруса (ЦПД) – загальні дистрофічні зміни клітин або специфічні ураження у вигляді включень або багатоядерних клітин – синцитіїв або симпластів
• Бляшкоутворення – бляшки – це осередки зруйнованих інфікованих вірусом клітин моношару, що заходиться під агаровим покриттям
• Кольорова проба – використовують середовища Ігла або 199, які містять індикатор, який реагує на зміну рН середовища. При появі в клітині метаболітів середовище змінює забарвлення на жовте (інфіковані вірусом клітини – не метаболізують)
• Реакція гемаглютинації (РГА) основана на спроможності деяких вірусів, що мають гемаглютинін в оболонці склеювати еритроцити
• Реакція гемадсорбції (РГадс) – дозволяє виявити віруси, які містять гемаглютинін у клітинних культурах до розвитку ЦПД. На інфікованих вірусом клітинах спостерігається адсорбція еритроцитів
• Ідентифікація вірусів – встановлення їх варіантної, видової, родової та родинної належності за допомогою діагностичних сироваток
• В основі лежить постановка серологічних реакцій
Методи ідентифікації вірусів
• Реакція нейтралізації (РН)
• Реакція гальмування гемадсорбції
• Реакція гальмування гемаглютинації
• Методи ідентифікації вірусів
• Реакція непрямої гемаглютинації
• Реакція зв ’ язування комплементу (РЗК)
• Імуноферментний аналіз (ІФА)
• Радіоімунний аналіз
|
|
|
• Методи ідентифікації вірусів
• Імунна електронна мікроскопія (ІЕМ)
• Реакція імунофлюоресценції (РІФ)
• Зустрічний імуноелектрофорез
• Метод молекулярної гібридизації НК
Сучасні методи лабораторної діагностики вірусних захворювань
• Мікроскопічні методи
- цитоскопічний
- люмінісцентна мікроскопія
- електронна мікроскопія
- імунна електронна мікроскопія
• Культуральний метод (вірусологічний)
• Серологічний метод (РЗК, РГГА, РПГА, ІФА, РІА, імуноелектрофорез)
• Молекулярно-генетичний метод
- реакція гібридизації ДНК або РНК
- полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)
Етапи культурального методу
• Забір матеріалу
• Обробка матеріалу з метою звільнення від супутньої бактеріальної мікрофлори
• Культивування вірусу
• Індикація і титрування вірусу
• Ідентифікація
• Бактеріофаги
Бактеріофаги – це віруси, що репродукуються в клітинах бактерій
Розрізняють:
• За вірулентністю
- вірулентні (спричиняють лізис клітини)
- помірні (інтегрують ДНК в геном, співіснують з клітиною в формі профага)
• За спектром дії
- полівалентні (інфікують бактерії одного роду)
- моновалентні (інфікують бактерії одного виду)
|
|
|
- типоспецифічні (інфікують бактерії певного варіанту одного виду)
• Будова бактеріофага
• Морфологічні групи бактеріофагів
• Ниткоподібні фаги
• Голівчасті з рудиментарним відростком
• Голівчасті з коротким відростком
• Голівчасті з нескорочувальним відростком
• Голівчасті з скорочувальним відростком і базальною пластинкою
• Етапи репродукції бактеріофагів
• Адсорбція
• Проникнення (ін‘єктування нуклеїнової кислоти)
• Репродукція
• Зборка вірусних фаговів у цитоплазмі бактерій
• Вихід фагових частинок із клітини після її лізису
• Помірні бактеріофаги завершують репродукцію на етапі інтеграції нуклеїнової кислоти в геном клітини-хазяїна
• Використання фагів
Моновалентні вірулентні фаги використовують для:
• Лікування і профілактики інфекцій
• Видової ідентифікації в діагностиці інфекцій
• Фаготипування епідемічних штамів збудників
Помірні фаги використовують:
• В генній інженерії для генетичних рекомбінацій
• Для отримання лізогенних культур-індикаторів мутагенних факторів
• 36. Ідентифікація вірусів. Реакції гемаглютинації, гальмування гемаглютинації, гемадсорбції, нейтралізації.
• Ідентифікація
|
|
|
• Бактеріофаги
Бактеріофаги – це віруси, що репродукуються в клітинах бактерій
Розрізняють:
• За вірулентністю
- вірулентні (спричиняють лізис клітини)
- помірні (інтегрують ДНК в геном, співіснують з клітиною в формі профага)
• За спектром дії
- полівалентні (інфікують бактерії одного роду)
- моновалентні (інфікують бактерії одного виду)
- типоспецифічні (інфікують бактерії певного варіанту одного виду)
• Будова бактеріофага
• Морфологічні групи бактеріофагів
• Ниткоподібні фаги
• Голівчасті з рудиментарним відростком
• Голівчасті з коротким відростком
• Голівчасті з нескорочувальним відростком
• Голівчасті з скорочувальним відростком і базальною пластинкою
• Етапи репродукції бактеріофагів
• Адсорбція
• Проникнення (ін‘єктування нуклеїнової кислоти)
• Репродукція
• Зборка вірусних фаговів у цитоплазмі бактерій
• Вихід фагових частинок із клітини після її лізису
• Помірні бактеріофаги завершують репродукцію на етапі інтеграції нуклеїнової кислоти в геном клітини-хазяїна
• Використання фагів
Моновалентні вірулентні фаги використовують для:
• Лікування і профілактики інфекцій
• Видової ідентифікації в діагностиці інфекцій
|
|
|
• Фаготипування епідемічних штамів збудників
Помірні фаги використовують:
• В генній інженерії для генетичних рекомбінацій
• Для отримання лізогенних культур-індикаторів мутагенних факторів
37. Мікрофлора води, повітря, грунту. Санітарно-показникові мікроби зовнішнього середовища.
МІКРОФЛОРА ВОДИ
До аеробних мікроорганізмів, що живуть у воді, належать Рзеїіоіо-топаз Ниогезсепз, Місгососсиз гозеиз та ін. Анаеробні бактерії у воді трапляються дуже рідко.
У мулистих відкладеннях океанів, морів, боліт, гарячих мінеральних джерел, нафтових свердловин та інших місцях, позбавлених кисню, існують найстародавніші живі істоти нашої планети — мета-нотворні бактерії, які для своєї життєдіяльності використовують водень і вуглекислий газ.
* Колі-титр — найменший об'єм у мілілітрах (або маса в грамах) досліджуваного матеріалу, в якому виявляють Е. соїі.
Хемолітотрофи було виявлено в чорних гейзерах, де тиск води досягає 2533,1 кП.І (259 атм). їх легко вирощувати в штучних умовах при температурі 480 °С і тискові 26851,1 «Па (265 агм). «» Мікрофлора води річок залежить від ступеня їх біологічного забруднення та якості очистки стічних вод, які спускають у русла річок.
Із морської води прибережної зони систематично висіваються галофільні вібріони — V. рагапаетоіуіісиз, V. апдіІоІуНсиз, які спричинють у людей гострий гастроентерит, що виникає в результаті вживання у їжу малосольної риби, а також недостатньо термічно оброблених креветок і мідій.
П о л і с а п р о б н а зона — дуже забруднена вода, бідна на кисень і багата на органічні сполуки. Кількість бактерій в 1 мл досягає 1 мтш і більше, переважають Е. соїі та анаеробні бактерії, які спричинюють процеси гниття і бродіння.
У м е з о с а п р о б н і й зо н і (зона помірного забруднення) мінералізуються органічні речовини з інтенсивним окисленням і вираженою нітрифікацією. Кількість бактерій в 1 мл становить сотні тисяч.
Олігосапробна зона характерна для чистої води. Кількість бактерій у ній незначна, в 1 мл налічується кілька десятків або сотень:; Е. соїі у цій зоні немає.
Катаробна зона — зона дуже чистої води (особливо в осінньо-зимовий період), вона розташована вдалині від населених пунктів і берегів.
Залежно від інтенсивності забруднення водойм.у них можуть бути і певний час зберігатись життєздатними патогенні бактерії. Так, наприклад, у водопровідній, морській, річковій і колодязній воді сальмонели можуть бути від 2 діб до 3 місяців, шигели — 5—9 діб, лептоспірп — 7 —150 діб. Холерний вібріон Ель-Тор виживає у воді річок, морів протягом кількох місяців, збудник туляремії — від кількох діб до 3 місяців.
Водопровідну воду вважають придатною для споживання, якщо загальна кількість бактерій в 1 мл дорівнює 100, сумнівною — при 100—150, забрудненою — при 500 і більше. У воді колодязів і відкритих водойм кількість бактерій в 1 мл не повинна перевищувати 1000. Крім того, якість води визначають за наявністю в ній Е. соїі.Показник біологічного забруднення води оцінюють за колі-ін-
дексом і колі-титром. Водопровідна вода повинна мати колі-індекс у межах 2—3, а колі-титр — 300. Для води шахтних колодязів допустимі колі-ІІІд'екс~не'~більше 10, а колі-титр не менше 100.
Оскільки 5. {аесаііз постійно живе у кишках людини й теплокровних тварин і має високу стійкість проти температурних коливань та інших факторів навколишнього середовища, кількість його поряд з колі-титром і колі-індексом є показником ступеня біологічного забруднення води, стічних вод, грунту й інших об'єктів.
Вода — могутній фактор передачі збудників багатьох інфекційних захворювань: черевного тифу, сальмонельозного гастроентериту, холери, дизентерії, лептоспірозу, туляремії, кампілобактеріозу, амебіазу, ентеровірусних інфекцій (поліомієліт, гепатит А та ін.).
Дуже забруднюються річки і моря стічними водами, в яких багато органічних речовин, що призводить не тільки до тривалого виживання, а й до значного нагромадження ентеробактерій і вібріонів.
Ентеровіруси найчастіше виділяються з води влітку і восени, коли частість вірусоіюсійства збільшується в 2—3 рази порівняно з осін-ньо-зм\юв;щ п фіочом. Масивне і тривале виділення ентеровірусів із кишок хворих і вірусоносіїв зумовлює значне обсіменіння господар-сько-Іюбутовчх стічних воа (ЗО—85 %). Ентеровіруси виявляли у водоймах, особливо при колі-титрі 0,1 і нижче, їх знаходили і в питній воді, яка пройшла відповідну очистку і знезараження Вододжерела інфікуються в результаті потрапляння в них не-очищених стічних вод інфекційних і ветеринарних лікарень, каналізаційних вод; відкриті вододжерела забруднюються в результаті викидів річкових суден, потрапляння зливових вод, екскрементів тварин і людей, трупів загиблих тварин.
Під час купання в невеликих ставках і басейнах з нехлорованою водою можливе зараження людей лептоспірозом, кон'юнктивітом, що спричинюється хламідіями, стафілодермією, епідермією.
Методи взяття проб, визначення мікробного числа, виявлення бактерій кишкової групи та ентеровірусів описані в посібниках для практичних занять і спеціальних методичних інструкціях.
У зв'язку із значною санітарно-епідеміологічною роллю води виникла потреба в розробці прискорених методів виявлення (індикації) у воді Е. соїі, патогенних бактерій та ентеровірусів.
Знезараження води, інфікованої патогенними бактеріями і токсинами, робиться хімічними методами з наступним кип'ятінням.
Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 134; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!