Сбор контрольных образцов для ДНК - анализа

⇐ ПредыдущаяСтр 23 из 39Следующая ⇒

После того как человеческие останки извлечены и могут быть подвергнуты анализу с использованием технологии ДНК-профилирования, необходимо иметь контрольные образцы, по которым можно провести сопоставление. Чаще всего для этих целей применяют образцы, взятые у биологических родственников. В некоторых случаях могут быть обнаружены и подвергнуты анализу биологические трассеологические доказательства, принадлежавшие погибшему войну.

Биологические родственники

У биологических родственников имеется определённая доля общих ДНК. Доля общей генетической конструкции двух индивидуумов определяется степенью их родства.

У родителей и детей половина их ДНК являются общими, а у внуков и их дедушек и бабушек в среднем одна четверть ДНК общие. Наиболее убедительным сравнением ДНК является сравнение с использованием образцов, взятых у родителей и детей без вести пропавших лиц, и поэтому митохондральный или Y-хромосомный ДНК-анализ (см ранее в главе ДНК и идентификация останков) проводят только при отсутствии таких образцов.

Статистическое значение биологических родственников для идентификации станков

Рекомендуется брать контрольные образцы от ближайших биологических родственников (детей), поскольку они имеют половину общих ДНК с пропавшим человеком. Степень пригодности различных сочетаний родственных связей иллюстрируется нижеследующей таблицей. Чем больше процентный показатель, тем выше пригодность образца, взятого у родственника, для проведения идентификации. Несмотря на то, что образцы от ближайших родственников дают самую высокую вероятность определения идентичности, тем не менее, рекомендуется брать образцы более чем от одного родственника с тем, чтобы свести к минимуму возможность неверного (случайного) совпадения результатов анализов материалов, взятых у родственников и останков

Родственники у которых взяты контрольные образцы	Вероятность идентичности*
Брат или сестра от одних родителей	92,1%
Брат или сестра и тётка или дядя	94,4 %
Брат или сестра и две тётки или двое дядьев по одной семейной линии	97,8 %
Брат или сестра, и тётка и дядя по разным семейным линиям	99,8 %
Брат или сестра и брат или сестра по одному из родителей	98,0 %
Брат или сестра и два брата или две сестры по одному из родителей (одна и та же мать, но разные отцы)	99,4 %
Два брата или две сестры	99,91 %
Один ребёнок	99,9 %
Брат или сестра	99,996 %
Один брат или одна сестра по материнской линии	99,95 %
Два брата или две сестры по материнской линии	99,996 %

Сбор образцов от родственников связан с рядом проблем этического и правового характера, которые рассмотрены в далее главе («Этические и правовые аспекты использования ДНК для идентификации останков») При планировании сбора образцов необходимо иметь в виду следующее:

1. то, сколько контрольных образцов для идентификации без вести пропавшего человека необходимо собрать, зависит от реальной ситуации. Бывает, что достаточно взять один контрольный образец от одного сына или дочери; тем не менее когда есть такая возможность, всегда рекомендуется иметь образцы хотя бы от двух близких родственников (детей);

2. словесное описание родственных отношений может вводить в заблуждение как сборщиков образцов, так и членов семей без вести пропавших лиц, поэтому рекомендуется составить рисунок родословного дерева с тем, чтобы было понятно точное биологическое родство члена семьи к погибшему солдату. Работники, собирающие контрольные образцы, должны быть хорошо подготовлены и владеть техникой интервьюирования, для того чтобы выявлять и регистрировать точную степень биологического родства. Желательно иметь возможность обратиться к специалисту в области генетики, который смог бы пояснить, подходит ли данный родственник в качестве источника контрольного образца;

3. люди, занимающиеся сбором образцов вовсе должны знать, как отбирать биологические образцы и как с ними обращаться. Желательно, чтобы они также обладали необходимыми знаниями в области санитарии и безопасных методов работы;

4. независимо от предыдущей подготовки весь персонал, задействованный в сборе образцов, должен быть обучен процедурам сбора и понимать важность системы охраны при их передаче;

5. в качестве составной части процесса сбора образцов необходимо заранее планировать оказание психологической поддержки семьям или отдельным лицам, для того чтобы помочь им избежать дальнейших душевных травм;

6. если в данный момент процесс идентификации не включает в себя проведение ДНК-анализа, это вовсе не значит, что не следует собирать образцы. Образцы нужно собрать и сохранить, поскольку в будущем может появиться возможность или необходимость подвергнуть их ДНК-анализу. Это следует разъяснить членам семей, а также сказать им, что образцы могут и не быть использованы. Решение о том, приступать ли к сбору образцов будет зависеть от ряда обстоятельств: от наличия надлежащей правовой базы, в том числе обеспечения системы охраны при передаче образцов; от того, можно ли будет надёжно хранить и регистрировать образцы; В принципе, цель состоит в том, чтобы избежать повторных интервью и несогласованных запросов на взятие образцов ДНК. Таким образом, желательно, чтобы прижизненные данные и образцы ДНК были получены в процессе одного и того же интервью.

Для отбора контрольных образцов можно использовать различные методы. Ниже рассмотрены некоторые технические аспекты этой работы:

1. одним из способов отбора образцов является прокол кожи пальца и сбор капель крови фильтровальной бумагой. Для архивации биологического материала широко используют коммерческий продукт, бумагу FTA®⁸. Если нет в наличии бумаги FTA® или аналогичного коммерческого продукта, то для сбора можно использовать любую чистую абсорбирующую бумагу, например, промокательную или фильтровальную бумагу;

После сбора капель крови необходимо, чтобы они ПОЛНОСТЬЮ ВЫСОХЛИ; и их обязательно НУЖНО ХРАНИТЬ В СУХОМ МЕСТЕ. После воздушной сушки рекомендуется поместить их в герметическую упаковку из пластика или фольги с силикагелевым адсорбером. До тех пор, пока образец крови и бумага остаются сухими, ДНК сохраняет относительную стабильность. Образцы, собранные на бумагу FTA®, сохраняют стабильность при комнатной температуре в течение дол го-го времени (многие годы);

2. собирать можно не только образцы крови, но и другой биологический материал. Мазки, взятые изо рта (буккальные мазки). Для сбора клеточного материала тампон, или ватную палочку, нужно потереть о буккальную поверхность (внутреннюю поверхность щеки) примерно в течение 30 секунд. Для консервирования мазков их, также как и образцы крови, нужно высушить на воздухе. После высушивания мазки помещают в конверты из бумаги или фольги и направляют в лабораторию, где их желательно хранить при температуре -20°С. Образцы мазков можно также собирать, используя бумагу FTA®, и тогда их не нужно будет хранить при низкой температуре до проведения анализа;

Если во время отбора образцов невозможно осуществить их сушку на воздухе или если нет морозильников для хранения образцов, можно использовать серийно выпускаемые буферные растворы. В этом случае мазок помещают в пластмассовую тубу и добавляют в неё буферный раствор, препятствующий распаду ДНК.

Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 363; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 18 19 20 21 222324 25 26 27 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!