Этап Накопление чистой культуры
§ Изучение колоний, выросших на плотных питательных средах
§ Приготовление мазков из выросших колоний для изучения морфологических свойств микроорганизмов
§ Выделение чистой культуры
§ Пересев отмеченной изолированной колонии на скошенной агар.
Этап. Идентификация исследуемой культуры и определение ее антибиотикограммы.
§ Изучение характера роста чистой культуры
§ Приготовление и микроскопия мазков для проверки чистой для проверки чистой культуры
§ Изучение культуральных, биохимических, серологических свойств выделенного микроорганизма
§ Определение чувствительности выделенного микроорганизма к АБП
Этап. Учет результатов.
§ Учет результатов изучения культуральных, биохимических, серологических свойств выделенного микроорганизма
§ Определение вида возбудителя
§ Учет результатов определения чувствительности выделенного микроорганизма к АБП
§ Выдача бактериологического заключения
Условия культивирования бактерий.
Для культивирования бактерий необходимо соблюдать ряд условий
1. Наличие полноценной питательной среды. Питательная среда должна обладать водной основой, органическим источником углерода и энергии, определенными pH и осмотическим давлением.
2. Температура культивирования. По этому показателю бактерии делятся на мезофилы, термофилы, психрофилы
3. Атмосфера культивирования. Для роста и размножения строгих аэробов необходим кислород. Аэробы хорошо растут на поверхности агара в чашках Петри. Для культивирования факультативных анаэробов используют те же методы, т. к. при наличии кислорода у них преобладает оксидативный метаболизм над ферментацией как наиболее энергетически выгодный
|
|
|
4. Время культивирования зависит от времени генерации. Большинство бактерий культивируют для получения видимого роста в течение 18-48 ч.
5. Освещение. Для выращивания фототрофных микроорганизмов необходим свет. Некоторые условно-патогенные микобактерии в зависимости от освещенности образуют пигмент, что используется при идентификации.
Типы и механизмы питания бактерий.
Классификация бактерий по типам питания и способам получения энергии.
· Аутотрофы – используют для построения своих клеток неорганический углерод в виде CO2
· Гетеротрофы – используют органический углерод, легкоусвояемыми источниками которого являются гексозы, многоатомные спирты и аминокислоты.
· Фототрофы – используют свет, который является источником энергии.
· Хемотрофы -получают энергию за счет окислительно-восстановительных реакций.
Классификация питательных сред по составу, консистенции и назначению
|
|
|
В зависимости от консистенции питательные среды могут быть жидкими, полужидкими и плотными. Плотность среды достигается путем добавления агара. Агар – это полисахарид, получаемый из водорослей, плавится при температуре 100 градусов цельсия, остывает при 45-50 градусов. Агар добавляют в концентрации 0,5% - для полужидких сред и 1,5-2% - для создания плотных сред.
В зависимости от состава и цели применения различают простые, сложные, элективные, минимальные, дифференциально-диагностические и комбинированные среды. К простым средам относятся пентонная вода, питательный бульон, мясопентонный агар. На основе этих простых сред готовят сложные, например сахарный и сывороточный бульоны, кровяной агар.
По назначению: общего назначения и специального назначения.
Назначение:
а) основные (общеупотребительные) среды служат для культивирования
большинства патогенных микробов. Это вышеупомянутые
МПА, МПБ, бульон и агар Хоттингера, пептонная вода;
б) специальные среды служат для выделения и выращивания
микроорганизмов, не растущих на простых средах. Например, для
культивирования стрептококка к средам прибавляют сахар, для
пневмо- и менингококков − сыворотку крови, для возбудителя коклюша
|
|
|
− кровь;
в) элективные (избирательные) среды служат для выделения
определенного вида микробов, росту которых они благоприятствуют,
задерживая или подавляя рост сопутствующих микроорганизмов.
Так, соли желчных кислот, подавляя рост кишечной палочки,
делают среду элективной для возбудителя брюшного тифа. Среды
становятся элективными при добавлении к ним определенных антибиотиков,
солей, изменении рН.
Под элективными понимают среды, на которых лучше растет какой-то определенный микроорганизм. Например, щелочной агар, имеющий pH 9, служит для выделения холерного вибриона. Другие бактерии, в частности кишечная палочка, из-за высокого pH на этой среде не растут.
Дифференциально-диагностические среды служат для изучения ферментативной активности бактерий. Они состоят из простой питательной среды с добавлением субстрата, на который должен подействовать этот фермент, и индикатора, меняющего свой цвет в результате ферментативного превращения субстрата. Примером служат среды Гисса, используемые для изучения способности бактерий ферментировать сахара.
Комбинированные питательные среды сочетают в себе элективную среду, подавляющую рост сопутствующей флоры, и дифференциальную среду, диагностирующую ферментативную активность микроба.
Хромогенные – применяются для дифференциации бактерий по культуральным свойствам.
Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 352; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!