Теоретические и практические аспекты замораживания зародышей.



Для замораживания зародышей готовят среду из следующих компонентов (: натрия хлорид; калия хлорид; гидроортофосфат безводный; дигидро- ортофосфат однозамещенный; магния хлорид; калия хлорид безводный; натрия пируват; глюкоза. В этот раствор добавляют 20 % фетальной сыворотки крови теленка и 100 тыс. ЕД/л пенициллина (калиевой соли).

Затем готовят серию растворов с разной концентрацией глицерина и насыщают зародыш глицерином одно- или многоступенчатым способом. После чего зародыши сразу замораживают в стеклянных пробирках или ампулах, пластиковых соломинках, которые маркируют.
Охлаждение проводят в несколько этапов:

 1) снижают температуру от 20 °С до минус 5—7 °С со скоростью 1—10 °Св мин;

 2) при минус 6—7 °С проводят искусственную кристаллизацию, касаясь пинцетом, переохлажденным в жидком азоте, поверхности контейнера с зародышами;

3) продолжают охлаждать со скоростью 0,3 °С в 1 мин до минус 36 °С; 4) погружают в жидкий азот для быстрого охлаждения до минус 196 °С. Хранят замороженные эмбрионы в сосудах Дьюара. Для оттаивания емкости с зародышами быстро переносят в водяную баню с температурой 25—37 °С и держат до исчезновения льда.
Вместе с раствором криопротектора эмбрион помещают на часовое стекло, и удаляют криопротектор, помещая зародыш в заранее приготовленные растворы глицерина убывающей концентрации. Когда эмбрионов замораживают в соломинках с раствором глицерина и сахарозы, то после оттаивания соломинку несколько раз встряхивают (подобно термометру). При этом пробка, закрывающая соломинку, должна быть направлена вверх. Для уравновешивания осмотического давления и удаления криопротектора из зародыша соломинку помещают вертикально в водяную баню с температурой 25—37 °С. Затем приступают к пересадке эмбриона.
Наиболее перспективным методом является глубокое замораживание зародышей в жидком азоте при температуре минус 196 °С. Зародыши крупного рогатого скота лучше других переносят замораживание и размораживание; выживаемость — 50—70 %.

41-44=118-121

Подготовка овец к осеменению в предслучный период.

Не менее чем за 2 – 2,5 месяца до случки следует произвести отъем ягнят. После отъема необходимо провести диагностику маток на наличие маститов, а также проверить состояние зубов и общее состояние здоровья. Маток, непригодных для случки, выбраковывают и формируют из них стадо для нагула живой массы. В первую очередь выбраковка идет по состоянию здоровья: животные с заболеваниями легких, хроническими маститами, а также слишком старые для разведения непригодны.

Чтобы получить от каждой матки не менее одного жизнеспособного ягненка, необходимо хорошо подготовить маток и баранов к случке, обеспечить суягных и подсосных маток полноценными кормами.

В предслучной период маткам выделяют участки с хорошим травостоем, поят их не менее двух раз в день, дают минеральную подкормку, а при необходимости и концентраты.

Установлено, что при кормлении маток в предслучной и случной периоды зеленым кормом оплодотворяемость в многоплодие их повышаются. В среднем овца съедает в день около 8 кг травы.

Если овцы пасутся на пастбище с сочным водопоем, поить их необходимо дважды в день – утром и вечером. Если же питание идет сухим травостоем, потребности в воде увеличиваются (животным необходимо больше слюны для увлажнения пищи). В этом случае необходимо организоваться трехразовое поение (утром — перед выходом отары на пастбище, в полдень — во время отдыха и вечером — после пастьбы).

Процесс оплодотворения, его стадии. Видовые особенности.

Оплодотворение – процесс слияния мужской половой клетки с женской, в результате чего образуется новая клетка – зигота с диплоидным набором хромосом.

После полового акта спермии в составе плазмы попадают на краниальную часть влагалища, омывая шейку матки, и проталкиваются через канал шейки в матку. В дальнейшем двигаются за счет собственной подвижности, способности двигаться против тока течковой слизи, за счет антиперистальтических движений мышечных структур репродуктивной системы самки. Стимуляция оплодотворения – за счет простагландинов и окситоцина. У животных с маточным типом осеменения спермии заполняют рога матки. Область соединения матки с яйцепроводом – резервуар для спермиев.

В процессе продвижения спермиев по половым путям самки большая часть их погибает, из нескольких миллиардов или миллионов выживает несколько тысяч. Через перешеек в ампулу яйцепровода проникают только жизнеспособные половые клетки (у которых мембрана длительное время сохраняет стабильность). Спермии подвергаются воздействию различных факторов со стороны секрета матки и яйцепроводов, что вызывает различные изменения в спермиях и окончательное созревание половых клеток.

Процесс оплодотворения происходит в верхней трети яйцепровода. Спермии ожидают яйцеклетку, которая тоже должна «дозреть». При наличии активных спермиев в яйцепроводе ооцит отделяет направительные тельца и созревает. Неполноценные гаметы не вступают в процесс оплодотворения, или зародыши гибнут на ранних стадиях развития.

Стадии оплодотворения:

1)Денудация

Яйцеклетка освобождается от лучистого венца. Основная роль принадлежит спермиям, которые, внедряясь между клетками фолликулярного эпителия, выделяют ферменты (гиалуронидазу). За счет этих ферментов разжижается гиалуроновая кислота, входящая в состав студенистого вещества, связывающего клетки лучистого венца.

Рассеивание клеток лучистого венца может происходить под влиянием спермиев животных другого вида. Также процессу денудации способствует наличие ворсинок на слизистой яйцепровода. Для оплодотворения не обязательно полное освобождение яйцеклетки от лучистого венца.

2)Вторая стадия

Спермии проникают через прозрачную оболочку яйцеклетки в околожелточное пространство. В это время заканчивается созревание яйцеклетки (выделение второго направительного тельца), ядро, содержащее гаплоидный набор хромосом, превращается в женский пронуклеус.

3)Третья стадия

Один, реже несколько спермиев проникают через желточную оболочку клетки в её цитоплазму. Это уже строго специфический процесс, в яйцеклетку могут проникать только спермии своего вида. После внедрения головка спермия быстро увеличивается в размере в десятки раз, достигает величины ядра яйцеклетки, превращается в мужской пронуклеус, имеющий гаплоидный набор хромосом.

4)Четвертая стадия

Пронуклеусы постепенно сближаются, вступают в тесный контакт, быстро уменьшаются в объеме и полностью сливаются. Образуется качественно новая клетка – зигота, ядро которой содержит диплоидный набор хромосом.

Суперфекундация – множественное оплодотворение. Оплодотворение некоторых яйцеклеток спермой разных производителей. Относительно редко наблюдается у коров и кобыл в начале беременности. При этом у самок вновь проявляется стадия возбуждения, они оплодотворяются. Наступает добавочная беременность, рождаются детеныши, соответственно срокам наступивших беременностей.

Полиспермия – проникновение в цитоплазму яйцеклетки двух или нескольких спермиев. приводит зиготу к гибели или обусловливает развитие уродливых плодов. При физиологической полиспермии спермии, не сливающиеся с ядром, активизируют зиготу к дроблению аналогично реакции организма на введение инородного белка.

Во время полового акта эякулят жеребца изливается во влагалище и отчасти овлажняет шейку матки. Во время совокупительных движений сильно набухшая головка полового члена жеребца, плотно охватываемая стенками влагалища, действует по принципу поршня и проталкивает эякулят из влагалища в матку.
У свиньи узкое влагалище без резких границ переходит в шейку матки, вследствие чего головка полового члена проникает в канал шейки и эякулят изливается непосредственно в матку. Эякулят большого объема (600—1000 мл) заполняет и просвет рогов; таким образом спермии значительно приближаются к яйцепроводам.
У кобелей в момент эякуляции усиливается эрекция; увеличивающаяся головка полового члена заполняет все пространство переднего отдела влагалища. Одновременно эрекция добавочного пещеристого тела, расположенного возле головки пениса, а также вестибулярных кавернозных тел самки вызывает ущемление полового члена и тем самым предотвращает выделение спермы наружу через вульву, оставляя для нее открытым путь лишь в матку.
У животных с влагалищным осеменением сперма попадает только во влагалище и лишь как исключение в устье шейки матки. Невозможность излияния спермы в полость матки у жвачных обусловлена кратковременностью полового акта, малым объемом эякулята и — главное, наличием хорошо выраженных поперечных складок на слизистой оболочке шейки.


Дата добавления: 2019-02-22; просмотров: 491; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!