Биологические особенности клостридий газовой гангрены
Газовая гангрена вызывается группой анаэробных палочек относящихся к роду Clostridium (анаэробных Гр+ спорообразующих палочек), семейства Bacillac. В 90% газовая гангрена вызывается C.Perfringens, реже C.Novy, C.Septioum, C.Histoliticum, C.Sordelii и всегда сочетается с гноеродными кокками - стафилококками и стрептококками.
Развитие газовой гангрены связано с выработкой некротического экзотоксина. Некоторые серовары клостридии перфрингенс синтезируют энтеротоксин приводящий к развитию ОКИ (острой кишечной инфекции).
C.Perfringens
Морфология: крупные (4-8 мкм) палочки с закругленными краями. Споры
располагаются центрально. Неподвижны в отличии от других клостридий.
Тинкториальные свойства: Гр+.
Метаболизм: ферментативный, хемоорганотрофы.
Тип дыхиния: анаэроб (менее строгие, чем другие клостридии).
Патогенетический признак: экзотоксин.
Культивирование: растут в анаэробных условиях при 37-42 градусах Цельсия, рН 7,2
через 6-8 часов. Рост сопровождается бурным газообразованием.
Культуральные свойства: помутнение и газообразование на среде Китта- Тароцци, на среде Цейсслера - прозрачные, оливково-зеленые колонии с зоной гемолиза, на Вильсона-Блера - в виде чечевичных зерен.
Биохимические свойства: сахаролитически активен - ферментирует лактозу,
сахарозу, мальтозу с образованием кислоты и газа.
Протеолитические свойства: медленно разжижает желатину, свертывает молоко,
|
|
|
восстанавливает нитриты в нитраты. Индол не образует, образует сероводород.
Антигенные свойства: различают 5 сероваров клостридий перфрингенс - А, В, С, О,
Е отличающих друг от друга по антигенам и биохимическим свойствам токсинов.
Алгоритм микробиологического исследования при газовой гангрене
Первый день. Микроскопия исследуемого материала, окраска по Грамму и по Ожешко. Наличие Гр+ спороносных палочек позволяет вьщать ориентировочный ответ: клостридии. Исследуемый материал делят на две порции (для биопробы и бакисследований). Часть материала засевают на среду Китта-Тароцци, Вильсона-Блера и агар Цейсслера. Культивируют в анаэробных условиях при 43 градусах Цельсия. При появлении через 6 часов признаков роста (почернение и разрывы высокого столбика Вильсона-Блера, а также наличие зоны гемолиза, колоний на среде Цейсслера). Выделяют чистую культуру на среде Китта- Тароцци.
Про водят идентификацию по морфологии, биохимической активности и подвижности. Для определения видов возбудителей газовой гангрены ставят биопробу.
Для постановки биопробы из другой части материала экстрагируют экзотоксин. С этой целью материал растирают в стерильной ступке с песком, заливают физ.раствором для экстракции токсина на I час и фильтруют через бумажный фильтр. Полученный фильтрат токсина разливают в 5 проб ирок по 0,9 мл.
|
|
|
В каждую пробирку приливают по 0,6 мл антитоксических сывороток против каждого возбудителя газовой гангрены: перфрингенс, новви, септикум, хистолитикум, сорделли. В 6 пробирку вносят физ.раствор.
Смесь токсина с антитоксическими сыворотками оставляют при комнатной темпетаруре на 40 минут для нейтрализации токсина. В опыт берут шесть пар мышей, которым внутривенно вводят по 0,5 мл из каждой пробирки. Гибель животных наступает в сроки от 5 часов до 3 дней. При положительном результате в живых из 12 мышей остаются контрольные мыши и одна пара из опытных мышей, у которых произошла нейтрализация токсина соответствующей антитоксической сывороткой.
Если остались живы мыши, которым ввели смесь токсина с сывороткой перфрингенс, дают ответ: C.Perfringens. При отрицательном результате биопробы стявят биопробы с чистой культурой.
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 148; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!