Получение метиловых эфиров жирных кислот

⇐ ПредыдущаяСтр 5 из 7Следующая ⇒

Принцип метода. Получение метиловых эфиров основано на кипячении пробы липидов в абсолютном метаноле с метилатом натрия и экстрагировании полученного продукта диэтиловым эфиром.

Приборы: весы лабораторные 2-го класса точности; баня песчаная; шкаф вакуум-сушильный; отгонная установка.

Реактивы и материалы: метанол абсолютный; метилат натрия, 5 %-ный раствор; эфир диэтиловый; фенолфталеин, 1 %-ный спиртовой раствор; сульфат натрия безводный; фильтровальная бумага.

Химическая посуда: колба с воздушным холодильником вместимостью 150 см³; делительная воронка вместимостью 100 см³; коническая колба вместимостью 50 см³; склянка с притертой пробкой вместимостью 10 см³; химическая воронка; измерительные цилиндры вместимостью 10 и 20 см³; микропипетка вместимостью 0,1 см³ с ценой деления 0,01 см³.

Техника выполнения. Пробы липидов в количестве 0,5 г помещают в колбу вместимостью 150 см³, приливают 10 см³ абсолютного метанола, вводят 0,05 см³ 5 %-ного раствора метилата натрия, присоединяют воздушный холодильник и кипятят на песчаной бане при температуре 75...80⁰С в течение 1,5 ч. Затем отгоняют избыток спирта, содержимое колбы переносят в делительную воронку, ополаскивая колбу два раза диэтиловым эфиром, беря его каждый раз по 5 см³. В воронку добавляют 2 см³ воды и экстрагируют метиловые эфиры диэтиловым эфиром три раза, беря его по 10 см³. Эфирные вытяжки промывают водой до нейтральной реакции по фенолфталеину, сушат безводным сульфатом натрия и фильтруют. Растворитель отгоняют, метиловые эфиры сушат в вакуум-сушильном шкафу при комнатной температуре и затем хранят в герметически закрытых склянках на холоду в темноте.

Хроматографирование образца и расчет количественного

Содержания жирных кислот

Принцип метода. Этот метод основан на получении хроматограммы метиловых эфиров исследуемого образца липидов, идентификации и количественном определении составляющих компонентов по площадям пиков в процентах.

Реактивы: метиловый эфир пальмитиновой кислоты.

Химическая посуда: газовый хроматограф; инъекционный шприц.

Техника выполнения. В хроматограф, когда достигнуто постоянство нулевой линии, вводят образец. Для этого пробу метиловых эфиров набирают в инъекционный шприц, прокалывают им колпачок дозатора и вводят содержимое. Момент ввода пробы фиксируется на нулевой линии.

Самописец прибора вычерчивает хроматограмму. В случае отсутствия в смеси той или иной жирной кислоты на хроматограмме будет отсутствовать соответствующий ей пик.

Для качественной идентификациии параллельно при тех же условиях (скорость движения ленты, скорость газа-носителя, температура и т.д.) прописывают хроматограмму известной стандартной кислоты, чаще всего пальмитиновой.

После проведения анализа, т.е. после выхода последнего компонента и возвращения пера самописца на нулевую линию, установку выключают, хроматограмму снимают и приступают к ее обработке. Для этого проводят на хроматограмме прямую через основание пика от точки ввода пробы до прямой части нулевой линии выхода всех компонентов анализируемой смеси. Затем из максимумов высот пиков опускают на проведенную горизонтальную линию перпендикуляры и точно измеряют расстояние между перпендикуляром и отметкой впуска смеси на диаграмме. Такой же замер производят и для стандартной кислоты.

Для определения величины относительного удерживаемого объема берут отношение времени удерживания анализируемой кислоты к времени удерживания стандартной. Полученное значение сравнивают с относительными удерживаемыми объемами, приведенными в таблице 1.

Для количественного определения содержания каждой кислоты в смеси определяют площадь пика. Принимая сумму площадей всех пиков за 100 %, вычисляют содержание каждой жирной кислоты С в % по формуле (6)

, (6)

где S_i-площадь пика определяемого компонента;

åS_i-сумма площадей пиков всех компонентов.

Определив по хроматограмме процентное содержание ненасыщенных жирных кислот, можно найти йодное число смеси (Йч_см) в % J₂ по формуле (7)

ЙЧ_см=(С_оЙЧ_о+С_лЙЧ_л+С_леЙЧ_ле+...)/100, (7)

где С₀-содержание олеиновой кислоты, %;

С_л-содержание линолевой кислоты, %;

С_ле-содержание линоленовой кислоты, %;

ЙЧ_о-теоретическое йодное число олеиновой кислоты, % I₂;

ЙЧ_л-теоретическое йодное число линолевой кислоты, % I₂;

ЙЧ_ле-теоретическое йодное число линоленовой кислоты, % I₂.

Контрольные вопросы:

1. На чем основан процесс разделения в газожидкостной хроматографии?

2. Что такое время удержания и удерживаемый объем?

3. Назовите основные узлы газового хроматографа.

4. На чем основан количественный и качественный анализ при проведении газожидкостной хроматографии?

5. Какие колонки используются в газожидкостной хроматографии?

6. Типы газовых смесей используемых в газовой хроматографии?

7. Как провести метилирование жирных кислот растительного масла?

Лабораторная работа № 3

Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 547; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 1 2 3 456 7 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!