Интенсивность реакции выражается следующим образом:
++++ все клетки осели, жидкость в пробирке совершенно прозрачна. Результат реакции резко положительный;
+++ осадок меньше, нет полного просветления жидкости. Результат реакции положительный;
++ осадок еще меньше, жидкость мутнее. Результат реакции сомнительный;
на дне пробирки незначительный осадок, жидкость мутная. Сомнительный результат реакции;
- осадка нет, жидкость равномерно мутная, как в контроле антигена. Отрицательный результат реакции
К работе № 2
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РПГА, РНГА)
Методы постановки РНГА
 |  |  |  |  |
В этой реакции микробный или растворимый антиген адсорбируется на поверхности эритроцитов, которые в таком «нагруженном» состоянии приобретают способность агглютинироваться иммунной сывороткой, специфичной для микробного антигена. Учитывается реакция по образованию агглютинированными эритроцитами осадка в виде зонтика на дне планшетов, в то время как в контроле, без иммунной сыворотки, они оседают в центре, образуя пуговку с ровными краями. Реакция гемагглютинации является более чувствительной, чем агглютинация бактерий, применяется для диагностики при многих инфекционных заболеваниях, особенно у детей, при необходимости выявления антител в более низких титрах. Эта реакция может быть использована и для обнаружения антигенов при применении специфических сывороток
|
|
|
К работе № 3
Реакция преципитации (РП)
РП ставят в тех случаях, когда приходится пользоваться растворимыми антигенами: лизатами, экстрактами, гаптенами. При взаимодействии такого антигена с антителом в присутствии электролитов (изотонический раствор хлорида натрия) образуется преципитат в виде мутного «кольца» или осадка.
РП обычно применяют для определения Аг при диагностике ряда инфекций (сибирская язва, менингит, пневмония и др.); в судебной медицине - для определения видовой принадлежности крови, спермы и т. д.; в санитарно-гигиенических исследованиях - при установлении фальсификации продуктов; с ее помощью определяют филогенетическое родство животных и растений.
Для этой реакции необходимы следующие компоненты.
1. А н т и т е л а (преципитины) - иммунная сыворотка с высоким титром антител (не ниже 1:100000). Титр преципитирующей сыворотки устанавливают по наибольшему разведению антигена, с которым она дает реакцию. Сыворотку обычно применяют неразведенной или в разведении 1:5-1:10.
2. А н т и г е н - растворенные вещества белковой или липоидно-полисахаридной природы (полные антигены, гаптены, экстракты или лизаты микробов или других клеток).
|
|
|
3. И з о т о н и ч е с к и й р а с т в о р х л о р и д а н а т р и я.
Внимание! Все компоненты, участвующие в этой реакции, должны быть совершенно прозрачными.
Основные методы проведения реакции преципитации: реакция кольцепреципитации и реакция преципитации в агаре (геле).
Методика
В преципитационную пробирку с помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3 мл (5-6 капель) сыворотки. На сыворотку осторожно наслаивают антиген в таком же объеме, наливая его тонкой пастеровской пипеткой по стенке пробирки. Пробирку при этом держат в наклонном положении. При правильном наслаивании между сывороткой и антигеном должна получиться четкая граница. Осторожно, чтобы не перемешать жидкости, пробирку ставят в штатив. При положительном результате реакции на границе антигена и антитела образуется мутное «кольцо» - преципитат. Реакция сопровождается рядом контролей.
Дата добавления: 2018-10-27; просмотров: 108; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!