КЛИНИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЖЕЛЕЗ ВНУТРЕННЕЙ СЕКРЕЦИИ
Для изучения эндокринной функции органов, в том числе и желез внутренней секреции, применяются следующие методы: экстирпации желёз внутренней секреции (эндокринных), избирательное разрушение или подавление инкреторных клеток в организме, трансплантация эндокринных желез, введение экстрактов эндокринной железы интактным животным или после удаления соответствующей железы, введение химически чистых гормонов интактным животным или после удаления соответствующей железы (заместительная «терапия»), химический анализ экстрактов и синтез гормональных препаратов, методы гистологического и гистохимического исследования эндокринных тканей, метод парабиоза или создания общего кровообращения.
Метод экстирпации. Экстирпация — хирургическое вмешательство, заключающееся в удалении структурного образования, например, железы. Экстирпация (extirpatio) от латинского extirpo, extirpare — искоренять. Различают частичную и полную экстирпацию. После экстирпации изучают различными методами сохранившиеся функции организма. После удаления какой-либо эндокринной железы возникает комплекс расстройств, обусловленных выпадением регуляторных эффектов тех гормонов, которые вырабатываются в этой железе. Например, предположение о наличии эндокринных функций у поджелудочной железы нашло подтверждение в опытах И. Меринга и О. Минковского, показавших, что ее удаление у собак приводит к выраженной гипергликемии и глюкозурии; животные погибали в течение 2-3 нед. после операции на фоне явлений тяжелого сахарного диабета. В последующем было установлено, что эти изменения возникают из-за недостатка инсулина - гормона, образующегося в, островковом аппарате поджелудочной железы.Вследствие травматичности оперативного вмешательства вместо хирургического удаления эндокринной железы может быть использовано введение химических веществ, нарушающих их гормональную функцию. Например, введение животным аллоксана нарушает функцию β - клеток поджелудочной железы, что приводит к развитию сахарного диабета, проявления которого практически идентичны расстройствам, наблюдаемым после экстирпации поджелудочной железы.У животного с удаленной эндокринной железой можно ее имплантировать заново в хорошо васкуляризированную область тела, например, под капсулу почки или в переднюю камеру глаза. Такая операция называется реимплантацией. Для ее проведения обычно используют эндокринную железу, полученную от животного-донора.После реимплантации постепенно восстанавливается уровень гормонов в крови, что приводит к исчезновению нарушений, возникших ранее в результате дефицита этих гормонов в организме. Например, Бертольдом (1849) было показано, что у петухов пересадка половых желез в брюшную полость после кастрации предотвращает развитие посткастрационного синдрома. Возможна также пересадка эндокринной железы животному, у которого операция экстирпации ранее не производилась. Последнее может быть использовано для изучения эффектов, возникающих при избытке гормона в крови, так как его секреция в данном случае осуществляется не только собственной эндокринной железой животного, но и имплантированной. С помощью этого метода были открыты инкреторная функция поджелудочной железы и её роль в развитии сахарного диабета, роль гипофиза в регуляции роста тела, значимость коры надпочечников и др. Предположение о наличии эндокринных функций у поджелудочной железы нашло подтверждение в опытах И.Меринга и О.Минковского (1889 г.), показавших, что её удаление у собак приводит к выраженной гипергликемии и глюкозурии. Животные погибали в течение 2 – 3 недель после операции на фоне явлений тяжелого сахарного диабета. В последующем было установлено, что эти изменения возникают из‑за недостатка инсулина — гормона, образующегося в островковом аппарате поджелудочной железы. С экстирпацией эндокринных желёз у человека приходится сталкиваться в клинике. Экстирпация железы может быть преднамеренная (например, при раке щитовидной железы орган удаляется полностью) или случайная (например, при удалении щитовидной железы удаляются паращитовидные железы). Метод избирательного разрушения или подавления инкреторных клеток в организме.Если удаляется орган, который содержит клетки (ткани), выполняющие разные функции, дифференцировать физиологические процессы, выполняемые этими структурами трудно, а иногда вообще не возможно. Например, при удалении поджелудочной железы, организм лишается не только клеток, вырабатывающих инсулин (β‑клетки), но и клеток, вырабатывающих глюкагон (α‑клетки), соматостатин (δ‑клетки), гастрин (G‑клетки), панкреатический полипептид (ПП‑клетки). Кроме того, организм лишается важного экзокринного органа, обеспечивающего процессы пищеварения. Как понять какие клетки ответственны за ту или иную функцию? В этом случае можно попытаться избирательно (селективно) повредить какие‑либо клетки и определить недостающую функцию. Так при введении аллоксана (уреидамезоксалевой кислоты), происходит избирательный некроз β‑клеток островков Лангерганса, что позволяет изучать последствия нарушения продукции инсулина без изменения других функций поджелудочной железы. Производное оксихинолина - дитизон вмешивается в метаболизм α-клеток, образует комплекс с цинком, что также нарушает их инкреторную функцию. Второй пример — избирательное повреждение фолликулярных клеток щитовидной железы ионизирующим излучением радиоактивного йода (131I, 132I). При использовании этого принципа в лечебных целях говорят о селективной струмэктомии, в то время как хирургическую экстирпацию с теми же целями называют тотальной, субтотальной. К этому же типу методов можно отнести и наблюдение за больными с повреждением клеток в результате иммунной агрессии или аутоагрессии, применение химических (лекарственых) средств, угнетающих синтез гормонов. Например,антитиреоидных средств — мерказолила, попилтиоурацила.
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Метод трансплантации эндокринных желез. Пересадка железы может производиться тому же животному после ее предварительного удаления (аутотрансплантация) или интактным животным. В последнем случае применяется гомо- и гетеротрансплантация. В 1849 году немецкий физиолог Адольф Бертольд установил, что пересадка кастрированному петуху в брюшную полость семенников другого петуха приводит к восстановлению исходных свойств у кастрата. Эту дату считают датой рождения эндокринологии. В конце XIX века Штейнах показал, что пересадка половых желез морским свинкам и крысам меняет их поведение и продолжительность жизни. В 20-х годах нашего столетия пересадка половых желез с целью «омоложения» применил Броун-Секар и широко использовал русский ученый С.Воронцов в Париже. Эти опыты трансплантации дали богатый фактический материал о биологических эффектах гормонов половых желез. У животного с удаленной эндокринной железой можно ее имплантировать заново в хорошо васкуляризированную область тела, например, под капсулу почки или в переднюю камеру глаза. Такая операция называется реимплантацией.
Метод введения гормонов. Может вводиться экстракт эндокринной железы или химически чистые гормоны. Гормоны вводят интактным животным или после удаления соответствующей железы (заместительная «терапия»). В 1889 г. 72 летний Броун‑Секар сообщил об опытах, проведенных на самом себе. Вытяжки из семенников животных оказали на организм учёного омолаживающее действие. Благодаря применению метода введения экстрактов эндокринной железы было установлено наличие инсулина и соматотропина, тиреоидных гормонов и паратгормона, кортикостероидов и др. Разновидностью метода является кормление животных сухой железой или препаратами, приготовленными из тканей. Использование чистых гормональных препаратов позволило установить их биологические эффекты. Нарушения, возникшие после хирургического удаления эндокринной железы, могут быть откорректированы посредством введения в организм достаточного количества экстракта данной железы или индивидуального гормона. Применение этих методов у интактных животных привело к проявлению обратной связи в регуляции эндокринных органов, т.к. создаваемый искусственный избыток гормона вызывал подавление секреции эндокринного органа и даже атрофию железы.
Химический анализ экстрактов и синтез гормональных препаратов. Производя химический структурный анализ экстрактов из эндокринной ткани, удалось установить химическую природу и идентифицировать гормоны эндокринных органов, что в последующем привело к получению искусственным путем эффективных гормональных препаратов для исследовательских и лечебных целей.
Метод парабиоза. Не путайте с парабиозом Н.Е.Введенского. В этом случае речь идёт о явлении. Мы будем говорить о методе, при котором используется перекрёстное кровообращение у двух организмов. Парабионты — организмы (два или более) имеющие связь между собой через кровеносную и лимфатическую систему. Такая связь может иметь место в природе, например, у сросшихся близнецов, или создаётся искусственно (в эксперименте). Метод позволяет оценить роль гуморальных факторов в изменении функций интактного организма одной особи при вмешательстве в эндокринную систему другой особи. Особенно важными являются исследования сросшихся близнецов, имеющих общее кровообращение, но раздельные нервные системы. У одной из двух сросшихся сестер описан случай беременности и родов, после чего лактация наступила у обеих сестер, и кормление было возможно из четырех молочных желез.
Радионуклидные методы (метод меченых веществ и соединений). Заметьте не радиоактивных изотопов, а веществ или соединений, меченных радионуклидами. Строго говоря, вводятся радиофармпрепараты (РФП) = носитель+ метка (радионуклид). Этот метод позволяет изучать процессы синтеза гормонов в эндокринной ткани, депонирование и распределение гормонов в организме, пути их выведения. Радионуклидные методы принято делить на invivo и invitro исследования. При invivo исследованиях различают invivo и invitro измерения. Прежде всего все методы можно разделить на invitro- и invivo-исследования (методы, диагностику) Invitro-исследования.Не следует путать invitro- и invivo-исследования (методы) с понятием invitro- и invivo-измерения. При invivo – измерениях всегда будет invivo‑ исследования. Т.е. нельзя измерить в организме, то, чего не было (вещество, параметр) или не ввели в качестве тестирующего агента при исследовании. Если ввели в организм тестирующее вещество, затем взяли биопробу и провели invitro – измерения, исследование всё равно следует обозначить как invivo – исследование. Если тестирующее вещество в организм не вводили, а взяли биопробу и провели invitro – измерения, с введением или без введения тестирующего вещества исследование следует обозначить как invitro – исследование. В радионуклиднойinvivo диагностике чаще используется захват РФП из крови инкреторными клетками и включается в образующиеся гормоны пропорционально интенсивности их синтеза. Примером использования этого метода является изучение щитовидной железы с помощью радиоактивного йода (131I) или пертехнетата натрия (Na99mTcO4), коры надпочечников с помощью меченного предшественника стероидных гормонов, чаще всего холестерина (131I‑холестерола). При радионуклидныхinvivo исследованиях проводят радиометрию или гамма‑топографию (сцинтиграфию). Радионуклидное сканирование как метод устарело. Раздельная оценка неорганической и органической фаз внутритиреодного этапа йодного обмена. При изучении контуров самоуправления гормональной регуляции при invivo‑исследованиях применяют тесты стимуляции и подавления. Для изучения мест связывания, накопления и метаболизма гормонов, их метят с помощью радиоактивных атомов, вводят в организм и применяют ауторадиографию. Срезы изучаемых тканей помещают на радиочувствительный фотоматериал, типа рентгеновской пленки, проявляют и места затемнения сравнивают с фотографиями гистологических срезов.
Исследование содержания гормонов в биопробах. Чаще в качестве биопроб используется кровь (плазма, сыворотка) и моча. Этот метод является одним из наиболее точных для оценки секреторной деятельности эндокринных органов и тканей, но он не дает характеристики биологической активности и степени гормональных эффектов в тканях. Используются различные методики исследования в зависимости от химической природы гормонов, в том числе биохимические, хроматографические и биологические методики тестирования, и опять же радионуклидные методики. Среди радионуклидныхмедодов различаютрадиоиммунный (РИА) иммунорадиометрический (ИРМА) радиорецепторный (РРА) В 1977 г. Розалин Ялоу получила Нобелевскую премию за усовершенствование методов радиоиммунологического исследования (RIA) пептидных гормонов. Радиоиммунный анализ, получивший сегодня наибольшее распространение ввиду высокой чувствительности, точности и простоты, основан на применении меченных изотопами йода (125I) или тритием (3H) гормонов и связывающих их специфических антител. У большинства больных сахарным диабетом инсулиновая активность крови снижена редко, чаще она нормальная или даже повышена Второй пример гипокальциемия. Часто паратирин повышен. Радионуклидные методы позволяют определять фракции (свободные, связанные с белками) гормонов. При радиорецепторном анализе, чувствительность которого ниже, а информативность выше, чем радиоиммунного, оценивается связывание гормона не с антителами к нему, а со специфическими гормональными рецепторами клеточных мембран или цитозоля. При изучении контуров самоуправления гормональной регуляции при invitro‑исследованиях применяют определение полного «набора» гармонов различных уровней регуляции, связанных с исследуемым процессом (либеринов и статинов, тропинов, эффекторных гормонов). Например, для щитовидной железы тиролиберина, тиротропина, трийодтирозина, тироксина. Относительная специфичность регуляции: введение йода и диойдтирозина угнетает продукцию тиротропина. Сравнение физиологической активности крови, притекающей к органу и оттекающей от него, позволяет выявить секрецию в кровь биологически активных метаболитов и гормонов. Исследование содержания предшественников синтеза и метаболитов гормонов в крови и моче.Нередко гормональный эффект в значительной степени определяется активными метаболитами гормона. В других случаях предшественники синтеза и метаболиты, концентрация которых пропорциональна уровням гормона, более доступны для исследования. Метод позволяет не только оценить гормонопродуцирующую активность эндокринной ткани, но и выявить особенности метаболизма гормонов. Наблюдение за больными с нарушенной функцией инкреторных органов. Это может дать ценную информацию о физиологических эффектах и роли гормонов эндокринной железы. Причиной аддисоновой болезни чаще всего является первичное поражение коры надпочечников аутоиммунным процессом (идиопатическая аддисонова болезнь) и туберкулёзом.
Методы гистологического и гистохимического исследования эндокринных тканей. Эти методы позволяет оценить не только структурные, но и функциональные характеристики клеток, в частности, интенсивность образования, накопления и выведения гормонов. Например, явления нейросекреции гипоталамических нейронов, эндокринная функция кардиомиоцитов предсердий были обнаружены с помощью гистохимических методов.
Методы генной инженерии. Эти методы реконструкции генетического аппарата клетки позволяют не только исследовать механизмы синтеза гормонов, но и активно вмешаться в них. Механизмы особенно перспективны для практического применения в случаях стойкого нарушения синтеза гормонов, как это случается при сахарном диабете. Примером экспериментального использования метода может служить исследование французских ученых, которые осуществили пересадку в печень крысы гена, контролирующего синтез инсулина. Внедрение этого гена в ядра клеток печени крысы привело к тому, что в течение месяца клетки печени синтезировали инсулин.
КЛИНИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Методы, оценивающие функцию щитовидной железы.
2. Методы, оценивающие наличие и выраженность аутоиммунного процесса в щитовидной железе.
3. Методы, оценивающие структурно-морфологические особенности в щитовидной железе.
А) Для оценки функционального состояния щитовидной железы, иначе говоря, тиреоидной функции, в настоящее время применяются следующие методы.Для оценки функционирования щитовидной железы наиболее оптимальным следует считать определение уровней тиреоидных гормонов в крови. Может ли человек, страдающий болезнью щитовидной железы, сам оценить результаты гормональных исследований? Безусловно, получить общее представление о функции своей щитовидной железы сможет, используя для этих целей стандартные результаты гормональной оценки гипо-физ-тиреоидной системы, приведенные ниже. Однако одно дело иметь общее представление о состоянии железы, а другое дело самостоятельно лечиться. Самолечение может привести к непредсказуемым негативным последствиям для здоровья. Поэтому в вопросах лечения следует обязательно руководствоваться указаниями врача.
В случае повышения тиреотропного гормона при нормальных значениях уровней свободного Т3 иТ4 следует говорить о снижении функции щитовидной железы, так называемом субклиническом гипотиреозе. При этой форме патологии щитовидной железы симптомы болезни могут отсутствовать, но, несмотря на это, следует обратиться к врачу.
В тех случаях, когда повышение ТТГ сопровождается снижением ниже нормы уровней тироксина и трийодтиронина, говорят о снижении функции щитовидной железы в виде манифестного гипотиреоза. Это состояние уже, как правило, сопровождается появлением клинических проявлений гипотиреоза и подлежит обязательной медикаментозной коррекции.Противоположное состояние, то есть избыточная функция ЩЖ, также подразделяется на субклинический тиреотоксикоз (нормальные значения свободных Т3 и Т4 при сниженном ТТГ) и развернутый клинически тиреотоксикоз, сопровождающийся повышенными уровнями тиреоидных гормонов и снижением тиреотропного гормона гипофиза.Конечно, возможны и нестандартные результаты гормональных исследований. Например, когда определяется одновременное повышение уровней всех исследуемых гормонов (свободных Т3, Т4 и ТТГ), наблюдаемое, в частности, при тяжелой нетиреоидной патологии, включая соматические и психические заболевания, приеме ряда медикаментов (амиодарона, больших доз пропранолола, рентгеновских йодконтрастных средств), в период выздоровления после тяжелых заболеваний и при наличии у больного некомпенсированной первичной надпочечниковой недостаточности.При пониженной функции включение йода в щитовидной железе обычно снижается, при повышенной – наблюдается существенное нарастание включения радиойода. Оценка функции проводится по скорости поглощения радиойода, величине максимального накопления и скорости спада кривой. Раствор йодида натрия принимается внутрь натощак в дозе 0,2 МБк для 131I и 500 кБк для 123I. Равное количество активности препарата вводится в специальный фантом. Радиометрия ЩЖ проводится через 2, 4, 6, 24, и 48 часов после дачи радиойода.
При оценке йодпоглотительной функции следует знать, что от общей принятой дозы радиойода у здорового человека в ЩЖ накапливается:
• через 2 часа – 10–15 %;
• через 4 часа – 15–21 %;
• через 24 часа – 25–40 %;
• через 48 часов – 23–43 %.
По результатам исследования выделяют три типа кривой поглощения:
1. гипертиреоидный: повышенный захват радиойода через 2–4 часа с последующим снижением захвата через 24–48 часов;
2. «йодной жажды» (у больных с йоддефицитнымэутиреоидным зобом и молодых лиц с вегетососудистой астенией): повышенный захват радиойода без последующего снижения захвата через 24–48 часов;
3. гипотиреоидный пониженный захват радиойода во все точки исследования. Третий тип кривой имеет низкую диагностическую ценность, так как может наблюдаться не только у лиц с гипотиреозом, но и в случаях блокированной щитовидной железы, обусловленной приемом больным препаратов йода.
Оценка йодпоглотительной функции ЩЖ в настоящее время используется достаточно редко в связи с широким внедрением в клиническую практику прямых методов определения гормонов ЩЖ, наличием лучевой нагрузки и относительно низкой чувствительностью.
Б) Для оценки наличия и выраженности аутоиммунного процесса в ЩЖ может быть использовано определение антитиреоидных тел в крови:
1) антител к тиреоглобулину;
2) антител к тиреоиднойпероксидазе;
3) антител к рецептору ТТГ.
Тиреоглобулин – белок, представляющий собой некую матрицу для синтеза тиреоидных гормонов. Он образуется клетками щитовидной железы (тироцитами). В небольших количествах тиреоглобулин высвобождается из ЩЖ в кровь, где оказывается доступным для иммунокомпетентных клеток. Антитела к тиреоглобулину выявляются:
• у 70–80 % больных аутоиммунным тиреоидитом;
• 30–49 % пациентов с диффузным токсическим зобом;
• 10–15 % больных с неаутоиммунными заболеваниями ЩЖ.
Тиреоиднаяпероксидаза может представлять собой поверхностно-клеточный антиген. В небольших концентрациях может быть выявлена в системном кровотоке. Антитела тиреоиднойпероксидазе выявляются:
• у 90–95 % больных аутоиммунным тиреоидитом;
• 80 % пациентов с диффузным токсическим зобом;
• 15–20 % больных с неаутоиммунными заболеваниями ЩЖ.
Антитела к рецептору тиреоглобулина являются членом семейства G-белок-сопряженных рецепторов. С их помощью реализуются эффекты ТТГ на захват йода, синтез тиреоиднойпероксидазы и тиреоглобулина, а также секрецию гормонов, стимулируется йодирование и синтез тиреоидных гормонов.
В) К методам, позволяющим оценить структурно-морфологические особенности щитовидной железы, относятся:
• ультразвуковое исследование (УЗИ);
• тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ);
• сцинтиграфия;
• компьютерная томография.
Наиболее простым и доступным методом является УЗИ, который рекомендуется в качестве контрольного исследования для того, чтобы иметь возможность наблюдать за железой в динамике, отслеживать рост или отсутствие роста узлов ЩЖ, своевременно выявлять кисты.
Кроме того, метод сегодня широко используется как вспомогательный при проведении тонкоигольной аспирационной биопсии ЩЖ. Выполнение ТАБ желательно:
• при наличии пальпируемого образования ЩЖ;
• при наличии образования ЩЖ, размер которого превышает 1–1,5 см;
• для уточнения диагноза в случаях диффузной гиперплазии ЩЖ.
Это простой, доступный и безопасный, а также единственный надежный метод дооперационной диагностики узловых образований в щитовидной железе. При этом точность метода составляет 95 %, чувствительность – 83 %.
Результаты тонкоигольной аспирационной биопсии оформляются в виде стандартных заключений и, как правило, позволяют говорить о доброкачественности или о злокачественности патологического процесса.
К доброкачественным, на долю которых приходится около 70 %, относятся:
• коллоидный (пролиферирующий) зоб;
• тиреоидитХашимото.
• подострый (гранулематозный) тиреоидит. Примерно в 10 % случаев выявляются злокачественные процессы. Из числа этих 10 % выделяют:
• папиллярную карциному (60–80 %);
• медуллярную карциному (3-13 %);
• фолликулярную карциному (10–25 %);
• анапластическую карциному (1-10 %);
• злокачественную лимфому.
• метастазы рака в щитовидную железу.
Сцинтиграфия ЩЖ позволяет оценить функциональное строение щитовидной железы как в целом, так и отдельных ее участков. Вместе с тем для проведения сцинтиграфии ЩЖ существуют строго ограниченные показания:
• подозрение на функциональную автономию (активность) узлов в ЩЖ. Причем в условиях йоддефицита доля автономных узлов при эутиреоидном зобе может составлять 10 %;
• подозрение на наличие ЩЖ, расположенной в нетипичном месте;
• выявление метастазов рака ЩЖ.
Компьютерная томография проводится, как правило, после выполнения УЗИ и/или сцинтиграфии ЩЖ с целью оценить положение, форму, размеры и структуру ЩЖ, соотношение ее с другими органами и тканями шеи.
Выполнение компьютерной томографии обязательно в следующих случаях.
1. Наличие загрудинного зоба.
2. Наличие очаговых изменений ЩЖ, частично расположенных загрудинно.
3. Подозрение на прорастание опухолью ЩЖ сосудисто-нервных пучков или трахеи.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 1804; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!