Задача 3. ОХАРАКТЕРИЗОВАТЬ МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСОВ.
Для этого надо знать:
1. В световом микроскопе доступна изучению морфология только наиболее крупных вирусов, размеры которых превышают 200 нм. Они могут быть окрашены по Романовскому-Гимзе и обнаруживаются при иммерсионной микроскопии. Крупные вирусы могут быть обнаружены при фазово-контрастной микроскопии.
2. Менее крупные вирусы, не достигающие величины 200 нм, при помощи особых способов обработки с протравой и импрегнацией, приводящих к увеличению размеров вируса, становятся видимыми при световой микроскопии с иммерсионной системой. Самым лучшим способом является обработка серебрением по Морозову: для протравы используют жидкость Руге (ледяная кислота + формалин) и раствор танина с карболовой кислотой при подогревании, а затем проводят обработку раствором азотнокислого серебра с последующим его восстановлением. Под микроскопом вирусы имеют черный цвет и круглую форму. При обработке по способу Морозова можно обнаружить вирус оспы (тельца Пашена), которые достигают размеров 0,2 мкм.
3. Если облучить вирусы ультрафиолетовыми волнами, а затем сфотографировать их при помощи микронасадки, удается получить снимки вирусов, имеющих размеры около 75 нм.
Для обнаружения вирусов используется и люминесцентная микроскопия, основанная на способности некоторых веществ преобразовывать короткие невидимые ультрафиолетовые лучи в длинные видимые волны.
|
|
|
4. Электронная микроскопия позволила быть доступными наблюдению частицы размером в 1 нм. При этом контраст между частицами и средой удалось увеличить, создавая тени при помощи опыления мазка препарата тяжелыми металлами. При помощи электронной микроскопии обнаружено большое разнообразие морфологии вирусов и изучена ультраструктура вирусных частиц.
5. В тканях, пораженных вирусами, нередко формируются вирусные скопления. Эти скопления вирусных частиц называют вирусными тельцами или вирусными включениями. Они окрашиваются специальными методами и изучаются с помощью светового микроскопа. Образование внутриклеточных включений отмечено при многих вирусных инфекциях. Чаще они обнаруживаются только в определенной ткани, но при некоторых заболеваниях встречаются в разнообразных тканях. Они могут находиться в цитоплазме клетки (вирус оспы), в ядре (вирус герпеса) или в ядре и в цитоплазме (вирус кори). Включения имеют разную величину (от 0,25 до 20-30 нм) и форму (круглая, овальная, грушевидная, веретенообразная, неправильная).
6. Строение включений и их расположение в клетках всегда характерно для определенного возбудителя вирусной инфекции, поэтому их обнаружение используется с диагностической целью. Например, при бешенстве в цитоплазме нервных клеток (преимущественно в ткани аммонова рога) обнаруживаются тельца Бабеша-Негри. Они полиморфны (чаще всего имеют круглую форму), в одной клетке обнаруживаются одно или несколько телец разнообразной формы. При натуральной оспе в цитоплазме эпителиальных клеток обнаруживаются тельца Гварниери овальной, грушевидной, веретеновидной или серповидной формы. Вирусные включения обнаружены и при ряде других вирусных заболеваний.
|
|
|
7. Для выявления внутриклеточных включений пользуются специальными методами обработки мазков или срезов из тканей. Включения можно получить в эксперименте при заражении вирусами экспериментальных животных. Их можно выявить и в культуре тканей при искусственном выращивании вирусов.
8. Вопрос о природе внутриклеточных включений окончательно не изучен. В большинстве случаев включения содержат значительное скопление вирусных частиц, выявляемых под электронным микроскопом, что позволяет рассматривать включения как колонии вируса. Путем триптического переваривания или другими способами включения удается раздробить на элементарные тельца и последними вызвать заболевания в эксперименте с образованием в тканях типичных включений. В отношении телец Бабеша-Негри при бешенстве считают, что эти тельца – результат выпадения ядерных коллоидов.
Дата добавления: 2018-05-09; просмотров: 308; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!